羊痘病毒研究综述

　　4检测技术及基因工程苗的研究
　　该病仅羊感染发病,根据临床症状,结合其流行病学特征,即可做出初步诊断。但遇非典型病例,实验室确诊就尤为重要。现已有一些对羊痘的实验室检测方法,但各有优缺点。病毒培养和分离虽有较高的特异性,但耗时长;因羊痘病毒和副痘病毒有相似的血清型,一些血清学的诊断方法如间接荧光免疫试验、检测抗体的ELISA等,因会出现抗体交叉反应而无法区分来源于牛、绵羊和山羊的羊痘病毒毒株,也不能区分疫苗免疫与自然感染。又因羊痘感染后主要引起细胞介导免疫,动物接触病原后仅产生低水平的中和抗体,故而病毒中和试验敏感性也不高。周碧君等[7]建立了山羊痘(GP)的5种血清学检测方法并进行比较分析,结果表明,琼脂扩散试验适于基层兽医开展山羊痘病例的诊断,对流免疫电泳能提高对抗原或抗体的分辨能力,荧光抗体试验能对感染细胞进行GTPV定位检测,反向被动血凝试验主要用于临床痘疹痂皮和感染细胞中GTPV抗原的定量测定,正向间接血凝试验(IHA)不失为一种GTPV抗体的最佳监测方法。郭巍等[19]依据P32基因和α微管蛋白基因,初步建立了诊断山羊皮肤组织中GTPV的PCR方法;康文玉等[18]参照SPPV P32基因序列,建立了快速、特异、敏感、可定量、可同时检测大量样品的实时荧光定量PCR技术。郭巍等[19]、马维民等[20]、陈轶霞等[21]进行山羊痘病毒P32基因的克隆与表达,为国内研制羊痘病毒诊断试剂和亚单位疫苗奠定基础。
　　预防绵羊痘和山羊痘有多种弱毒疫苗和灭活疫苗,灭活疫苗免疫效果不佳,最多只能提供短暂的保护。绵羊和山羊以1株羊痘病毒免疫后,可以抵抗所有毒株的感染,不论感染毒株来源于亚洲或非洲[30-33]。灭活的许多山羊痘病毒株均可作为灭活疫苗广泛使用[34-37]。目前,正在开发新一代GTPV基因工程疫苗,因为GTPV的基因组较大,有表达多个外来基因的潜力,且将外来基因插在羊痘病毒的非编码区,既不影响其复制也不会影响其抗原性,所以以山羊痘病毒基因组作为其他反刍动物病原基因的载体可生产重组疫苗。如将牛瘟病毒、小反刍兽疫病毒基因克隆于羊痘病毒载体,所研制的重组单一疫苗,将对羊痘、牛瘟、小反刍兽疫均有免疫作用[38-41]。
　　5展望
　　根据羊痘病毒的宿主特异性,研究病毒基因组与宿主特异性有关的基因序列,依此构建重组疫苗,既可抗山羊痘,又可抗绵羊痘。羊痘病毒作为病毒载体,对传递和表达外来病原体的基因构建多种重组疫苗具有很大潜力。对山羊痘和绵羊痘不同毒株的抗原和基因组特性的研究,尤其对羊痘病毒P32蛋白的研究,为研制新的诊断试剂及羊痘的亚单位疫苗奠定了基础,这将会为诊断、流行病学和有效预防控制该病开辟新的领域。
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