雷公藤和昆明山海棠植物根中化学成分的薄层色谱对比研

           作者：黄耀峰， 龚受基， 黄林， 秦秀英， 裴蕾

【摘要】  目的研究雷公藤和昆明山海棠两种植物在临床疗效上存在相似性的原因。方法采用乙醚、氯仿、醋酸乙酯等有机溶剂对雷公藤和昆明山海棠根顺序热提取。通过对其提取液经浓缩后的相对应部位进行薄层色谱对比、化学成分的预测和熔点的测定来判别两种植物的差异。结果雷公藤和昆明山海棠两种植物所含的化学成分基本一致。其薄层色谱法的对比结果，可作为雷公藤和昆明山海棠植物的生药鉴定，以及判断质量的指标。结论雷公藤和昆明山海棠两种植物在临床疗效上具有相似性，主要原因是这两种植物具有很多相同的化学成分。

【关键词】  雷公藤; 昆明山海棠; 化学成分; 薄层色谱法

　雷公藤Triptergiumwilfordii Hook.f.和昆明山海棠T.hypoglaucum (Levi.) Hutch.是属于卫茅科雷公藤属植物，药用部位为根，临床用于治疗类风湿性关节炎、红斑狼疮、多型肾炎及麻风病等[1～3]，均有一定疗效，且两者在临床上疗效有许多相似点。从植物形态上看，两者也十分相似，雷公藤被面为绿色，而昆明山海棠被面为粉白色[4]。据文献报道，雷公藤根中主要含有生物碱，卫茅醇，二萜内酯，三萜类化合物等[5,6]。两者目前国内研究取得重大进展的是抗生育及抗癌研究方面[7～9]。

　　本研究是以乙醚、氯仿、醋酸乙酯等有机溶剂对雷公藤和昆明山海棠植物根顺序热提取。其提取液经浓缩后的相对应部位进行薄层色谱对比、化学成分的预测和熔点的测定来判别两种植物的差异，寻找雷公藤和昆明山海棠两种植物在临床疗效上具有相似性的原因，供临床研究需要。

　　1 材料与仪器

　　1.1 药物与试剂雷公藤根购自桂林市药材站。昆明山海棠根由桂林市药品检验所提供。两种药品均已按照文献方法，作生药学鉴定。乙醚为广州化学试剂二厂生产，批号081014。氯仿由上海试剂一厂生产，规格GB-682-65，批号081216。醋酸乙酯由上海试剂一厂生产，批号080916。其它试剂均为分析纯。

　　1.2 仪器高速粉碎机，上海中药机械厂，型号SF-1703;烘箱，上海市实验仪器厂，型号101-2型;干燥器，上海玻璃仪器一厂生产。

　　2 方法与结果

　　2.1 薄层色谱板的制备

　　取E.meick硅胶27.5 g，加0.5%(W/V)羧甲基纤维素钠的上清液80 ml，充分拌匀，加数滴乙醇，倒入清洁的两块3 mm厚的玻璃中间，另取一块边缘光滑的玻片，从一端刮向另一端而成，室温空气干燥后，置105℃烘箱活化30 min，然后放入干燥器中备用。

　　2.2 实验样品的制备取雷公藤根粉(或昆明山海棠根粉)分别置于连续提取器中，顺次以乙醚，氯仿，醋酸乙酯连续提取，每种溶剂在更换之前，使提取液呈无色透明为止。提取液过滤浓缩，浸膏干燥除去溶剂，分别得到相应的乙醚，氯仿，醋酸乙酯等3个提取部分，供分离、鉴别。

　　2.3 工艺流程图见图1。图1 工艺流程图

　　2.4 乙醚提取液的薄层对照雷公藤根(或昆明山海棠根)粉经乙醚连续提取后，乙醚液过滤，浓缩至浆状物，分别称取0.1 g加入乙醚至10 ml，用血色素管点样30 μl,薄层对照，点好样的薄层板：①置于盛有石油醚∶醋酸乙酯=8∶2的展开缸内饱和1 h，然后展开，展距14 cm，展毕除去展开剂,于紫外灯下观察萤光。结果见图2。由图2可知，采用乙醚提取液，石油醚和醋酸乙酯为展开剂的薄层对照，雷公藤有8个斑点，昆明山海棠有10个斑点，表明雷公藤从1～8的斑点与昆明山海棠的1～8斑点相同，这说明含有相同的化学成分;②置于盛有环己烷∶醋酸乙酯∶冰醋酸=20∶2.5∶0.7的展开缸内直接展开，展距14 cm，展毕除去展开剂后于紫外灯下观察萤光。结果见图3。由图3可知，采用乙醚为提取液，环己烷、醋酸乙酯及冰醋酸为展开剂的薄层对照，雷公藤及昆明山海棠均有11个斑点，说明化学成分相同。　　图2 雷公藤和昆明山海棠乙醚 图3 雷公藤和昆明山海棠乙醚提取液的薄层对照(展开剂：石 提取液的薄层对照(展开剂：环油醚和醋酸乙酯) 己烷、醋酸乙酯及冰醋酸)

　　2.5 氯仿提取液的薄层对照雷公藤根(或昆明山海棠根)经乙醚提取后的根粉继续用氯仿连续提取，提取液过滤，浓缩呈浆状物，分别称取0.1 g加入氯仿至10 ml，用血色素管点样20 μl薄层对照，点好样的薄层板：①置于盛石油醚∶醋酸乙酯=8∶2的展开缸内饱和1 h，然后展开，展距14 cm，展毕除去展开剂后于紫外灯光下观察萤光。结果见图4。由图4可知，采用氯仿提取液，石油醚和醋酸乙酯为展开剂的薄层对照，雷公藤含有8个斑点，昆明山海棠含有6个斑点，表明雷公藤1～6的斑点与昆明山海棠1～6的斑点相同，这说明含化学成分相同;②置于盛环己烷∶醋酸乙酯∶冰醋酸=20∶2.5∶0.7的展开缸内直接展开，展距14 cm，展毕除去展开剂后于紫外灯下观察萤光。结果见图5。由图5可知，采用氯仿为提取液，环己烷、醋酸乙酯及冰醋酸为展开剂的薄层对照，雷公藤和昆明山海棠均含有8个斑点，说明化学成分相同。氯仿浓缩的浆状物加入石油醚(60～90℃),反复洗涤分得石油醚部分和不溶的黄色固体物。黄色固体物的熔点为92～112℃。对三氯化铁，铁氰化钾，重氮化试剂，4-氨基安替匹林-铁氰化钾，酸酐-浓硫酸，氯仿-浓硫酸呈阳性反应，提示内含酚性化合物和萜甾类。图4 雷公藤和昆明山海棠氯仿 图5 雷公藤和昆明山海棠氯仿提取液的薄层对照(展开剂：石 提取液的薄层对照(展开剂：环油醚和醋酸乙酯) 己烷、醋酸乙酯及冰醋酸)

　　2.6 醋酸乙酯提取液的薄层鉴别和薄层对照雷公藤根(或昆明山海棠根)经乙醚、氯仿连续提取后，继以醋酸乙酯连续提取，过滤浓缩至小体积，放置析出沉淀物，过滤，滤饼洗涤干燥得(A)样品,母液连续浓缩至干呈浆状物，加入乙醚分得乙醚可溶部分(B)和乙醚不溶部分(C)。

　　2.6.1 A样品的鉴别对照雷公藤根(或昆明山海棠根)的醋酸乙酯提取部分A样品为砖红色粉末，熔点>295℃能溶于乙醇，氢氧化钠和碳酸氢钠，对三氯化铁-铁氰化钾，重氮化试剂呈阳性反应，提示为多元酚类化合物。