不同炮制方法对亳白芍中芍药苷含量的影响
作者：吴剑坤 毛克臣 庄志宏,黄健,陈志峰,王海霞,何晓东
【摘要】 目的 考察不同炮制方法对亳白芍饮片中芍药苷含量的影响,为稳定白芍的炮制工艺提供依据。方法 采用RP-HPLC法,色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86);流速：1.0 mL/min;柱温：25 ℃;检测波长：230 nm。结果 样品平均回收率为99.195%,RSD=0.8%(n=6),4种不同炮制方法亳白芍饮片中芍药苷的含量分别为0.55%、2.70%、3.40%、3.25%。结论 在白芍的炮制过程中,加热、加水浸泡、硫磺熏对白芍中芍药苷的含量影响较大。
【关键词】 亳白芍;炮制;芍药苷;含量测定
Abstract：Objective To study the effect of different processing methods on paeoniflorin content and to provide a basis for stabilizing the processing technology of white peony root. Methods RP-HPLC method was used to determine the content of paeoniflorin on Agilent Eclipse XDB-C18 (150 mm×4.6 mm, 5 μm), with mobile phase of acetonitrile-0.1% phosphoric acid (14∶86), flow rate of 1.0 mL/min, column temperature of 25 ℃, and detective wavelength of 230 nm. Results The average recovery rate was 99.195%, RSD=0.8% (n=6). The content of paeoniflorin was 0.55%, 2.70%, 3.40%, 3.25%, respectively. Conclusion In the processing of white peony root, heating, water immersion and sulfur smoked have greater effect of paeoniflorin content in white peony root.
Key words：white peony root;processing;paeoniflorin;content determination
白芍为毛茛科植物芍药(Paeunia lactiflora Pall.)的去外皮干燥根。性微寒,味苦、酸,归肝、脾经,具有平肝止痛、养血调经、敛阴止汗的功能,用于治疗头痛眩晕、胁痛、腹痛、四肢挛痛、血虚萎黄、月经不调、自汗、盗汗等[1]。白芍的主要化学成分为芍药苷、牡丹酚、芍药花苷、芍药内酯、苯甲酸等;此外,还含有挥发油、脂肪油、树脂糖、淀粉、黏液质、蛋白质和三萜类成分[2]。其中芍药苷是其主要活性成分,又是中药饮片白芍质量标准的标定成分[3]。亳白芍历来是道地药材之一,由于炮制加工方法不同其芍药苷含量变化较大。笔者以芍药苷为指标,采用HPLC法对亳州产白芍4种不同炮制方法芍药苷的含量进行了测定,为稳定白芍的炮制工艺积累资料。
1 仪器与试药
Agilent 1200 高效液相色谱仪,包括Agilent G1311A四元泵(Quatpump)、Agilent G1322A真空在线脱气机(Degasser)、Agilent G1329A自动进样器(ALS)、Agilent G1315D DAD检测器、Agilent 1200化学工作站;Agilent G1316A(TCC)柱温箱;KH-500SP双频数控超声波清洗器(功率500 W±30%,频率25 kHz、40 kHz±10%,昆山市禾创超声仪器有限公司);AL204型电子天平(METTLER TOLEDO)。
芍药苷对照品购自中国药品生物制品检定所,批号110736-200424;白芍为亳州产白芍。乙腈为色谱纯,其余试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液(14∶86);流速：1.0 mL/min;柱温：25 ℃;检测波长：230 nm。进样量为10 μL。色谱柱的理论板数按芍药苷峰计算为7 465。在此条件下,芍药苷与其他组分均能达到基线分离。色谱图见图1。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取芍药苷对照品适量,加甲醇制成每1 mL含60 μg的溶液,即得。
2.3 供试品溶液的制备
取生品与不同炮制品粉末各约0.1 g,精密称定,置50 mL容量瓶中,精密加入50%(mL/mL)稀乙醇35 mL,称定重量,超声处理30 min,放冷,加50%(mL/mL)稀乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。