氢溴酸加兰他敏贴剂体外释药性和经皮渗透性能研究
1.6 样品溶液浓度测定
药物释放试验中样品溶液浓度的测定采用一阶导数光谱法[6]：以286 nm处波峰和294 nm处波谷间的振幅为指标，用标准曲线法进行定量。经皮渗透试验中样品溶液浓度的测定采用高效液相色谱法[7]：以峰面积为指标用外标法进行定量;其中色谱条件为：色谱柱为Alltima Phenyl (250 mm×4.6 mm,5 μm)，流动相为乙腈磷酸盐缓冲液(20 mmol/L磷酸二氢钾水溶液1 000 mL加三乙胺1.4 mL，用磷酸调pH至3.3)(体积比8∶92)，流速为0.65 mL/min，柱温为30 ℃，检测波长为210 nm，进样量为20 μL。
2 结果与讨论
2.1 样品溶液浓度测定
采用一阶导数光谱法测定药物释放试验中样品溶液浓度的方法简单、快捷和准确;氢溴酸加兰他敏浓度在13～130 μg·mL-1范围内线性良好(r=0.999 9，n=6);方法平均回收率为97.23%，RSD为1.12%。经皮渗透试验中样品溶液浓度低(达到 ng·mL-1级)而且样品含有无法消除干扰吸收的杂质，因此采用高效液相色谱法测定(图1);结果表明该方法氢溴酸加兰他敏进样量在4.524 ～ 904.8 ng范围内与峰面积线性关系良好(Y=0.11X，r2=1.000，n=10)，氢溴酸加兰他敏在48 h内稳定性好(RSD=0.72%，n=5)，方法重复性好(RSD=0.72%，n=5)，精密度高(RSD=0.72%，n=5)。
2.2 药物释放性能
释放度是衡量经皮给药系统药物释放能力的主要参数。在经皮给药系统中，药物首先从贮库中释放出来，到达皮肤表面，进而经皮渗透进入体内发挥作用。本文采用扩散池法对氢溴酸加兰他敏透皮贴剂的释放度进行了测定，结果表明该贴剂(药物含量为1.7 mg·cm-2)24 h的累积释放量均超过95%;释放曲线(图2)显示药物在初始阶段快速释放，而在后阶段释放速率减少但相对稳定;拟合结果(表1)表明，氢溴酸加兰他敏贴剂的释放曲线符合Higuchi方程，即药物的释放量与时间的平方根呈线性关系，释放速率为(461.9±41.9) μg·cm-2·h-1/2(n=4)。
2.3 经皮渗透性能
体外经皮渗透特征是评价经皮给药系统的重要指标之一。本文采用扩散池法对氢溴酸加兰他敏透皮贴剂经离体猪皮的渗透性能进行考察，结果表明该贴剂(药物含量为1.7 mg·cm-2)24 h累积渗透量为(20.904±3.050) μg·cm-2(图3)，拟合结果(表2)表明渗透曲线符合零级动力学方程，其透皮速率为(1.270±0.229) μg·cm-2·h-1，透皮时滞为(6.4±0.7) h(n=6)。
2.4 不同透皮贴剂经皮渗透性能比较
本研究制备的氢溴酸加兰他敏贴剂具有良好的药物释放性能和一定程度的经皮渗透性能，但经皮(猪皮)渗透性能欠佳，24 h累积渗透量仅为21 μg·cm-2，透皮速率仅为1.3 μg·cm-2·h-1，且透皮时滞较长为6 h。为比较不同透皮贴剂经皮渗透性能，笔者曾以加兰他敏游离碱和烟碱为药物以相同配方分别制得透皮贴剂并进行经离体猪皮渗透实验，结果表明(表3)加兰他敏游离碱的渗透速率和24 h累积渗透量约为其盐的1.7倍;加兰他敏游离碱比其盐有更好的渗透特性但渗透性能仍然不佳，其渗透速率和24 h累积渗透量仅为烟碱的6%，透皮时滞延长3.5 h。表2 氢溴酸加兰他敏贴剂的渗透速率和透皮时滞表3 不同透皮贴剂药物透过猪皮的渗透性能
2.5 经皮渗透试验中皮肤的选择
在经皮渗透试验中，一般选用适当的动物皮肤模型进行透皮研究，如大鼠、小鼠、家兔、蛇、猪、裸鼠等。裸鼠其皮肤无毛，能避免脱毛时对角质层的损伤，其皮肤结构也与人相似，为较理想的选择，但其价格昂贵。大鼠、小鼠和家兔皮肤常用作实验材料，但制备离体皮肤时需脱毛，化学脱毛与电动剃刀脱毛效果均不理想。猪皮的渗透性和人皮的渗透性接近，脱毛较容易，且后续该贴剂药效学研究(另文报道)采用猪为试验动物，故本实验采用猪皮作为皮肤模型。值得注意的是，皮肤的选择和处理严重影响透皮实验的重复性，因为同一动物，背部和腹部皮肤的渗透性不同;同一部位，处理方法或处理程度不一其渗透性也不同。本试验采用猪背部皮肤，但处理时发现除去其皮下脂肪后其表皮厚度不一。经皮渗透试验结果表明重复性较差，故猪皮作为实验模型还需慎重考虑。
2.6 Franz扩散池法的准确度和精密度
本文进行体外药物释放和经皮渗透性能研究时均采用Franz扩散池装置。笔者曾以氢溴酸加兰他敏溶液为研究对象，不使用实验皮肤，对普遍使用的Franz扩散池法进行准确度和精密度考察。结果表明随着抽样次数增多，方法的准确度和精密度下降。为提高该方法的准确度和精密度，可减少抽样次数，减少抽样溶液体积和增加扩散池容积。
3 结 论
本研究采用Franz扩散池装置和一阶导数光谱法考察氢溴酸加兰他敏透皮贴剂的药物释放性能以及采用Franz扩散池装置和高效液相色谱测定方法考察氢溴酸加兰他敏贴剂经离体猪皮的渗透性能，结果表明该贴剂(1.7 mg·cm-2)24 h累积释放量超过95%，贴剂24 h累积渗透量为21 μg·cm-2，透皮速率为1.3 μg·cm-2·h-1，透皮时滞为6 h。因此，本研究制备的氢溴酸加兰他敏贴剂具有良好的药物释放性能和一定程度的体外经皮渗透性能。
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