HPLC法测定红穿破石中大黄素的含量

　　2.4  线性关系的考察

    分别精密吸取大黄素对照品溶液(6.3 μg/mL)1、2、4、6、8、10 mL,置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,各进样10 μL,连续进样2次,测定峰面积。以对照品进样量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程：Y＝4 172.28A＋0.46,r＝0.999 9,结果表明,大黄素在0.006 3～0.063 μg范围内呈良好的线性关系。

　　2.5  精密度试验

    取大黄素对照品溶液,各重复进样6次,测定峰面积,结果大黄素峰面积值为265.8、268.5、265.8、268.3、267.9、267.7,RSD＝0.4%。表明具有较好的精密度。

　　2.6  重现性试验

    取同一批的样品6份,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,测定大黄素峰面积,结果为222.2、223.9、222.0、225.2、223.7、222.6,RSD＝0.5%。表明该法重现性良好。

　　2.7  稳定性试验

    取同一供试品溶液,分别于配制后0、4、8、12 h,依法测定峰面积,结果RSD＝0.25%,表明样品溶液在12 h内基本稳定。

　　2.8  加样回收率试验
   
　　取已知大黄素含量的红穿破石粉末约0.2 g,平行称取6份,分别精密称定,各加入一定量的大黄素对照品,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,在所确定的HPLC条件下进行测定。按上述色谱条件测定峰面积,计算回收率。结果大黄素的平均加样回收率为102.0%,RSD＝1.58%,说明该方法准确可靠。见表1。表1  大黄素回收率测定结果（略）

　　2.9  样品测定

    取红穿破石样品,按“2.3”项下方法操作,在上述色谱条件下进行含量测定。结果见表2。表2  样品含量测定结果(略)

　　3  讨论

    大黄素标准品在紫外分光光度计扫描下,最大吸收波长为225、285、435 nm,在选定的流动相下,其中波长为285 nm时,大黄素的峰最高,附近没有杂质峰,基线平稳。故选定285 nm为检测波长。本试验首次采用HPLC法对广西产道地药材红穿破石的主成分大黄素进行含量测定。大黄素具有抗炎、抑菌、利尿、利胆等药理作用,这进一步证实民间常用于尿路感染、急慢性肾炎、肾结石的治疗是有一定道理的。本试验仅考察广西等10个地区的红穿破石,且不同产地的红穿破石的大黄素含量差异较大,桂林产的红穿破石的大黄素含量最高,同一株植物根的含量最大,约为茎的2倍。这些差异可能是由药材的产地、生长环境、采收期不同等原因造成。

【参考文献】
  　　[1] 广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准[S].南宁：广西科学技术出版社,1990.53－54.

　　[2] 王血芬,卢文杰,陈家源,等.翼核果化学成分的研究[J].药学学报, 1993,28(2)：122－125.

　　[3] 王 虎,陈华庭,徐楚鸿.肾衰丸中大黄素的含量测定[J].中国医院药学杂志,2005,25(9)：833－835.