HPLC法测定金茵颗粒剂中绿原酸的含量

来源:岁月联盟 作者: 时间:2015-06-05

                 作者:李涛,麒麟,苗术,刘建华

【摘要】  目的 采用高效液相色谱法测定金茵颗粒剂中绿原酸的含量。方法 Kroasil ODS 柱(4.6 mm×250 mm);柱温:室温;流动相:0.3%乙酸-甲醇(74∶26);流速:0.9 mL/min;检测波长:327 nm。结果 该方法的线性范围为65~325 μg/mL,回归方程为:A=24 239 869C-31 292,r=0.999 3;平均回收率为100.10 %,RSD=0.87%(n=6)。结论 该方法可作为金茵颗粒剂的质量控制方法。

【关键词】  高效液相色谱法;金茵颗粒剂;绿原酸;含量测定

    Abstract:Objective To establish a HPLC method to determind the content of chlorogenic acid in Jinyin Granules. Method The mobile phase was 0.3%HAc-Methonal (74∶26). The UV detection wavelength was 327 nm. The mobile speed was 0.9 mL/min. Separation column was Kroasil ODS (4.6 mm×250 mm). Result A good linearity was obtained in the range of 65~325 μg, regression A=24 239 869C-31 292, r=0.999 3. The average recovery was 100.10%, RSD was 0.87% (n=6). Conclusion The method was good for determining chlorogenic acid in Jinyin Granules.
   
  Key words:HPLC;Jinyin Granules;chlorogenic acid;content determination
 
    金茵颗粒剂是由金钱草、茵陈、枳实、熊胆粉等6味中药材经水提取、减压干燥后与一定量糖粉混合,经现代工艺制备而成,具有清热解毒、利胆退黄、行气止痛之功效,可用于治疗胆囊炎、胆结石等病症。茵陈中的绿原酸是该颗粒剂中的有效成分,因此,我们建立了该制剂中绿原酸的HPLC测定方法,该法具有快速、准确、灵敏度高的特点,可作为该制剂的质量控制方法。

  1  仪器与试药

    Waters公司高效液相色谱仪,包括Waters-600输液泵、2487紫外-可见光检测器、7725i手动进样器。
   
  绿原酸对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号753-9003),金茵颗粒剂由齐齐哈尔医学院研制生产(批号030305,030306,030307)。甲醇为色谱纯,水为超纯水,冰醋酸为分析纯。

  2  方法与结果

  2.1  色谱条件[1]
  
  Kroasil ODS 柱(4.6 mm×250 mm);柱温:室温;流动相:0.3%乙酸-甲醇(74∶26);流速:0.9 mL/min;检测波长:327 nm;进样量10 μL;流动相经0.45 μm微孔滤膜过滤。在本实验条件下,绿原酸的色谱峰分离较好(见图1)。

  2.2  对照品溶液的配制
   
  精密称取绿原酸对照品13 mg于10 mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度。

  2.3  标准曲线的建立
   
  精密吸取上述绿原酸对照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL分别置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,按上述色谱条件分别进样10 μL(每份重复进样2次),测得峰面积。以峰面积A为纵坐标、绿原酸对照品溶液的浓度(C)为横坐标,绘制标准曲线,并求得线性回归方程为:A=24 239 869C-31 292,r=0.999 7。

  2.4  供试品溶液的制备[2]
   
  精密称取本品适量(0.8 g),加热水30 mL使溶解,静置后过滤,热水洗涤。合并滤液,调pH值至2.0,用乙酸乙酯提取6次,第1次15 mL,以后每次10 mL,合并乙酸乙酯提取液,水浴蒸干,用甲醇稀释至2 mL,过0.45 μm滤膜,作为供试品溶液。

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