HPLC法测定红穿破石中大黄素的含量

来源:岁月联盟 作者:黄维安,蒙毅,范卫锋 时间:2015-06-05

【摘要】  目的 建立红穿破石中大黄素含量的高效液相色谱测定方法。方法 选用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25)为流动相,检测波长为285 nm。结果 大黄素在0.0063~0.063 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为102.0%,RSD=1.58%(n=6)。结论 本法简便,准确,可用于红穿破石中大黄素的含量测定。

【关键词】  红穿破石;大黄素;高效液相色谱法

    Abstract:Objective To establish a HPLC method for determining emodin in Radix et Caulis Ventilaginis leiocarpae. Methods Stationary phase was Agilent Eclipse XDB-C18 (4.6 mm×150 mm, 5 μm), mobile phase was methanol-0.1%phosphoric (75∶25), detection wavelength was 285 nm, flow rate was 1.0 mL/min and column temperature was 30 ℃. Results There was good linearity in the range of 0.006 3~0.063 μg for emodin (r=0.999 9). The average recovery of emodin was 102.0% with RSD=1.58%. Conclusion This method is rapid and accurate. It can be applied to control the quality of Radix et Caulis Ventilaginis leiocarpae.
  
  Key words:Radix et Caulis Ventilaginis leiocarpae;emodin;HPLC
 
    红穿破石为鼠李科植物翼核果Ventilago leiocarpa Benth.的干燥根和老茎,主产于广西等地[1],具有清热利湿、利尿通淋的作用,特别是对消石具有特殊功效,民间常用于尿路感染、急慢性肾炎、肾结石的治疗,现已有多个制药厂家把它作为治疗结石症的重要组方。王氏等[2]报道,从广西产红穿破石根和茎中分离到大黄素、大黄素甲醚、1,2,4,8-四羟基-3-甲基蒽醌、翼核果醌-Ⅰ、翼核果素,其中大黄素为该植物的主要化学成分。有关红穿破石的主成分含量测定尚未见报道。本试验采用HPLC法对红穿破石中大黄素进行含量测定,为药材生产和质量标准提供科学依据。

  1  仪器与试药
   
  美国Agilent1100系列高效液相色谱仪(包括四元泵,自动进样器,脱气机,紫外可见检测器,柱温箱和Agilent1100化学工作站),BUG40型超声波清洗器(上海必能信有限公司)。
   
  大黄素对照品(批号110756-200110,含量测定用)由中国药品生物制品检定所提供,纯度在98%以上;红穿破石由广西玉林制药有限责任公司提供,来源于广西各地,经广西玉林制药有限责任公司中药鉴定室专家鉴定。水为重蒸馏水,甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。

  2  方法与结果

  2.1  色谱条件
  
  Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25);流速:1.0 mL/min;检测波长:285 nm;柱温:30 ℃;进样量:10 μL。理论板数按大黄素计算应不低于3 000。在此色谱条件下,红穿破石样品能够达到基线分离(见图1)。

  2.2  对照品溶液的制备

    精密称取大黄素对照品适量,加甲醇制成每1 mL含大黄素6.3 μg的溶液,作为对照品溶液。

  2.3  供试品溶液的制备

    取红穿破石粉末适量,取0.4 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 mL,称定重量,超声30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,滤液用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,作为供试品溶液。

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