经前舒对大鼠海马神经元细胞ERβ蛋白和基因表达的影响

　　3.1  经前舒颗粒含药血清对大鼠海马神经元细胞活力的影响结果见表1。结果表明给药24 h后，与正常组相比，模型组神经元MTT值显著增加（P<0.05）；给药48 h后，与模型组相比，给药组神经元MTT值显著增加（P<0.05）。表1  不同实验组血清处理24h、48h后对大鼠海马神经元细胞相对活力影响（略）

　　3.2  经前舒颗粒含药血清对大鼠海马神经元ERβ蛋白表达的影响结果见图1及表2。结果显示，与正常组相比，模型组大鼠血清干预的大鼠海马神经元ERβ的蛋白表达水平显著升高（P<0.05），调肝方药经前舒颗粒含药血清的干预能显著改变ERβ蛋白表达水平异常升高的状态。表2  大鼠海马神经元ERβ与内参相对光密度（略）

　　3.3  经前舒颗粒含药血清对大鼠海马神经元ERβ mRNA表达的影响结果见图2及表3。结果显示，与正常组相比，模型组大鼠血清干预的大鼠海马神经元ERβ mRNA表达水平显著升高（P<0.05），调肝方药经前舒颗粒含药血清的干预能显著改变ERβ mRNA表达水平异常升高的状态。表3  大鼠海马神经元细胞ERβmRNA扩增产物与内参相对光密度（略）

　　4  讨论
  
　　雌激素受体（ER）是核受体超家族的成员，是一类配体调节的转录因子，存在ERα和ERβ两种亚型，ERβ在体内分布广泛，在许多组织和细胞中都有分布［6］。研究发现在脑的许多部位如视觉前区、大脑皮质、丘脑、垂体和边缘系统等都存在着雌激素受体，在脑功能中起重要作用［7～10］,β受体主要分布于大脑皮层、海马处，与记忆、认知和行为有关［10，11］。海马是边缘系统的重要组成部分，对情绪、学习和记忆、行为等的调节起重要作用，也是应激反应的高位调节中枢，慢性应激可损害海马，引起其结构和功能的变化［12，13］。抑郁症患者海马体积萎缩可能与出现认知，情感等方面的症状有关［14］。因此，海马是调节情绪的重要脑区，也是应激损伤的主要易感部位。
   
　　本实验采用束缚法制作PMS肝气郁证大鼠模型，在检测方面利用蛋白质印迹技术（Western blot，WB）和半定量的RT-PCR技术对大鼠海马原代神经元中的雌激素受体β蛋白和mRNA表达进行测定，利用ERβ蛋白和mRNA表达量的变化来探讨雌激素受体与PMS肝气郁证的关系。结果表明，与正常组细胞相比，模型大鼠血清干预的海马神经元ERβ蛋白和mRNA表达均显著升高（P<0.05），这说明PMS肝气郁证模型大鼠海马神经元ERβ蛋白和mRNA表达量显著性上调可能是导致经前抑郁的重要病因之一，此病证与脑区ERβ蛋白和mRNA表达量的变化密切相关，这一发现无疑为我们研究经前抑郁的病因提供客观理论与实验依据。而与模型组细胞相比，调肝方药经前舒颗粒含药血清的干预能显著改变ERβ蛋白和mRNA表达水平异常升高的状态，这提示我们经前舒颗粒治疗PMS肝气郁证与调节中枢海马神经元中ERβ蛋白和mRNA表达水平密切相关，虽然目前其具体作用机制尚不清楚，需要进一步研究，但这为经前期综合征肝气郁证的治疗提供了可靠的实验依据。

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