菩人丹胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛功能的影响

                 作者：郝祥俊，贾春华，杜金凯，庞宗然

【摘要】  目的观察苦瓜复方-菩人丹(PRD)胶囊的降糖效果，并探讨其可能的降糖作用机理。方法将苦瓜、人参、丹参等按一定比例组成处方，应用现代制剂技术将其制成胶囊剂。喂食以链脲佐菌素(STZ)造成的糖尿病大鼠，以二甲双胍为阳性对照药物，观察PRD降血糖及对大鼠胰岛A、B细胞的影响。结果PRD能明显降低糖尿病大鼠空腹血糖值，从空腹血糖的动态观察结果来看，PRD治疗组作用缓慢而持久，而二甲双胍组作用较强;胰岛细胞学结果：PRD治疗组与阳性对照药二甲双胍组比较，胰岛B细胞数量较多，胞体较大，颗粒较多;而胰岛A细胞则无明显差异。结论PRD具有降糖功效，其降糖效果的产生，可能在于PRD降低胰岛素抵抗。

【关键词】  菩人丹胶囊;苦瓜;血糖;2型糖尿病;胰岛AB细胞

　糖尿病属祖国医学“消渴病”的范畴，以多饮、多食、多尿为主证。许多研究表明糖尿病的基本病理是“气阴亏损”“瘀血阻滞”，同时“气阴不足，脉络瘀阻”也成为糖尿病并发症产生的病理基础。“益气养阴，泻热逐瘀”由此成为治疗糖尿病及其并发症的主要治则[1]。基于上述认识，贾春华教授[2]经过长期的临床实践，通过对糖尿病病因、病机、治法方药的反复研究与总结，研制出以苦瓜为主的中药复方—菩人丹胶囊(PRD)，结合免疫细胞化学技术，观察其对2型糖尿病大鼠胰岛功能的影响，并探讨其可能的降糖作用机理。

　　1材料与仪器

　　1.1动物Wistar大鼠，体质量160~200 g，♀♂各半，承德医学院实验动物科提供。

　　1.2药物及剂量选择菩人丹胶囊(PRD)由承德中药集团有限责任公司开发处提供，胶囊剂，每粒0.4 g，每10 g PRD含生药45 g，成人推荐剂量为7.2 g·(70 kg)-1·d-1，大鼠相当于人的等效剂量为0.65 g·kg-1，取中剂量为0.65 g·kg-1;盐酸二甲双胍片：华北制药集团华泰药业有限公司生产，批号：冀卫药准字(1995)第011329号，成人推荐剂量为1.5 g·(70 kg)-1·d-1，大鼠相当于人的等效剂量为0.14 g·kg-1。

　　1.3试剂 链脲佐菌素(STZ)：No s-0130,Sigma公司(美国)生产，葡萄糖、磷酸盐缓冲试剂(PBS)、一抗、二抗、三抗、胰岛素(Ins)检测试剂盒，为北京中山试剂有限公司产品。

　　1.4仪器AU640奥林帕斯全自动生化分析仪，GC911/R放射免疫计数器，中国科技大学实业总公司生产。

　　2方法

　　2.1糖尿病大鼠模型的复制Wistar大鼠80只，腹腔注射1%STZ溶液制备糖尿病模型(过程略)，72 h后大鼠空腹8 h，眼眶采血，测定空腹血糖(FBG)，挑选具有多饮、多食、多尿、血糖值大于11.1 mmol/L为糖尿病合并高脂血症模型大鼠。

　　2.2观察指标

　　2.2.1PRD对STZ糖尿病大鼠空腹血糖、空腹血清胰岛素的影响挑选造模成功的30只糖尿病大鼠，随机分成模型组、阳性对照组(二甲双胍治疗组)、PRD治疗组，每组10只。另选10只健康鼠为空白对照组。二甲双胍对照组以0.14 g·kg-1·d-1灌胃，PRD治疗组以0.65 g·kg-1·d-1灌胃;空白对照组及模型组灌服相应容量的蒸馏水;各组动物每天灌胃2次，连续4周。于治疗(1，2，3，4 周)后，禁食、水8h，眼眶采血，离心血清，分别测定空腹血糖值。给药第4周后，各组实验动物于末次给药前禁食、水8 h，眼眶静脉采血，测定空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(Ins)含量。

　　2.2.2PRD对STZ糖尿病模型大鼠胰岛A、B细胞的影响灌胃4周后，各组实验动物断头处死，取胰腺用10%福尔马林固定，常规石蜡包埋。德国进口AO切片机切片4张，裱于多聚赖氨酸载片上，实验指标有胰岛素胰高血糖素。切片免疫组化染色具体操作步骤按试剂说明进行;DAB-H2O2显色3~5 min;水洗后，苏木素复染，盐酸酒精分色，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。阴性对照切片与其相应的实验片裱在一张载片上，以PBS代替一抗，随其它标本一起染色，每批染色均设空白对照，光镜观察各组实验动物胰岛组织中A细胞、B细胞的变化。

　　2.3统计学处理数据以±s表示，前后比较采用t检验;组间比较采用F检验。