甘草中角鲨烯高效液相色谱法测定

　　2.6 标准曲线的绘制准确吸取标准溶液，依次进样2，4，6，8，10 μl，按“2.5”项色谱条件测定峰面积，以峰面积对进样量进行回归，得角鲨烯的回归方程为Y=970.85X-6.336，r=0.999 8;结果表明角鲨烯在0.428～2.14μg范围内线性关系良好。

　　2.7 精密度实验以上述角鲨烯标准品溶液连续进样5次，10 μl/次，按照“2.5”项色谱条件测定峰面积。结果见表1。表1 精密度实验结果重复次数峰面积平均值RSD

　　2.8 稳定性实验精密称取甘草根粉末样品20.000 g ，制成供试液，每隔8 h进样1次，按照“2.5”项色谱条件测定峰面积并计算出角鲨烯含量。结果见表2。表2 稳定性实验结果相隔时间t/h峰面积平均峰面积RSD

　　2.9 重复性实验精密称取甘草根粉末样品20.000 0 g ，3份，每份制成供试液，按照“2.5”项色谱条件测定峰面积并计算出角鲨烯含量。结果见表3。表3 重复性实验结果重复次数样重m/g进样量V/μl峰面积角鲨烯含量

　　2.10 加样回收率实验采用加样回收法，精密称取已知含量的甘草样品，再分别精密添加5 μl角鲨烯标准品溶液，按前述提取方法提取后用氯仿定容至10 ml，进样10 μl，按照“2.5”项色谱条件进行定量分析，测定峰面积并计算出角鲨烯含量，计算回收率，结果分别为：99.86%，99.94%，100.09%，平均回收率：99.96%。符合《中国药典》2005版第Ⅰ部95%～105%的规定。

　　2.11 样品的测定结果将上述人工栽培乌拉尔甘草和甘草种子分别按“2.2”项样品溶液的制备方法制样，在上述“2.5”项色谱条件下测定，采用外标法计算其角鲨烯含量。结果见表4。表4 甘草根和甘草种子中角鲨烯的含量

　　3 结论

　　由上述分析可知，甘草中存在角鲨烯，但含量较低。在色谱条件为：Waters Corporation C18，流动相：乙腈∶甲醇=60∶40，检测波长210 nm，流速2 ml/min，柱温30℃时，甘草根和甘草种子油中角鲨烯峰与其它杂峰得到很好分离，经方法学考察表明，线性关系、精密度、稳定性、重复性、回收率等均符合分析要求，方法准确，可作为定量测定甘草中角鲨烯的有效方法。

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