HPLC法测定茴拉西坦分散片的有关物质

　　2.3 测定波长选择

　　取茴拉西坦对照品用流动相制成每1 mL中含0.01 mg的对照品溶液，在400～200 nm波长处收集紫外吸收光谱(见图2)，结果茴拉西坦在 220 nm、285 nm波长处有最大吸收，考虑到基线噪音的影响，选择检测波长为285 nm[3]。

　　2.4 专属性试验

　　取本品1片，置250 mL量瓶中，加1 mol·L-1的HCl溶液1 mL使崩解，加1 mol·L-1的NaOH溶液1 mL中和，加流动相溶解并稀释至刻度，滤过，作为酸破坏的供试品溶液;取本品1片，置250 mL量瓶中，加1 mol·L-1的NaOH溶液1 mL搅拌使崩解，加1 mol·L-1的HCl溶液1 mL中和，加流动相溶解并稀释至刻度，滤过，作为碱破坏的供试品溶液;取本品1片，置250 mL量瓶中，加3%H2O2溶液1 mL使崩解，放置10 min，加流动相溶解并稀释至刻度，滤过，作为氧化破坏的供试品溶液;取本品1片经4 500 Lx光照射10 d，置250 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，滤过，作为光照破坏的供试品溶液;取本品1片，105 ℃加热0.5 h，置250 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，滤过，作为加热破坏的供试品溶液;取0.20 g按处方比例配制的空白样品，置250 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，滤过，作为辅料溶液。取上述6种溶液测定，结果辅料不干扰试验，样品产生的降解杂质均能与主峰较好分离，说明本方法专属性好。色谱图见图3。

2.5 检出限和定量限

　　在本色谱条件下，分别取茴拉西坦对照品加流动相逐级稀释，进行测定，进样20 μL，按信噪比(S/N)为3∶1，测得茴拉西坦的检出限为0.21 ng;按信噪比(S/N)为10∶1，对照溶液浓度应不低于0.70 ng(定量限)。

　　2.6 稳定性试验

　　取供试品溶液，分别在0、1、3、6、12 h进样测定。结果供试品溶液在1 h内，杂质由0.33%上升至0.37%，3 h内上升至0.49%，6 h内上升至0.62%，12 h内上升至0.79%，表明供试品溶液不够稳定，应新鲜制备。

　　2.7 样品的测定

　　按“2.2“项操作，分别制备供试品溶液及对照溶液。量取对照溶液20 μL注入高效液相色谱仪，调节仪器的灵敏度，使主成分峰的峰高为满量程的20%～25%，准确量取此2种溶液各20 μL注入高效液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍，以自身对照法[1]检测样品的有关物质，结果见表1。　表1 有关物质测定结果

　　3 讨 论

　　3.1 参考有关文献[2]，测定有关物质可采用不加校正因子的主成分自身对照法，此法是国内目前使用最多的杂质测定方法。本文采用该法测定茴拉西坦分散片的有关物质。

　　3.2 进行专属性考察时发现，包括经酸、碱、热、强光、氧化破坏过的样品在内的各种溶液，在茴拉西坦峰保留时间为5.9 min时，相对保留时间为3.3时仍洗脱出杂质峰。因此将有关物质检查的色谱图记录时间记录至主成分峰保留时间的4倍。

　　3.3 专属性考察中发现，本品经氧化、酸、碱破坏严重，故本品应密封。配制的供试品溶液稳定性较差，有关物质检查时供试品溶液应新鲜制备。

　　3.4 经方法学验证，本法简便、准确，灵敏度高，可用于茴拉西坦分散片的有关物质检查。

【参考文献】
  　　[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典：2005年版二部[M].北京：化学工业出版社，2005：附录172.

　　[2]凌大奎. 有关物质及高效液相色谱测定法[J]. 中国药学杂志，2003，30(8)：567-569.

　　[3]娄志红，苑淑俐.HPLC法测定茴拉西坦胶囊含量[J]. 黑龙江医药，2006，19(5)：333-334.

　　[4]张志涛，赵怀清，李见春.茴拉西坦胶囊健康人体生物等效性与药代动力学研究[J]. 淮海医药，2007，25(1)：1-3.

　　[5]周俊，逢秀娟，彭炜，等.茴拉西坦微乳处方及制备工艺考察[J]. 沈阳药科大学学报，2008，25(9)：684-689.