不同来源长春花药材中文多灵的含量比较
【摘要】 目的 建立长春花中文多灵的含量分析方法，比较不同来源长春花药材中文多灵的含量。方法 采用高效液相色谱法，以依利特C18柱为分析柱，甲醇∶水(体积比64∶36，以二乙胺和磷酸调pH11)为流动相，流速为1 mL/min;220 nm为检测波长。 结果 红色长春花、白色长春花以及恩平、阳江、广州紫色长春花样品中文多灵含量分别是1.561、0.390、0.982、0.622、0.587 mg/g。结论 不同来源的长春花中文多灵的含量差异较大。
【关键词】 高效液相色谱法;长春花;文多灵
Abstract:Objective To establish the determination method of vindoline extracted from Madagascar periwinkle (Catharanthus roseus (L.) Don.) and to compare vindoline content in different sources of periwinkle. Methods Eluted at a Yilite C18 column with methanolwater (64∶36) ( adjusted to pH 11 with diethylamine) at flow rate of 1 ml/min,and detected at 220nm,a HPLC method was developed for the determination of vindoline in periwinkle;Results The vindoline content in red periwinkle，white periwinkle in Guangzhou and pink periwinkle from Enping,Yangjiang,and Guangzhou were 1.561,0.390,0.982,0.622,0.587 milligrammes per gramme.Conclusion The contents of vindoline varied greatly among periwinkles from different sources.
Key words:HPLC;Catharanthus roseus (L.) Don.;vindoline
长春花(Catharanthus roseus (L.) Don.)为夹竹桃科长春花属植物，原产于非洲马达加斯加岛西印度一带的热带森林地区，早在宋代以前就传入我国[1]。全株入药，有利尿止血、镇定安神、平肝降压等功效[2]，常用来治疗疟疾、腹泻、糖尿病、高血压、皮肤病及何杰金氏病[3]。长春花含有100多种吲哚生物碱[4]，其中主要成分长春碱临床上广泛用于治疗急性白血病、何杰金氏病、恶性淋巴肉瘤、绒毛膜上皮癌等[5]。文多灵生物碱为长春花植物体内合成长春碱的前体[6]。长春花分布于全国各地，在广东亦有大量栽培，而且种类繁多，但广东省不同来源长春花药材中文多灵的含量情况却未见有文献报道。本文采用高效液相色谱法对5批不同来源的长春花中文多灵的含量进行了测定。
1 仪器与试药
天美LC 2000高效液相色谱仪，包括LC2030紫外检测器，LC2130 PUMP，T2000P色谱工作站。
文多灵对照品购于天津中新药业，纯度为99.5%,符合HPLC定量分析的要求;分析用长春花样品采自广州或广东其他地区，经本校药用植物教研室曾令杰副教授鉴定为长春花(Catharanthus roseus (L.) Don.)，白花长春花(Catharanthus roseus var. albus G. Don,Vinca rosea var. alba Sweet);甲醇为色谱纯，水为双蒸水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件及系统适应性考察
色谱柱：Yilite C18柱(10 μm,4.6 mm×250 mm);流动相：甲醇水(体积比64∶36，以二乙胺和磷酸调pH11);流速：1 mL/min;进样量：20 μL;检测波长：220 nm。在该色谱条件下，文多灵的保留时间为13.591 min。见图1
2.2 对照品的制备
精密称取文多灵0.010 80 g置25 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至25 mL，摇匀，即得质量浓度为0.432 0 mg/mL的对照品贮备液，置冰箱中保存，备用。
2.3 样品溶液的制备
精密称取干燥药材粉末各2 g，以氨水浸润加三氯甲烷70 mL在室温下超声提取30 min，滤过，精密量取续滤液50 mL，蒸干，用甲醇溶解并完全转移至10 mL的量瓶中，甲醇定容，即得。
2.4 线性关系考察
分别精密吸取“2.2”项下对照品贮备液1、2、3、4、5 mL置10 mL量瓶中，用甲醇定容，摇匀，配成浓度分别为0.043 2，0.086 4，0.129 6，0.172 8，0.216 0 mg/mL的对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件进行测定，以文多灵质量浓度为横坐标，测得峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为