HPLC法测定妇平胶囊中吉马酮的含量
作者：陈阿丽 崔永霞 周立艳 梁生旺
【摘要】 目的 建立妇平胶囊中吉马酮的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法：色谱柱为Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为乙腈水(体积比50.5∶49.5)，流速为1.0 mL/min，检测波长为214 nm。结果 吉马酮的进样量在2.768～27.68 μg范围内与峰面积呈良好线性关系，r=0.999 8;平均回收率为99.66%，RSD为2.89%。 结论 所建立的方法准确、快速，可用于妇平胶囊的质量控制。
【关键词】 妇平胶囊;吉马酮;HPLC
妇平胶囊由金荞麦、紫花地丁、莪术、败酱草等药物组成，具有清热解毒、燥湿止带、杀虫止痒的功效，用于治疗湿热下注、带脉失约、赤白带下、阴痒阴肿，以及滴虫、霉菌、细菌引起的阴道炎、外阴炎等妇科疾病。本处方来源于国家标准[WS—10003(ZD—0003)—2002]，该标准中的含量测定指标为紫花地丁与一枝黄花中的槲皮素，制剂中其他成分的含量测定目前还没有文献报道。为了更好地控制产品的内在质量，提高标准，本文采用HPLC法测定妇平胶囊中吉马酮[1-2]的含量，获得了满意的结果。
1 仪器与试药
LC2010A高效液相色谱仪(日本岛津公司),SPDM10Avp二极管阵列检测器，四元梯度泵，自动进样器，BSZZ4S型电子分析天平。
吉马酮对照品(中国药品生物制品检定所，批号：100185200408)，妇平胶囊(自制，批号061101、061102、061103)，乙腈为色谱纯，水为自制蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥的吉马酮对照品3.5 mg，置25 mL量瓶中，加乙醇使溶解并稀释定容至刻度，混匀，制得每1 mL含1.40 μg的溶液，即得。
2.1.2 供试品溶液的制备[3] 取本品20粒内容物，研细，混匀，精密称定0.6 g，置圆底烧瓶中，加乙醚50 mL浸泡2 h，加热回流提取2次，每次1 h，滤过，合并滤液挥干，残渣用甲醇溶解并定容至10 mL。用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，取续滤液，即得。
2.1.3 阴性对照溶液的制备 按处方比例依法配制除莪术以外的阴性制剂，精密称取适量，按“2.1.2”项下方法制备阴性对照溶液。
2.2 色谱条件与系统适用性试验[4]
Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈水(体积比50.5∶49.5);检测波长为214 nm;流速为1.0 mL/min;进样量为10 μL。分别取对照品、供试品和阴性对照溶液各10 μL，分别进样测定，色谱谱见图1。理论塔板数按吉马酮峰计算应不低于2 500。在此色谱条件下，吉马酮色谱峰达到基线分离，拖尾因子为1.05，峰形基本对称。
2.3 线性关系的考察
精密量取“2.1.1”项下对照品溶液2、4、8、16、20 μL，分别进样测定，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标进行线性回归，得回归方程：Y=2841059.3X-59233，r=0.999 8。表明吉马酮进样量在2.768～27.68 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.4 精密度试验
按“2.1.1”项下方法配制对照品溶液(质量浓度为1.41 μg/mL)，进样10 μL，重复进样5次，测定。结果吉马酮峰面积积分值RSD值为0.24%(n=5)，表明精密度良好。
2.5 重复性试验
取同一批号(061101)的妇平胶囊样品，称取5份，每份约0.6 g，精密称定，按“2.1.2”项下方法制备溶液，测定峰面积积分值，计算平均含量为0.112 mg/粒，RSD值为1.25%(n=5)，表明重现性良好，符合定量标准要求。
2.6 稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液适量，在室温下放置，于0、0.5、1、2、3、4、5、6 h分别进样，并测定峰面积。结果RSD为1.64%(n=5)，表明样品溶液在6 h内稳定性良好。
2.7 加样回收率试验[5]
取本品20粒，倾出内容物，研细，取0.6 g，精密称定，精密加入吉马酮对照品适量，置圆底烧瓶中，按“2.1.2”项下方法制备溶液，依法测定，平均回收率为99.66%，RSD=2.89%(n=5)。表明本方法的回收率较好，结果见表1。表1 吉马酮加样回收率试验结果
2.8 样品含量测定
取不同批号妇平胶囊3批(批号061101、061102、061103)，按“2.1.2”项下方法制备溶液，进样测定，记录峰面积，计算样品中吉马酮的平均含量，平均含量分别为0.108 mg/粒、0.108 mg/粒、0.107 mg/粒(n=5)。
3 讨论
3.1 由于吉马酮的极性较小，故选择乙醚作为提取溶剂。通过对比发现，用乙醚50 mL浸泡2 h，加热回流提取2次，每次1 h的方法的提取效率最高[6]。
3.2 国家药品标准中妇平胶囊是以紫花地丁与一枝黄花中的槲皮素为测定指标。莪术为本处方中的主要药物之一，因此本文选用莪术中的主要成分吉马酮为含量测定指标。
【参考文献】
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