舒肝健脾补肾方对慢性应激肝郁模型妊娠大鼠、胎鼠宫内发育的干预作用
3 结果
3.1 舒肝健脾补肾方对慢性应激肝郁模型孕鼠自主活动的影响结果见表1。表1 各组孕鼠敞箱试验中穿越格数及直立次数的影响结果显示造模前各组孕鼠穿越格数经F检验得，F=0.668，P=0.617>0.05，提示造模前各组差别均无意义，具有可比性。造模后舒肝健脾补肾高、低组及阳性药组孕鼠穿越格数显著低于模型组(P<0.01)。正常组孕鼠穿越格数显著低于模型组(P<0.05)。造模前各组孕鼠直立次数经F检验得，F=0.884，P=0.481>0.05，提示造模前各组差别均无意义，具有可比性。造模后正常组、舒肝健脾补肾低组孕鼠直立次数低于模型组(P<0.05);舒肝健脾补肾高组及阳性药组孕鼠直立次数低于模型组(P<0.01)。
3.2 舒肝健脾补肾方对慢性应激肝郁模型孕鼠血清IGF-1、IGF-2水平的影响结果见表2～3。
3.3 舒肝健脾补肾方对慢性应激肝郁模型胎鼠体重、胎盘重量的影响结果见表4。结果显示模型组孕鼠血清IGF-1、IGF-2较正常组明显降低(P﹤0.01)。舒肝健脾补肾高组及阳性药组血清IGF-1、IGF-2明显高于模型组(P﹤0.05)。舒肝健脾补肾低组与模型组相比无明显差异(P﹥0.05)。表2 舒肝健脾补肾方对孕鼠血清IGF-1的影响表3 舒肝健脾补肾方对孕鼠血清IGF-2的影响表4 各组胎鼠的体重、胎盘重量比较结果显示模型组胎鼠体重、胎盘重量显著低于正常组(P<0.01);舒肝健脾补肾高组及阳性药组胎鼠体重、胎盘重量重量显著高于模型组(P<0.01);舒肝健脾补肾低组胎鼠体重、胎盘重量与模型组相比无明显差异(P>0.05)。
3.4 舒肝健脾补肾方对慢性应激肝郁模型孕鼠血清P水平的影响结果见表5。表5 舒肝健脾补肾方对孕鼠血清P水平的影响结果显示模型组孕鼠血清P水平显著低于正常组(P<0.05);舒肝健脾补肾高组孕鼠血清P水平显著高于模型组(P<0.01);阳性药组孕鼠血清P水平高于模型组(P<0.05)，舒肝健脾补肾高组优于阳性药组，舒肝健脾补肾低组血清P水平显著高于模型组(P<0.05)。
3.5 舒肝健脾补肾方对慢性应激肝郁模型孕鼠子宫蜕膜的PR水平的影响结果见表6。表6 舒肝健脾补肾方对孕鼠子宫蜕膜的PR水平的影响结果显示模型组孕鼠子宫蜕膜的PR水平显著低于正常组(P<0.01);舒肝健脾补肾高组孕鼠子宫蜕膜的PR水平显著高于模型组(P<0.01);阳性药组孕鼠子宫蜕膜的PR水平显著高于模型组(P<0.05)。
4 讨论
妊娠期间阴血不足，气易偏盛的特点，正常妊娠就易导致阴亏、气滞、痰饮的产生，而肝郁更易加重气滞，导致疾病的产生。正常的妊娠需要气血的滋养及脾肾的固摄，肝郁可致气滞血淤，气血运行受阻;肝郁可横逆犯脾，影响脾的生化功能使气血生化不足，影响脾的运化功能，使水湿、痰饮病理产物产生，气血运行受阻，此外还可影响到脾的升清固摄功能，使气血不能正常的运行;肝郁可导致肾的封藏功能失常，冲任不固;肝郁日久，耗血伤精，肝肾精血不足，冲任不充，若肝郁化火，热伤冲任，暗耗阴血。因此肝郁可引起脾肾功能异常，导致肝脾肾同病，胎失所养，引起胎萎不长、胎动不安、胎漏。治疗肝郁导致宫内发育迟缓时，运用疏肝药时要注意妊娠“阴血不足，阳气偏亢”的特点，疏肝理气药用量不易过重，不宜用过多香燥理气之品，以免暗耗阴血，遵循“养其血，舒其郁，顺其性，柔其体，以柔为法”的法则，要疏肝柔肝和胃、理气安胎 。但不能单用疏肝药，同时要考虑到妊娠病的特点、与脾肾的关系以及肝郁影响脾肾功能的特点，疏肝的同时要健脾补肾安胎、养胎，健脾补肾安胎药用量易大，药味易多，达到理气不伤正，滋阴不滋腻，使冲任充足固护，胎孕正常。这正是舒肝健脾补肾方组方原则。
胎鼠、胎盘的重量反映了胎鼠在宫内发育的情况，实验表明慢性应激肝郁状态下胎鼠、胎盘的重量下降，从而造成IUGR。舒肝健脾补肾方能使慢性应激肝郁模型胎鼠、胎盘的重量增加，这反映了该方能改善胎鼠在宫内发育的环境，促进胎鼠全身各器官的发育，从而使胎鼠、胎盘的重量增加。IGF-1、 IGF-2是胎儿生长的重要调节因子，是维持胎儿生长是必需的因子。IGF-1主要是促进胎儿器官成熟，IGF-2主要调节胎儿、胎盘的生长发育。孕妇血清中的IGF-1、 IGF-2不经过胎盘屏障，但可通过调节营养物质经胎盘供给胎儿，增加胎儿的分泌及生物利用度，从而促进胎儿的正常发育[9]。研究已证实，无论胎儿 IUGR是由宫内营养不良或缺氧或胎盘功能异常所致，均首先通过降低IGF-1、 IGF-2，从而使各型细胞分裂、分化、增殖、成熟或存活的能力以及组织器官对葡萄糖摄取和氧化及对氨基酸摄取的能力降低 ,细胞分裂周期延长、数量减少、功能障碍 ,最终导致其生长发育迟缓[10]。实验结果表明舒肝健脾补肾方能提高慢性应激肝郁模型孕鼠血清IGF-1、IGF-2水平，从而促进胎鼠的正常发育。P对受精卵的种植和妊娠的维持有非常重要的作用，实验证明舒肝健脾补肾方能提高慢性应激肝郁模型孕鼠血清P的含量。而P作用的强弱取决于激素水平和靶细胞激素受体的含量、特异性及亲和力[11]。PR水平的降低使P缺少有效的靶点难以发挥激素样作用导致胎儿不能正常发育。实验表明舒肝健脾补肾方通过显著增加孕鼠子宫蜕膜的PR的含量，并增强其对孕激素的敏感性，使得孕激素与孕激素受体相结合，充分发挥孕激素的生物效应，从而实现对性腺轴的激素-激素受体的调节。动物的情绪改变可以通过观察大鼠的行为来间接感知，敞箱试验是最常用于测定大鼠情绪、心理状态的行为学实验方法，能以量化的指标客观反映大鼠的焦虑程度以及对外界、未知的探究欲望，从而提示受试大鼠的情绪、心理状态。本实验证实：慢性应激刺激孕鼠处于心理应激状态，并表现出情绪烦躁不安和焦虑状态。舒肝健脾补肾方能调节孕鼠的情绪，减轻不安和焦虑。同时也证实心理应激反应以及对机体产生的影响与肝的疏泄功能存在关联。结合本实验结果，可以初步推断舒肝健脾补肾方通过影响中枢神经系统的生理活动，减轻心理应激对孕鼠情绪的影响。
综上所述，本实验从多方面证明了舒肝健脾补肾方能改善宫内环境，能显著增加血清中的 IGF - I 、IGF-2水平。能显著提高血清P的含量，子宫蜕膜的PR水平，增强P的生物效应。还能增加胎鼠、胎盘的重量。可见，舒肝健脾补肾方对于胎儿宫内发育有调节作用，这对临床运用舒肝健脾补肾法治疗肝郁型胎儿宫内发育迟缓提供了客观依据。
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