杜仲不同加工方法对其质量的影响

                 作者：刘圣金,吴德康,狄留庆,宋燕  

【摘要】  目的 研究杜仲的不同加工方法对其质量的影响。方法 通过杜仲粗皮占杜仲干燥树皮的质量分数及去粗皮前后浸出率的比较,粗皮与杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量、农药残留量及重金属含量的比较,新鲜树皮发汗前后松脂醇二葡萄糖苷含量的比较等进行研究。结果 粗皮占杜仲干燥树皮质量分数为12.7%(n＝3)；去粗皮前后的醇溶性浸出率没有显著性差异,水溶性浸出率比未去粗皮高11.26%(P<0.05,n＝5)；粗皮残留有害物质较高而含松脂醇二葡萄糖苷较少(0.050 4%,n＝3)；发汗前后松脂醇二葡萄糖苷含量：未发汗生品>未沸水浸发汗样品>沸水浸发汗样品,三者之间均有显著性差异(P<0.05,n＝5)。结论 杜仲在原产地加工中“去粗皮”是必要的。值得注意的是：“发汗”后松脂醇二葡萄糖苷的含量却下降。

【关键词】  杜仲；产地加工；去粗皮；发汗；松脂醇二葡萄糖苷；高效液相色谱法

    Abstract：Objective To study on the quality of Eucommia ulmodies processing in planting by different methods. Methods The quantity percent of coarsed cortex, water and ethanol extract were compred, the contents of Pinoresinol diglucoside (PDG) were determined by HPLC, the residues of pesticides and the content of heavy metal element were carried out to investigate the quality. Results The quantity percent of coarsed cortex was 12.7% (n＝3). Ethanol extract had no remarkable difference whether scrape the coarsed cortex or not. Water extract was higher 11.26% (P<0.05, n＝5) than no scraped. The content of heavy metal element of coarsed cortex was high, but PDG was low (0.050 4%, n＝3). The content of PDG of Eucommia Cortex which Fahan had no soaked in boiling water higher than soaked, but lower than no Fahan. There were remarkable differences among them (P<0.05, n＝3). Conclusion Scrape the coarsed cortex is necessary of Eucommia ulmodies processing in planting. It deserve to take notice that the content of PDG declined after Fahan.
 
　　Key words： Eucommia ulmoides Oliv.；processing in planting；scrape the coarsed cortex；Fahan；Pinoresinol diglucoside；HPLC

    杜仲是杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥树皮,具有补肝肾、强筋骨、安胎、降血压之功效,产于湖北、四川、贵州、云南等省。杜仲传统的产地加工中,“去粗皮”及“发汗”处理是必不可少的一个环节,本实验对不同的产地加工方法对其质量的影响进行了较为系统、全面的研究。

　　1  杜仲药材加工质量评价体系的建立

    在未知杜仲明确的有效成分前,选择水溶性、醇溶性浸出物来评价其质量。随着研究的不断深入,已明确杜仲中松脂醇二葡萄糖苷(Pinoresinol diglucoside,PDG)有明确的降压作用,绿原酸(Chlorogenic acid,CA)、桃叶珊瑚苷(Aucubin, AUC)等也有一定的降压作用[1]。通过《中华人民共和国药典》[2]2005版(一部)及杜仲相关文献的比较分析,笔者选择PDG的含量及醇溶性、水溶性浸出物作为评价指标,对其进行研究。

　　1.1  松脂醇二葡萄糖苷含量测定方法的研究

　　1.1.1  实验材料

　　1.1.1.1  药材 

　　杜仲药材由上海华宇药业有限公司提供(产地：四川都江堰,批号G2003100803),经南京中医药大学中药鉴定学教研室吴德康教授鉴定为杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥树皮。置鼓风干燥箱中60 ℃干燥1 h,粉碎,密封,备用。

　　1.1.1.2  仪器与试剂 

　　Agilent 1100高效液相色谱仪(美国)；BP211D电子天平(德国Sartoius公司)；PDG对照品购于中国药品生物制品检定所。提取用氯仿、甲醇均为分析纯；水为重蒸水(实验室自制),甲醇为色谱纯。

　　1.1.2  标准曲线的制备 

　　精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒重的PDG对照品3.95 mg,置10 mL量瓶中,用甲醇溶解,放至室温,加甲醇至刻度,摇匀,分别精密量取0.25、0.5、2.0、4.0、5.0 mL于5 mL量瓶中,甲醇加至刻度,摇匀,各进样4 μL。以浓度(C)对峰面积(A)作线性回归,得线性方程为：A＝4.974 8C－26.345 0,r＝0.999 8。表明PDG在19.75～395.0 μg/mL时,浓度与峰面积呈良好的线性关系。以制备标线的4号样品为对照品溶液,连续进样5次,RSD＝0.65%,表明仪器精密度良好。

　　1.1.3  供试品溶液的制备 

　　取杜仲粉末约3 g,精密称定,置索氏提取器中,加入氯仿适量,加热回流6 h,弃去氯仿液,药渣挥去氯仿,再置索氏提取器中,加甲醇适量,加热回流6 h,提取液回收甲醇至适量,转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,即得。

　　1.1.4  对照品溶液的制备 

　　精密称取PDG对照品适量,加甲醇制成每1 mL含0.25 mg的溶液,摇匀,即得。

　　1.1.5  色谱分析条件 

　　色谱柱：Lichrospher C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水(25∶75)；流速：1.0 mL/min。柱温：室温；进样量：4 μL；检测波长：226 nm(色谱图见图1、图2)。

　　1.2  浸出物检查方法

    参照《中华人民共和国药典》2005年(一部)“浸出物测定法”(附录XA)项下“醇溶性浸出物测定法(热浸法)”及“水溶性浸出物测定法(热浸法)”测定。

　　2  去粗皮对杜仲质量的影响

　　2.1  杜仲粗皮占杜仲干燥树皮的质量分数

    随机取干燥的杜仲树皮,刷去杂物,称重,用刮刀刮去其粗皮,以不起刨花为度。对去粗皮的杜仲称重,计算粗皮的质量分数。结果粗皮占杜仲干燥树皮质量分数的12.7%(n＝3)。