双根清脑颗粒质量标准研究
作者：于燕燕,狄留庆,黄耀洲,祖强,陈文霞
【摘要】 目的 对双根清脑颗粒的质量标准进行研究。方法 采用薄层色谱法鉴别薏苡仁、板蓝根、郁金；采用高效液相色谱法测定葛根素的含量。结果 薄层色谱分离效果较好,斑点清晰,阴性无干扰。葛根素的线性范围为5.184～40.50 μg/mL,平均加样回收率为99.93%,RSD=1.81%。结论 本方法可行,重复性好,能有效控制双根清脑颗粒的质量。
【关键词】 双根清脑颗粒；葛根素；质量标准；薄层色谱法；高效液相色谱法
Abstract：Objective To establish the quality control standard for Shuanggen Qingnao Granules. Methods TLC was used to identify Yiyiren SEMENCOICIS, Yujin RADIXCURCUMAE, Banlangen RADIX ISATIDIS；and HPLC was used to determine the content of Puerarin in Shuanggen Qingnao Granules. Results The TLC spots developed were fairly clear, and the bland test showed no interference. Puerarin showed a good linear relationship in the range of 5.184～40.50 μg/mL, the average recovery of Puerarin was 99.93%, and RSD was 1.81%. Conclusion The method is accurate and quick, and can be used for the quality control of Shuanggen Qingnao Granules. Key words：Shuanggen Qingnao ranules；quality standard；TLC；HPLC 双根清脑颗粒由葛根、板蓝根、郁金、薏苡仁等组成,具有补肾益髓养脑、益气活血、化瘀通络之功效。为控制该产品质量,本实验采用薄层色谱法对方中板蓝根、薏苡仁、郁金进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对葛根素进行定量分析。
1 仪器与材料
硅胶G(薄层层析用,青岛海洋化工厂)；Agilent1100高效液相色谱系统。 葛根素(中国药品生物制品检定所提供,批号110752- 200209)；双根清脑颗粒(本实验室制备)。甲醇(色谱纯)；其他化学试剂均为分析纯。
2 定性鉴别
2.1 板蓝根的薄层色谱鉴别
取板蓝根对照药材、市售药材、样品、阴性对照粉末各1 g,加稀乙醇40 mL,超声处理20 min,滤过,滤液蒸干,残渣加稀乙醇2 mL使溶解,作为供试品溶液。照薄层色谱法[2005年《中国药典》(一部)附录ⅥB]试验,吸取上述对照药材10 μL、市售药材10 μL、样品15 μL、阴性溶液15 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上(自然干燥)。以正丁醇-冰醋酸-水(19∶5∶7)为展开剂,展开,取出,热风吹干,喷以茚三酮试液,105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,样品在与对照药材相应的位置上显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。
取板蓝根对照药材粉末2 g、样品4 g、阴性对照2 g,加氯仿40 mL,超声40 min,滤过,滤液蒸干,残渣加氯仿1 mL使溶解,作为供试品溶液。按薄层色谱法[2005年《中国药典》(一部)附录ⅥB]试验,吸取上述3种溶液,分别以对照药材、样品、阴性对照各10、15、20 μL点样,点于同一硅胶G薄层板上。以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶1)为展开剂,展开,展距为8 cm,取出,晾干。供试品色谱中,在与对照药材相应的位置上显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。
2.2 薏苡仁的薄层色谱鉴别
取薏苡仁对照药材、药材、样品粉末、阴性对照粉末各1 g,以10倍量70%的乙醇超声40 min,滤过,滤液置80 ℃水浴蒸干,取样量为1 g,加石油醚(60～90 ℃)10 mL,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加石油醚(60～90 ℃)1 mL使溶解,作为供试品溶液。按薄层色谱法[2005年《中国药典》(一部)附录ⅥB]试验,吸取上述对照药材10 μL、药材10 μL、样品15 μL、阴性对照15 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(60～90 ℃)-乙醚-乙酸(15∶1∶0.01)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,于105 ℃烘约5 min。供试品色谱中,在与对照药材、药材相应的位置上显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。
按薄层色谱法[2005年《中国药典》(一部)附录ⅥB]试验,吸取上述对照药材10 μL、药材10 μL、样品15 μL、阴性对照15 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上。以石油醚-乙醚-乙醇(15∶1∶0.05)为展开剂,展开,展距约为8 cm,取出,晾干,喷以10%的硫酸-乙醇液,于110 ℃烘15 min显色,于365 nm紫外光灯下检视。供试品色谱中,在与对照药材、药材相应的位置上显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。
2.3 郁金的薄层色谱鉴别
取对照药材、药材、样品粉末、阴性对照粗粉各2 g,以10倍量70%的乙醇超声40 min,滤过,滤液置80 ℃水浴蒸干,取样量为2 g,上述4种样品粉末分别加乙醇20 mL,超声提取30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇2 mL使溶解,作为供试品溶液。按薄层色谱法[2005年《中国药典》(一部)附录ⅥB]试验,吸取上述对照药材10 μL、药材10 μL、样品15 μL、阴性对照15 μL 4种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上。以石油醚(60～90 ℃)-乙酸乙酯(8∶1.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%的硫酸-乙醇液,于110 ℃烘15 min显色。供试品色谱中,制剂在与对照药材、药材相应的位置上显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。
按薄层色谱法[2005年《中国药典》(一部)附录ⅥB]试验, 吸取上述对照药材10 μL、药材10 μL、样品15 μL、阴性对照15 μL 4种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上。以己烷-乙酸乙酯(85∶15)为展开剂,展开,取出,以10%磷钼酸乙醇液喷雾后,于105 ℃烘约10 min。供试品色谱中,在与对照药材、药材相应的位置上显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。