黄连生物碱降糖活性协同作用研究

　　从表1中可以看到，与对照相比，在很低的浓度下（0.2 mg·L-1）黄连生物碱就具有促进HepG2消耗葡萄糖的能力；小檗碱促进葡萄糖消耗的能力明显高于药根碱、巴马汀和黄连碱等生物碱，尤其是在高浓度下，这种趋势更加明显；4种黄连生物碱单体促进HepG2消耗葡萄糖的能力依次为：小檗碱〉黄连碱〉药根碱〉巴马汀。
   
　　从表1中还可以看到，与单体相比，在同等浓度下，复合物生物碱促进HepG2消耗葡萄糖的能力明显优于黄连生物碱单体，而与小檗碱相当；尤其是在低浓度下，复合物生物碱促进HepG2消耗葡萄糖的能力优于小檗碱等黄连生物碱单体。显示出一定的协同效应［6］。
   
　　再将试验分为对照组，胰岛素组以及胰岛素处理后的各个药物组，用胰岛素处理细胞16h后，黄连生物碱及其复合物对HepG2细胞消耗葡萄糖的测定结果见表2。表2  黄连生物碱促进胰岛素处理后HepG2对葡萄糖的消耗量（略）

　　从表2中可以看到，在用胰岛素处理HepG2细胞后，黄连生物碱促进HepG2细胞消耗葡萄糖的能力更强。测定结果与未用胰岛素处理的结果类似：小檗碱促进葡萄糖消耗的能力由于其他黄连生物碱，而复合物促进葡萄糖消耗的能力优于黄连生物碱单体。显示出明显的协同作用。

　　3.2  黄连生物碱及其复合物对HepG2细胞毒性实验结果黄连生物碱及其复合物的细胞毒性见表3。从表3可以看到药物组与对照组的活细胞数一致，显示并非是通过增加细胞数来提高葡萄糖消耗；并且随着小檗碱的浓度增加，HepG2细胞的存活率下降，表现出一定的细胞毒性；而其他黄连生物碱和黄连生物碱的复合物表现出的细胞毒性就小得多，在试验浓度范围内几乎看不到细胞毒性。表3  细胞毒性（略）

　　3.3  糖尿病小鼠的降糖实验结果黄连生物碱及其复合物对糖尿病小鼠的降糖实验结果见表4。表4  黄连生物碱对糖尿病小鼠的降糖结果（略）

　　从表4可以看到，二甲双胍、小檗碱、黄连碱、药根碱、巴马汀组和复合黄连生物碱组均具有降糖作用，复合生物碱的降糖作用最强，与阳性药物二甲双胍类似；4个黄连生物碱单体比较，小檗碱的降糖作用最强而与符合生物碱类似，黄连碱和药根碱的降糖作用弱于小檗碱，而比巴马汀的降糖作用强。有关结果与细胞实验的结果类似，也与文献报道类似［9］。

　　4  讨论与结论
   
　　黄连生物碱及其复合物对HepG2细胞消耗葡萄糖的测定结果表明，小檗碱促进HepG2细胞消耗葡萄糖的能力最强，黄连碱次之，药根碱再次之，巴马汀的作用最弱；动物实验的结果也证明巴马汀的降糖作用最弱，有关研究与文献报道类似［9］。但是，将黄连生物碱复配形成复合物后，复合物促进HepG2消耗葡萄糖的能力明显增加，显示出一定的增效作用。对细胞生长的测定结果表明，小檗碱的细胞毒性较大，浓度超过5 mg·L-1后，即表现出明显的抑制细胞生长的作用，而复合物对细胞生长几乎没有影响。可见，黄连复合生物碱的安全性比小檗碱高，而降糖活性与小檗碱类似甚至更好。显示出黄连复合生物碱在开发降糖产品方面具有比小檗碱更好的前景。

【参考文献】
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　　［3］Zhou L, Yang Y, Wang X , et al. Berberine stimulates glucose transport through a mechanism distinct from insulin［J］. Metabolism, 2007, 56: 405.
　
　　［4］Lee YS , Kim WS , Kim KH , et al. Berberine, a natural plant product, activates AMP - activated protein kinase with beneficial metabolic effects in diabetic and insulin - resistant states［J］. Diabetes, 2006, 55:2256.

　　［5］谷 卫,曾文衡,胡海英.小檗碱对3T3- L1脂肪细胞脂联素表达的影响［J］. 中国中药杂志, 2005,30:286.

　　［6］申竹芳,谢明智. 高效薄层荧光光密度法测定生物样品中的小檗碱含量［J］. 药学学报, 1993, 28(7): 532.

　　［7］郭丽民，张汝学，贾正平，等.地黄寡糖对HepG2细胞增殖及胰岛素抵抗的作用［J］. 中国中药杂志，2007，32(13)1328.

　　［8］Matsui T, Ueda T, Oki T. a-Glucosidase inhibitory action of natural acylated anthocyanins 1. survey of natural pigments with potent inhibitory activity［J］. J Agric Food Chem,2001, 49(4): 1948.

　　［9］郑红艳.原小檗碱类生物碱作用差异的机理研究［D］. 天津大学硕士学位论文，2004.