高效液相色谱法测定解毒利尿颗粒中甘草酸含量

　　图1 HPLC图谱

　　2.7 精密度实验精密注入对照品溶液10 μl，依法连续进样6次，测得甘草酸峰面积的RSD=1.82%，实验结果表明仪器精密度良好。

　　2.8 稳定性实验取同一供试品溶液(批号：20060811)，按0，2，4，6，8，12 h时间间隔进样，分别测定峰面积，测定甘草酸的含量结果RSD为2.92%，表明供试品溶液在12 h内稳定，样品含量无明显变化，在此时间内测定供试品化学性质稳定。

　　2.9 重复性实验取6份样品(批号：20060811)，同前法测定样品中甘草酸的含量，RSD为2.45 %，表明重现性良好。

　　2.10 加样回收实验取已知准确含量的样品(批号：20060811，含量为125 mg/袋)6份，每份0.25 g，精密称定，置100 ml量瓶中。精密加入甘草酸铵对照品(2.483mg)，按样品测定方法进行测定，结果平均回收率为98.99%，RSD为1.74%，加样回收率均符合要求。结果见表1表1 加样回收率实验结果

　　2.11 样品含量测定 按上述方法，测定3批解毒利尿颗粒中甘草酸的含量。结果见表2表2 样品每袋含量测定结果

　　3 讨论

　　3.1 提取方法的确定 文献报道，甘草酸的提取方法有溶剂提取法[6]、微波法[7]及超临界CO2流体萃取法[8]等。溶剂提取法提取时间长，杂质溶出率较高，工作量大;微波法虽提取时间短，提取率高，但是杂质溶出率高;超临界CO2流体萃取法快速、高效、选择性专一且无污染，但存在操作压强大，夹带剂浓度高，萃取时间较长，仪器设备昂贵等不足。超声提取法具有方便、快捷、提取效率高等优点，因此本试验采用此法对甘草酸进行提取。

　　3.2 提取时间的确定取本品超声处理不同时间(20，40，60，80，100min)，分别测定其峰面积，结果发现超声提取40 min后，随提取时间延长峰面积不再增加。因此本试验中提取时间定为40 min。

　　3.3 测定波长的选择解毒利尿颗粒样品及甘草酸铵对照品的光谱图表明，甘草酸铵在250 nm波长处有最大吸收，故将250 nm作为样品含量测定的检测波长。

　　3.4 流动相的选择根据文献报道[9，10]，实验中曾采用乙腈-水-冰醋酸为流动相，改变不同比例，均未能达到较适宜的保留时间和分离效果;选择甲醇-醋酸铵-冰醋酸为流动相，调整比例后可以使保留时间适宜，使分离度和理论板数均符合要求。

【参考文献】
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　　[2] 欧国灯，宁瑞仪，马鸿雁.HPLC测定明通致伤风颗粒甘草酸含量[J].中药材，2008，31(2)：302.

　　[3] 石力夫，全山丛.薄层扫描法测定甘草制剂中甘草酸含量的研究[J].中草药，1993，24(6)：296.

　　[4] 施军霞，罗 明，卫立辛，等.高效毛细管电泳法测定甘草酸注射液中甘草酸含量[J].中国现代应用药学杂志，2001，18(6)：457.

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　　[6] 潘学军，刘会洲，贾光和，等.从甘草中提取甘草酸不同提取方法的比较[J].过程工程学报，2001，1(1)：102.

　　[7] 阚微娜，谭天伟.微波法提取甘草中有效成分的研究[J].中草药，2006，37(1)：61.

　　[8] 王 颖，孙 晶，张东杰.超临界CO2萃取甘草酸的工艺研究[J].食品与机械，2006，22(3)：34.

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　　[10] 靳凤云，贺祝英，赵 杨，等.HPLC测定华盖散传统汤剂与颗粒汤剂中盐酸麻黄碱、苦杏仁苷、甘草酸、甘草苷的含量[J].中成药，2008，30(1)：80.