凤尾蕨属6种药用植物抗肿瘤有效部位筛选

　　3.1.3 井栏边草各提取部位对体外培养的A549肿瘤细胞生长增殖的影响井栏边草各提取部位的体外抗肿瘤活性显示(表3)，石油醚提取物、醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物在各个质量浓度范围对肿瘤细胞均有抑制作用;醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物在浓度为240 μg·ml-1时，对A549肿瘤细胞有明显的抑制作用，抑制率分别为65.06%和82.13%。

　　表2 刺齿半边旗各提取部位对体外培养的A549肿瘤细胞生长增殖的影响

　　表3 井栏边草各提取部位对体外培养的A549肿瘤细胞生长增殖的影响

　　3.1.4 剑叶凤尾蕨各提取部位对体外培养的A549肿瘤细胞生长增殖的影响剑叶凤尾蕨各提取部位的体外抗肿瘤活性显示(表4)，240 μg·ml-1的醋酸乙酯提取物对A549肿瘤细胞有较强的抑制作用，而此浓度的正丁醇提取物对A549肿瘤细胞的抑制率为15.25%，该浓度的石油醚提取物对A549肿瘤细胞的抑制作用仅为8.74%。

　　表4 剑叶凤尾蕨各提取部位对体外培养的A549肿瘤细胞生长增殖的影响

　　3.1.5 蜈蚣草各提取部位对体外培养的A549肿瘤细胞生长增殖的影响蜈蚣草各提取部位的体外抗肿瘤活性显示(表5)，各提取部位对A549肿瘤细胞的抑制作用都较弱，石油醚提取物、醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物在240 μg·ml-1时，对A549肿瘤细胞的抑制率分别为24.60%，22.76%，14.29%。

　　表5 蜈蚣草各提取部位对体外培养的A549肿瘤细胞生长增殖的影响

　　3.1.6 线羽凤尾蕨各提取部位对体外培养的A549肿瘤细胞生长增殖的影响 线羽凤尾蕨各提取部位的体外抗肿瘤活性显示(表6)，其正丁醇萃取物对A549肿瘤细胞有较强的抑制作用，且呈一定的剂量依赖性;醋酸乙酯提取物对A549肿瘤细胞的抑制作用较弱，而石油醚提取物对A549肿瘤细胞的增殖在低浓度时有一定的促进作用，在240 μg·ml-1时的抑制率仅为2.49%。

　　表6 线羽凤尾蕨各提取部位对体外培养的A549肿瘤细胞生长增殖的影响

　　3.2 凤尾蕨属6种植物同一提取部位对A549细胞增殖影响的比较见图1～3。

　　图1 凤尾蕨属6种植物石油醚萃取部位对A549细胞增殖的影响

　　从图1可以看出，当药物浓度为240μg·ml-1时刺齿半边旗石油醚萃取物对A549细胞的增殖抑制作用最强，超过55%，依次为蜈蚣草石油醚萃取物(抑制率近25%)，半边旗石油醚萃取物(抑制率15%左右)，其余3种植物的该部位萃取物A549细胞的抑制作用更低，几乎都在10%以下。

　　从图2可以看出，当药物浓度为240μg·ml-1时，半边旗醋酸乙酯萃取物对A549细胞的增殖抑制作用最强，其次为刺齿半边旗醋酸乙酯萃取物，井栏边草醋酸乙酯萃取物，剑叶凤尾蕨醋酸乙酯萃取物，蜈蚣草醋酸乙酯萃取物，线羽凤尾蕨醋酸乙酯萃取物，最后两种的醋酸乙酯萃取部位对A549细胞的抑制作用较低，在20%左右，其余几种的该部位对A549细胞的抑制率均高于50%。

　　图2 凤尾蕨属6种植物醋酸乙酯萃取部位对A549细胞增殖的影响

　　图3 凤尾蕨属6种植物正丁醇萃取部位对A549细胞增殖的影响

　　从图3可以看出，当药物浓度为240μg·ml-1时刺齿半边旗正丁醇萃取物对A549细胞的增殖抑制作用最强，其次为井栏边草正丁醇萃取物，线羽凤尾蕨正丁醇萃取物和半边旗正丁醇萃取物，它们对A549细胞的抑制率均高于60%，而剑叶凤尾蕨正丁醇萃取物和蜈蚣草正丁醇萃取物在该浓度时对A549细胞的抑制率均在15%左右。

　　4 讨论

　　半边旗具有较强的抗肿瘤作用，本实验在研究半边旗抗肿瘤作用的基础上，以人肺癌细胞A549为筛选模型，以抗肿瘤活性为指标，较系统地对凤尾蕨属6种药用植物不同提取部位进行了抗肿瘤活性的初步筛选。结果表明，半边旗中抗肿瘤作用的物质存在于醋酸乙酯部位、正丁醇部位，这与我们前面的筛选研究结果一致[5];刺齿半边旗的抗肿瘤作用部位存在于石油醚部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位;井栏边草中抗肿瘤作用的物质存在于醋酸乙酯部位、正丁醇部位;剑叶凤尾蕨中抗肿瘤作用的物质存在于醋酸乙酯部位;线羽凤尾蕨中抗肿瘤作用的物质存在于正丁醇部位;其他部位对A549细胞增殖抑制作用不明显。值得注意的是，刺齿半边旗石油醚萃取物在浓度为240μg·ml-1时其抑制率接近60%，而半边旗石油醚萃取物在相应浓度时其抑制率仅为15.12%;刺齿半边旗醋酸乙酯萃取物在浓度为60μg·ml-1时其抑制率已超过50%，在浓度为120μg·ml-1时其抑制率已接近70%，而半边旗醋酸乙酯萃取物在相应浓度时其抑制率仅分别为19.92%和35.67%;刺齿半边旗正丁醇萃取物在浓度为60μg·ml-1时其抑制率已超过70%，井栏边草正丁醇萃取物在浓度为120μg·ml-1时其抑制率已超过75%，而半边旗正丁醇萃取物在相应浓度时其抑制率仅分别为5.13%和27.83%。

　　本课题组虽然对半边旗中的抗肿瘤二萜类活性成分5F进行了深入的研究，但对其所含抗肿瘤活性比5F更强的6F和A却由于含量低的原因未能进一步开发研究。本实验的目的是确定与半边旗同属的其他植物的抗肿瘤活性部位，为下一步在活性作用的指导下，进一步发现抗肿瘤作用比5F更强的含量较高的二萜类化合物提供研究基础。

【参考文献】
  　[1] 王玉生，蔡乐文. 南方药用植物图鉴[M]. 汕头：汕头大学出版社，2005：18.

　　[2] 张 晓，李金华，何承伟，等.半边旗中二萜类化合物的植化及抗肿瘤活性初步研究[J].中国药学杂志，1999，34(8)：512.

　　[3] 戴 滨，崔 燎，吴 铁，等. 半边旗提取物5F抗肿瘤作用的实验研究[J].四川中医，2006，24(2)：10.

　　[4] 彭四保，彭 勇，陈士林，等.药用植物亲缘学[J].世界科学技术-中医药现代化，2005，7(6)：97.

　　[5] 龚先玲，陈志红，梁念慈.半边旗提取物及化学成分抗肿瘤作用的研究[J].四川中医，2008，27(7)：51.