丹参延缓高同型半胱氨酸血症兔动脉粥样硬化形成的形态学研究

来源:岁月联盟 作者: 时间:2015-05-19

                 作者:周玲生, 张海燕, 周路坦

【摘要】  目的探讨丹参对高同型半胱氨酸血症(Hhcy)兔动脉粥样硬化的干预作用。方法随机将40只家兔分成对照组(A),蛋氨酸组(B),高脂组(C),丹参+蛋氨酸组(D),分别于实验0,4,8周检测各组血浆同型半胱氨酸 (Hcy)改变和病理学观察腹主动脉血管病理变化。结果B组第4,8周时血浆Hcy含量显著高于同时段A组(P<0.01);D组与B组比较,4周水平接近,8周末时低于同时段B组(P<0.01)。说明随用药时间延长,丹参干预组血浆Hcy含量上升幅度明显小于同时段蛋氨酸组。病理学变化:B组、C组腹主动脉大体观察有明显粥样斑块形成;D组与正常组比较无明显差异。结论HHcy可致动脉粥样硬化的形成,丹参具有延缓或干预其动脉粥样硬化形成的作用。

【关键词】  动脉粥样硬化; 丹参; 高同型半胱氨酸血症

 本研究分别采用高L-蛋氨酸建立兔Hhcy血症模型和高脂饮食方法建立兔高脂血症模型,通过与对照组、丹参+蛋氨酸组形成动脉粥样斑块的比较,及各组血浆同型半胱氨酸 (Hcy)含量的比较,观察Hhcy致AS形成机制;检验丹参对Hhcy引起AS病理过程的干预效果,为Hhcy的防治、延缓或防治AS的形成,降低心、脑血管病的发生风险拓宽新思路,提供新靶点。

  1 材料与仪器

  1.1 动物筛选健康雄性中国家兔40只(由武汉万千嘉禾实验动物养殖有限公司提供),月龄3~5个月,体质量在1.5~2.0 kg。

  1.2 药品与试剂丹参中草药购于河南省南阳市医药公司,由南阳医学高等专科学校药理教研室按比组方,经煎制、过滤、浓缩为1 g/ml (以生药汁) 丹参口服液,高压灭菌,0℃冰箱保存备用。高L-蛋氨酸购自张家港市华昌药业有限公司。Hcy试剂盒由北京九强生物技术有限公司提供。

  1.3 仪器美国GELg-9彩色多普勒超声诊断仪(TOSHIBA生产),TBA-120FR生化分析仪,TU-1810紫外分光光度计,Bio-rad680酶标仪,(2/2)VI普通Ⅰ类B型脱水机,孝感宏业TS-12L,日本原装进口(1/2)JVCTK-C921EC显微镜摄像机,日本原装进口OLYMPUSCX31显微镜,德国原装进口mICROMGMBH Hm200切片机,CS-摊片机。

  2 方法

  2.1 动物分组实验动物以标准饲料适应性喂养1周后,随机分为4组,即:对照组(A),蛋氨酸组(B),高脂组(C),丹参+蛋氨酸组(D)。每组10只。A组:喂标准饲料+等量的生理盐水灌胃;(B)组:喂蛋氨酸饲料,即标饲+蛋氨酸0.1 g/(kg·d)用蒸馏水稀释灌胃;(C)组:喂高脂饲料(标饲+2%胆固醇+5%猪油)+等量的生理盐水灌胃;D组:所喂饲料同蛋氨酸组,同时给予丹参口服液3.3 g/(kg·d)灌胃。各组动物饲料按每天100 g/只计算,分笼喂养,自由饮水,隔周称重,调整给药量,连续喂饲8周。上述各组兔均限食量,每兔每日100 g。

  2.2 Hcy含量检测分别于喂药的第0,4,8周末时,自兔耳缘静脉采血2 ml,离心后用循环酶法检测血浆Hcy含量。

  2.3 病理观察实验第8周末,颈动脉放血处死动物。立即取降主动脉至腹主动脉分叉处血管, 10%甲醛固定、取材、脱水、血管横断包埋、石蜡切片、HE染色、光镜观察。

  2.4 统计学分析各组数据用±s表示,并用SPSS13.0统计学软件进行处理,组间进行F检验判定,P<0.05有统计学意义。

  3 结果

  3.1 各组家兔血浆Hcy含量的变化0周时各组血浆Hcy含量分布符合正态分布,其95%的可信区间为16.67~22.44 μmol/L(即正常参考值),超过此值上限确定为兔高同型半胱氨酸血症(Hhcy)。B组在第4周、8周末时Hcy均显著高于同期对照组(P<0.01);C组两时段Hcy含量均与A组接近无显著差异;D组与B组比较, 4周Hcy水平接近,8周末时低于同时段B组(P<0.01)。说明随用药时间延长,丹参干预组血浆Hcy含量上升幅度明显小于同时段蛋氨酸组。实验期间各组家兔一般情况良好,B组有2只,C组1只死亡。结果见表1表1 各组家兔血浆Hcy含量比较

  3.2 各组家兔腹主动脉血管病理变化大体观察:沿腹主动脉管壁剪开,A组、D组动脉内膜无明显斑块形成,B组、C组可见内膜不规则隆起斑块。

图片内容