大鼠发热模型及发热机制的研究进展
2.4 其他诱导的发热模型
在诱导的大鼠发热模型中，除了以上3种主要的模型外，还有一些其他模型，虽然使用不是那么的普遍，但在特定的实验、特定的情况中也有用到。
2.4.1 角叉菜的致热模型 角叉菜诱导发热模型的特点是致炎局部的前列腺素合成增加，并与血管活性物质和激肽类一起诱发水肿，常用于观察药物对急性炎症过程的影响，它是筛选发热抗炎药物的常规模型[16]。李茂等在研究中发现舒感颗粒对角叉菜胶引起的大鼠发热具有一定的解热作用，流感病毒引起的发热有标本兼治的功效[17]。该方法造模导致的发热常常以局部急性炎症为主要表现，因此一般用于致炎实验，而鲜用于制作发热模型。
2.4.2 注射杀死的大肠杆菌或乙型副伤寒杆菌培养液 将在30～37 ℃培养3～4周的大肠杆菌肉汤培养液或培养3～4昼夜的乙型副伤寒杆菌肉汤培养液，以细菌滤过器过滤。把留在滤器上的细菌剩余物放入盛有甘油1～2 mL的研钵中研碎，高压灭菌。取该混悬液0.2 mL，以过滤液(肉汤)2 mL稀释后，给大鼠皮下注射，几小时内即可引起发热，此法可以使发热持续较长时间，大约在12 h左右[18]。
3 与发热有关体温调节介质
体温调节的高级中枢主要位于视前区下丘脑前部(POAH),该区含有温度敏感神经元,对来自外周和深部温度信息起整合作用,将致热原或发热介质微量注射于POAH可引起明显的发热反应;另一些部位如杏仁核(MAN) [19]、腹中膈(VSA)和弓状核则对发热时体温产生负向影响,刺激这些部位可使体温上升超过正常时难以逾越的界限,因此发热时体温可能由两种介质相互作用进行调节:一个是正调节介质,使体温上升,主要包括环磷酸腺苷(cAMP)、前列腺素E2(PGE2)、氧化亚氮(NO)等;另一个是负调节介质,促使体温下降,主要包括精氨酸加压素(AVP)。当外周致热信号通过这些途径传入中枢后,启动体温正负调节机制,正负调节相互作用的结果决定调定点上移水平和发热的幅度[19]。
3.1 正调节介质
3.1.1 环磷酸腺苷(cAMP) cAMP作为一种重要的中枢发热介质已受到国内外学者的一致认同。cAMP是接近体温调节终末环节的发热介质,大多数学者认为“Na+/Ca2+上升诱导下丘脑内cAMP的含量上升”是多种致热原引起发热的共同中介环节[20]。发热动物模型脑脊液及下丘脑组织中,cAMP 含量增多与体温升高呈显著正相关[21]。
3.1.2 前列腺素E2(PGE2) 致热原引起发热时，脑脊液中PGE2含量明显增加，并且PGE2含量升高先于体温升高，起始于发热的潜伏期并持续发热的全过程[22]。动物侧脑室注入微量的PGE2可诱导发热反应,并且PGE2可直接刺激PO/AH区温度敏感神经元,改变其放电频率。中枢内PGE2主要来源于脑血管内皮细胞及其周围的巨噬细胞，并以旁分泌形式作用于下丘脑温度敏感神经元的PGE2受体,有学者对PGE2受体后续的信号转导通路进行了研究，认为PGE2与EP结合后，通过提高细胞内的cAMP使调定点升高[23]。
3.1.3 氧化亚氮(NO) 氧化亚氮作为一种新型的神经递质,广泛分布于大脑皮层、小脑、下丘脑视上核、室旁核、视前区下丘脑前部(POAH)等部位。外周及中枢NO参与了多种动物的体温调节过程,并可能通过与中枢环氧合酶——前列腺素E(COXPGE)系统相互作用参与了酵母性发热。对于大鼠,外周给予NOS抑制剂可降低甚至完全阻断LPS、IL1等致热原诱导的发热及应激性体温升高,但大剂量也可使正常动物出现类似发热反应; 在中枢,NO供体可加强大鼠发热反应,但外周应用NO则可显著降低发热及正常大鼠体核温度，这些均说明NO参与了大鼠体温调节过程。总的来说,大鼠体温对于NO的反应,实际上可看作中枢和外周作用的叠加或整合[24]。
3.2 负调节介质
在负反馈调控中,脑内生成一些内源性降温物质可能起着主要的作用,这些对抗体温升高或降低体温的物质中,现阶段研究最多的是精氨酸加压素(AVP)。AVP是一种9肽神经递质，分布于CNS的细胞体、轴突和神经末梢，包括其作用部位腹中膈区(VSA)和中杏仁核的神经末梢，机体发热时其含量增多。众多研究表明[25],AVP 具有明显的抑热作用,AVP被认为是一种内源性解热物质。其在中枢作用于VSA 的V1亚型受体发挥解热或限热作用。有学者认为[26]AVP可能是通过影响位于POAH 区的温度敏感神经元的放电频率而影响体温，VSA中AVP含量下降,表明AVP释放增多,刺激AVP的内源性释放可抑制发热。
4 展 望
目前制作大鼠发热模型主要还是以采用酵母、内毒素(LPS)和2,4二硝基酚最为常见，其共同的特点是造模方便，成功率高，对实验条件要求也比较低。LPS诱导发热起效较慢，宜较早给药，其诱导的发热表现为双相热或三相热,并伴有寒颤、精神萎靡和轻微腹泻等症状,与临床感染性炎症所致发热相似,是经典的炎性发热模型,常用于筛选解热药物并探讨炎性发热机制。2,4二硝基酚诱导的发热模型升温后持续时间较短,大约1 h左右,所以不适用于作用缓慢而持久的解热药物解热作用的考察。但对于作用快速且强大的药物,效果还是很理想。酵母菌所致的发热是由注射部位的局部溃烂引发的剧烈炎症反应导致，动物全身表现与临床伴见明显炎症的里热证类似，更适合考察清热药的解热作用。
给动物注射菌液或内毒素时，注射量并不与发热反应强度呈正比。注入量过大时体温可不上升，故剂量的选择必须恰到好处。静注菌液或内毒素等引起的发热较皮下注射迅速而强烈。但注射化学刺激则必须皮下注射才会引起较强反应。可能是该类物质刺激皮下组织造成无菌性炎症所致。此外，动物种族，年龄和形态特性对发热也有明显的影响。实验室的温度能明显的影响发热反应速度和强度，因此，在进行实验时使室温保持在偏低水平(20～25 ℃)为宜。
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