喉疾灵口含片质量标准研究
作者：袁旭江，吴燕红，郭钟慧，谢琳，朱盛山，钟华林,李苑新
【摘要】 目的研究喉疾灵口含片的质量标准。方法 采用薄层色谱(TLC)法对喉疾灵口含片中人工牛黄、诃子、了哥王、冰片、桔梗进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法进行苦参碱含量测定。结果 TLC法能分别检出喉疾灵口含片中人工牛黄、诃子、了哥王、冰片、桔梗，均具有良好的鉴别特征，阴性未见干扰;苦参碱在0.066 8～0.668 μg范围内，进样量与峰面积具有良好的线性关系， r=0.999 8，平均加样回收率为98.86%(n=6)，RSD=1.94%。 结论 本方法具有良好的专属性和重现性，能准确、稳定地对喉疾灵口含片进行定性鉴别和定量测定，可用于该制剂的质量控制。
【关键词】 喉疾灵口含片;TLC法;HPLC法;苦参碱
Abstract:ObjectiveTo study on the quality standard of Houjiling buccal tablets.Methods Thin layer chromatography (TLC) was used to identify Calculus Bovis Artifactus,Indian Stringbush Root,Medicine Terminalia Fruit,Borneol and Balloonflower Root,and HPLC was applied to assay matrine.Results Calculus Bovis Artifactus,Indian Stringbush Root,Medicine Terminalia Fruit,Borneol and Balloonflower Root can be identified by TLC without interference of negative samples.It showed a good linear relationship in determining matrine at the range of 0.066 8-0.668 μg, r=0.999 8,and the average recovery was 98.86%(RSD=194%).Conclusion These methods can be used in qualitative identification and quantitative assay of Houjiling buccal tablets with good specificity,reproducibility and stability.
Key words:Houjiling buccal tablets; TLC; HPLC; matrine
喉疾灵口含片是由喉疾灵胶囊[1]经过提取精制和剂型改变而成，由人工牛黄、诃子(肉)、山豆根等12味中药材组成，具有清热、解毒、散肿止痛作用，用于腮腺炎、扁桃体炎、急性咽炎、慢性咽炎急性发作及一般喉痛等。为了更好控制喉疾灵口含片质量，保证其用药安全有效，笔者参照文献[2-5]对口含片中人工牛黄、诃子、了哥王、冰片、桔梗等进行了薄层色谱研究，建立其定性鉴别方法，并参照文献[6-9]采用高效液相色谱法建立该制剂主药山豆根所含主要有效成分苦参碱的含量测定方法，并对3批中试样品进行含量测定。现报道如下。
1仪器与试药
1.1仪器
Agilent1100高效液相色谱仪系列(美国安捷伦公司)、BP211D电子分析天平(德国Sartorius公司)、CAMAG REPROSTAR 3数码成像系统(瑞士CAMAG)、H·S·G·ⅡB-4型电热恒温水浴锅(上海仪表供销公司)、KQ3200超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司，功率120 W，频率40 kHz)、硅胶 G预制板(浙江台州市路桥四甲生化塑料厂)，定量毛细管(Drummond USA)。
1.2试药
喉疾灵口含片(批号：20070501、20070502、20070503)由陈李济药厂提供，苦参碱对照品(批号:110805-200306)、没食子酸对照品(批号：110831-200302)、人工牛黄对照药材(批号:121197-200502)、 桔梗对照药材(批号:121028-200507)、了哥王对照药材(批号:1266-0301)、冰片对照药材(批号:110742-200504)等均由中国药品生物制品检定所提供，水为三蒸水，其他试剂均为分析纯。
2定性鉴别
2.1人工牛黄TLC鉴别
取本品6片，研细，称取2.4 g，加甲醇10 mL，超声处理10 min，滤过，滤液浓缩至2 mL，作为供试品溶液。取人工牛黄对照药材，加甲醇使溶解，制成每1 mL含10 mg的溶液，作为对照药材溶液。另按处方工艺制备缺人工牛黄的阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。按《中国药典》2005年版一部附录ⅥB 薄层色谱法试验，精密吸取上述3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(体积比9∶5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%(体积分数)硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照则未见相应斑点。见图1。
2.2了哥王TLC鉴别
取“2.1”项下供试品溶液作为供试品溶液。分别取了哥王原药材、了哥王对照药材各0.5 g，同供试品溶液制备方法制备了哥王原药材及对照药材溶液。另按处方工艺制备缺了哥王的阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。按《中国药典》2005年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，精密吸取上述4种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90 ℃)-乙酸乙酯-甲酸(体积比6∶5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材、原药材色谱相应的位置上，显蓝色荧光斑点。阴性对照则未见相应斑点。见图2。[PSd171;S*2〗1.人工牛黄对照药材; 2～4.供试品; 5.阴性对照图1人工牛黄TLC图Figure 1TLC chromatogram of Calculus Bovis Artifactus[PSd172;S*2〗1.了哥王对照药材; 2.了哥王原药材; 3～5.供试品;6.阴性对照图2了哥王TLC图Figure 2TLC chromatogram of Indian Stringbush Root
2.3诃子TLC鉴别
取“2.1”项下供试品溶液作为供试品溶液。取诃子肉原药材0.5 g，同供试品溶液制备方法制备原药材溶液。取没食子酸对照品适量，加乙醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液，作为对照品溶液。另按处方工艺制备缺诃子肉的阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。按《中国药典》2005年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，精密吸取上述4种溶液各3 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(体积比7∶5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%(质量浓度)三氯化铁乙醇溶液，置可见光下检视。供试品色谱中，在与对照品、原药材相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品则无相应斑点。见图3。[PSd173〗1.没食子酸对照品;2.诃子原药材;3～5.供试品;6.阴性对照图3诃子TLC图Figure 3TLC chromatogram of Medicine Terminalia Fruit
2.4冰片TLC鉴别
取本品10片，研细，过100目筛，称取粉末3 g，用无水乙醚振摇洗涤5次，每次20 mL，弃去乙醚液，残渣挥干乙醚，加甲醇20 mL超声处理10 min，滤过，滤液蒸干，用乙酸乙酯20 mL超声溶解，滤过，滤液蒸干，加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取冰片对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。另按处方工艺制备缺冰片的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。按《中国药典》2005年版一部附录ⅥB 薄层色谱法试验，精密吸取上述3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90 ℃)-乙酸乙酯(体积比10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%(质量浓度)磷钼酸无水乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰，置可见光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照未见对应斑点。见图4。[PSd174;S*2〗1.冰片对照品; 2～4.供试品; 5.阴性对照 图4冰片TLC图Figure 4TLC chromatogram of Borneol