虎杖、当归醇提工艺研究

【摘要】  目的 确定虎杖、当归的最佳醇提工艺条件。方法 以浸膏得率和虎杖苷浸出量为指标,对影响浸出的主要因素进行优化。结果 最佳的提取工艺条件为：加60%的乙醇回流提取2次,加醇量分别为10、8倍,提取时间分别为1.5、1.0 h。结论 优选的提取工艺可为工业化生产提供实验依据。

【关键词】  正交设计；醇提工艺；虎杖；当归；虎杖苷

    虎杖、当归为常用中药,虎杖的化学成分主要为白藜芦醇类[1]、蒽醌类。虎杖苷(白藜芦醇苷)为虎杖中的主要有效成分,具有显著的扩血管作用,对冠状动脉、脑血管、肺血管、肝血管等都有扩张作用,并对血管平滑肌细胞内钙离子、pH具有双向调节作用。在虎杖制剂中,对其有效成分虎杖苷可以采用一定浓度的醇提取。本研究采用正交设计[2-3]的方法,以乙醇为提取溶媒,对该制剂处方中的主要药味虎杖、当归的醇提工艺条件进行优选,为工业化生产提供参考依据。1  仪器与试药    LC-10AT高效液相色谱仪,SPD-10A紫外检测器；Apollo色谱柱：Apollo C18-A(250 mm×4.6 mm,5 μm)；N3000色谱工作站；电子分析天平(AY120 Shimadzu 0.1 mg～120 g)；恒温水浴锅(DK-SZZ型)。虎杖、当归药材购自湖南三湘中药饮片有限公司,经检验均为合格药材。虎杖苷(批号111575-200502)由中国药品生物制品检定所提供。乙腈为色谱纯,水为重蒸水,其余试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  虎杖苷含量测定

　　2.1.1  色谱条件 

　　色谱柱为Apollo C18-A柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)；乙腈-水(23∶77)为流动相；检测波长306 nm；流速1.0 mL/min；柱温30 ℃。理论塔板数按虎杖苷峰计算不低于3 000。在此条件下,供试品色谱中虎杖苷与其它组分的色谱峰可达基线分离(见图1)。

　　2.1.2  对照品溶液的制备 

　　精密称取虎杖苷对照品14.8 mg,置100 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,取1 mL置于10 mL
量瓶中,加甲醇至刻度,即得(虎杖苷的浓度为0.029 6 mg/mL)。

　　2.1.3  供试品溶液的制备与测定 

　　取各提取液,(指醇提浓度、醇提次数、正交试验、正交验证试验的提取液)用0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。精密吸取对照品与供试品溶液适量,注入高效液相色谱仪,测定峰面积,计算。

　　2.2  乙醇浓度对浸出量的影响

    依处方比例称取虎杖、当归,分别加入浓度为40%、50%、60%、70%、80%的乙醇浸泡0.5 h,回流提取2次,加醇量分别为8、6倍,提取时间分别为2.0、1.5 h,分别收集5种不同浓度的提取液,然后测定浸膏得率与虎杖苷的浸出量。结果表明,虎杖、当归以60%乙醇提取,其虎杖苷的浸出量最高。

　　2.3  提取次数考察

    按处方比例称取虎杖、当归,加60%乙醇浸泡0.5 h,回流提取3次,加醇量分别为8、6、6倍,提取时间分别为2.0、1.5、1.5 h,收集合并第1、2次提取液,定容,再收集第3次提取液,定容,测定虎杖苷的浸出量。结果表明,第3次提取的浸膏得率与虎杖苷浸出量均小于3次总量的10%,故提取2次即可。