HPLC法测定强肝糖浆中丹酚酸B的含量

　　2.4  色谱条件

    色谱柱ODS(250 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相：甲醇-乙腈-1.5%甲酸(30∶10∶60)；检测波长286 nm；流速1.0 mL/min；柱温30 ℃[1]。

　　2.5  专属性试验

    精密吸取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液各10 μL,按色谱条件进样,结果供试品色谱中,在与丹酚酸B对照品相同的保留时间处有色谱峰,与其他组分基本能达到基线分离(R＞1.5)；阴性对照色谱中,在与丹酚酸B对照品色谱峰相同的保留时间处无色谱峰,表明阴性对照无干扰,具有专属性。见图1。

　　2.6  线性关系考察
   
　　精密吸取丹酚酸B对照品溶液2、4、6、8、10 μL,分别按色谱条件进样测定,测定丹酚酸B峰面积。以峰面积为纵坐标,进样质量为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程为：Y＝1.27E＋004X－2.00E＋004,r＝0.999 9,表明丹酚酸B进样量在0.302 4～1.512 μg范围与峰面积呈良好的线性关系。

　　2.7  稳定性试验

    精密吸取同一强肝糖浆供试品溶液,分别在0、2、4、6、8 h进行测定,计算,得丹酚酸B的质量分数RSD＝0.72%,表明供试品溶液在8 h内基本稳定。

　　2.8  精密度试验

    精密吸取同一强肝糖浆供试品溶液10 μL,按上述色谱条件连续进样5次,测定丹酚酸B峰面积,计算得其RSD＝0.48%,表明仪器精密度符合要求。

　　2.9  重复性试验

    取同一批强肝糖浆5份,制备供试品溶液进行测定,计算,得丹酚酸B平均含量的RSD＝0.30%(n＝5),表明本法重复性好。

　　2.10  加样回收率试验

    取同一批已知含量的样品5份,每份10 mL,精密量取,置具塞锥形瓶中,精密加入丹酚酸B对照品适量,照“2.2”项下方法制备供试品溶液并进行测定,计算丹酚酸B的平均回收率为99.79%,RSD＝0.23%。结果见表1。表1  加样回收率试验结果(略)
 
　　2.11  样品测定
   
　　取3批强肝糖浆,按“2.2”项下方法制备供试品溶液。精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10 μL,按上述色谱条件进样测定,外标一点法计算丹酚酸B的质量分数,结果见表2。表2  强肝糖浆中丹酚酸B的含量测定结果(略)

　　3  讨论

    强肝糖浆收载于《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》第2册,原标准没有含量测定的要求。为确保药品质量,我们建议对该药增加含量测定项目,测定原处方中作为君药的黄芪或丹参的含量,但测定黄芪中黄芪甲苷需用蒸发光散射检测器,一般单位不具备这样的检测设备,该方法可能难以推广。笔者参考有关文献并通过试验,拟定了HPLC法测定该制剂中丹酚酸B的方案,结果表明,阴性无干扰,专属性强,完全可用于该制剂的质量控制。

【参考文献】
  　[1] 黄 湘,刘 丹,文 萍.HPLC测定丹七片中丹酚酸B的含量[J].现代中药研究与实践,2007,21(6)：43.