大乌泡叶中总黄酮含量测定

　　2.5.2  重复性试验 

　　精密称取样品6份,每份约2.0 g,精密称定,按“2.1”项下方法制备供试品溶液,每份精密吸取1.0 mL,分别置于10 mL容量瓶中,按“2.4”项下方法进行显色和测定,记录吸光度值,计算每份样品的含量。6份样品黄酮含量的RSD＝2.11%(n＝6)。

　　2.5.3  稳定性试验 

　　精密称取样品6份,每份约2.0 g,按“2.1”项下方法制备供试品溶液。精密吸取供试品溶液1.0 mL,共6份,分别置于10 mL量瓶中,按“2.4”项下方法进行显色和测定,分别在15、20、30、45、60、100 min测定,RSD＝1.38%(n＝6)。结果表明样品在15～100 min之间稳定。

　　2.5.4  加样回收率试验 

　　精密称取芦丁对照品适量,加入已知含量的对照品,称取样品6份,每份约1.0 g,精密称定,按供试品溶液制备方法制成溶液6份,各取1.0 mL,置于10 mL量瓶中,按“2.4”项下方法进行测定,结果见表1。表1  加样回收率试验结果（略）

　　2.6  样品含量测定

    精密称取样品6份,每份约2.0 g,按“2.1”项下方法制备供试品溶液。每份精密吸取1.0 mL,分别置于10 mL量瓶中,按“2.4”项下方法进行显色和测定,由标准曲线计算得大乌泡中总黄酮平均含量为3.8%,RSD＝2.4%,说明该方法测得的含量是可靠的。表2  大乌泡叶中总黄酮含量测定结果（略）
 
　　3  讨论

    本试验用硝酸铝作为黄酮类比色测定的显色剂,主要是黄酮母核中含有碱性氧原子,一般又多带酚羟基,能和铝离子产生黄色络合物,又加入亚硝酸钠和氢氧化钠,使在碱性溶液中显红色,显色反应在100 min内稳定[1]。
   
　　对样品的提取方法进行考察,超声、加热回流和索氏提取3种提取方法中,采用索氏提取总黄酮,测得吸光度值最大[2]。

    对显色系统和显色系统浓度分别进行考察,结果表明5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠溶液显色,吸光度值最大。

    采用紫外分光光度法对大乌泡叶中总黄酮的含量进行测定,是一种方便有效的含量测定方法。

【参考文献】
  　[1] 周桂芬,张涵苦.苣菜中黄酮类化合物的含量测定[J].中华中医药学刊, 2008,26(1)：219－220.

　　[2] 腾小弘,刘 威.紫外分光光度法测定复方山楂片中总黄酮含量[J].辽宁中医杂志,2008,35(2)：261－262