高效液相色谱法测定乳增宁胶囊中淫羊藿苷的含量

【摘要】  目的 建立乳增宁胶囊中淫羊藿苷含量的测定方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil ODS C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(70∶30),检测波长275 nm,流速为1.0 mL/min。结果 淫羊藿苷在0.105～0.840 μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系(r＝0.999 8),平均回收率为100.5%,RSD＝1.14%(n＝6)。结论 该方法简便快捷,重复性好,可作为乳增宁胶囊中淫羊藿苷含量的测定方法。

【关键词】  淫羊藿苷；乳增宁胶囊；高效液相色谱法；含量测定

    Abstract：Objective To develop a method for determining the content of icariin in Ruzengning Capsules. Methods A HPLC method was set up to with Hypersil ODS C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) column, and methanol-water (70︰30) as mobile phase, the UV detection wavelength was 275 nm and the flow rate was 1.0 mL/min. Result The calibration curve was showed good linearity (r＝0.999 8) within the range of 0.105～0.840 μg and the average recovery was 99.5%, RSD was 1.27% (n＝6). Conclusion The method is simple and rapid, and with good reproducibility for the determination of icariin in Ruzengning Capsules.

    Key words：icariin；Ruzengning Capsules；HPLC；content determination
 
    乳增宁胶囊由艾叶、淫羊藿、柴胡、川楝子、天门冬、土贝母6味药材经加工制备而成,具有疏肝解郁、调理冲任的功效,临床上用于肝郁气滞型及冲任失调型的乳腺增生等的治疗[1]。本试验参考文献[2-3]的方法,以高效液相色谱(HPLC)法测定乳增宁胶囊中淫羊藿苷的含量,拟建立简便快捷、专属性和重复性均较好的含量测定方法。

　　1  仪器与试药

    日本岛津LC-10ATvp型高效液相色谱仪；SPD-20Avp型紫外检测器；KQ-100DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。淫羊藿苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号110737-200312)；乳增宁胶囊(市售,批号分别为070901、080301、080302、080303)。甲醇为色谱纯；其他试剂为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件

    色谱柱：Hypersil ODS C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水(70︰30)；检测波长：275 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：(30.0±1)℃；保留时间：约为10 min；进样量：20 μL；理论塔板数按淫羊藿苷计应不低于2 000。

　　2.2  对照品溶液的制备

    精密称取淫羊藿苷对照品适量,置棕色量瓶中,加甲醇制成每1 mL含25 μg的溶液,即得。

　　2.3  供试品溶液的制备

    取本品装量差异项下的本品内容物,研细,混匀,精密称定约0.5 g,置50 mL棕色量瓶中,加入70%乙醇约40 mL,超声处理20 min(功率100 W,频率40 kHz),取出,放冷,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,静置,用0.45 μm微孔滤膜过滤,取续滤液,即得。

　　2.4  空白试验

    取处方项下除淫羊藿以外的其余药材,按供试品溶液的制备方法制备阴性溶液,按上述色谱条件分析。在与对照品的相应位置上,无明显其他峰出现。见图1。

　　2.5  线性范围考察

    配制52.5 μg/mL的淫羊藿苷对照品溶液。分别精密吸取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 mL转移至10 mL棕色量瓶中,用甲醇定容。分别精密吸取上述溶液各20 μL进样。以淫羊藿苷对照品量为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程为：Y＝1.288×106X－3 479.602,r＝0.999 8。结果表明,淫羊藿苷对照品在0.105～0.840 μg范围与峰面积呈良好的线性关系。