HPLC法测定犀羚解毒丸中甘草酸的含量

                   作者：秦战勇,林莉莉,姚雪花,杜树山

【摘要】  目的 建立犀羚解毒丸中甘草酸含量的测定方法。方法 采用HPLC法,色谱柱：Diamonsil C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相：甲醇-[0.2 mol/L醋酸铵-冰醋酸(33∶1)](64∶36),检测波长：250 nm,流速：1.0 mL/min。结果 甘草酸铵在0.075～0.375 μg范围内呈良好的线性关系(r＝0.999 6),加样回收率为98.25%,RSD＝0.92%。结论 该方法快速、简便、准确、重复性较好,结果可靠,可用于控制犀羚解毒丸制剂的质量。

【关键词】  犀羚解毒丸；甘草酸；高效液相色谱法；含量测定

    Abstract：Objective To establish a method for the determination of Glycyrrhizic acid in Xiling jiedu Pills. Methods Diamonsil C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm) column in an oven at 30 ℃ was need, with a mobile phase consisting of methanol - [0.02 mol/L ammonium acetate - glacial acetic acid (33∶1)] (64∶36) and a UV detector at 250 nm, the flow rate was 1.0 mL/min. Results The linear range of Glycyrrhizic acid was 0.075～0.375 μg/mL. The average recovery was 98.25% (RSD＝0.92%). Conclusion The method is simple and accurate, and can be used for the quality control of Xiling Jiedu Pills.

    Key words：Xiling Jiedu Pills；Glycyrrhizic acid；HPLC；content determination
 
    犀羚解毒丸是由玄参、连翘、薄荷、牛蒡子(炒)、荆芥穗、板蓝根、金银花、地黄、麦冬、栀子、淡竹叶、桔梗、甘草、犀角粉、水牛角浓缩粉、羚羊角粉、冰片等组成的纯中药制剂,具有辛凉发表、祛瘟解毒之功效,用于外感时邪引起的发热恶风、头痛目眩、四肢酸懒、面赤腮肿、咽干口燥、咳嗽咽痛等。犀羚解毒丸载于《卫生部药品标准·中药成方制剂》第6册,由同仁堂集团股份公司生产。甘草为本品方中的主要药材,甘草酸是该药的主要有效成分,故以甘草酸为指标进行含量测定,控制成品的质量。参照2005年版《中华人民共和国药典》(一部)[1],我们建立了犀羚解毒丸中甘草酸含量的HPLC测定方法,该方法快速、简便、准确、重复性较好,结果可靠,可用于犀羚解毒丸制剂的质量控制。

　　1  仪器与试药

    Waters1515高效液相色谱仪,Waters2487紫外可见光检测器,Mellennium32色谱工作站(美国Waters公司)；KQ-250型超声波清洗器,Mettler Toledo AG135十万分之一电子分析天平。
   
　　甘草酸铵对照品(购自中国药品生物制品检定所,批号110731-200511)；犀羚解毒丸制剂(由北京同仁堂集团股份有限公司提供,批号6013957、6013958、6013959)。甲醇(色谱纯),水为纯净水,其他试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件及系统适应性

    色谱柱：Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相：甲醇-[0.2 mol/L醋酸铵-冰醋酸(33∶1)](64∶36)；检测波长：250 nm；流速：1.0 mL/min。

　　2.2  溶液的制备

　　2.2.1  对照品溶液的制备
 
　　精密称取在五氧化二磷干燥器中干燥至恒重的甘草酸铵对照品1.25 mg,置25 mL量瓶中,加流动相溶解并定容至刻度,摇匀,作为对照品储备液。精密量取对照品储备液5 mL,置10 mL量瓶中,加流动相溶解并定容至刻度,摇匀,即得25 μg/mL甘草酸铵对照品溶液(折合甘草酸24.487 5 μg)。

　　2.2.2  供试品溶液的制备 

　　取犀羚解毒丸(批号6013957)适量,与硅藻土按6∶4比例粉碎并均匀混合成中粉,取上述粉末8.0 g,精密称定,置250 mL具塞锥形瓶中,加入40%甲醇100 mL,称定重量,超声处理(功率250 W,频率40 kHz)30 min,放冷,用40%甲醇补是减失的重量,摇匀,静置,离心,分取上清液滤过,取续滤液作为供试品溶液。

　　2.2.3  阴性对照溶液的制备

　　按处方比例称取除甘草以外的其他药味,依照犀羚解毒丸的生产工艺制成阴性制剂,再按供试品溶液制备方法制成缺甘草的阴性对照溶液。