薄层色谱扫描法测定黄枳胶囊中大黄酚、大黄素和大黄酸的含量
【摘要】 目的 建立黄枳胶囊中大黄酚、大黄素、大黄酸的含量测定方法。方法 采用薄层色谱扫描法。展开剂：正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5),检测波长λS＝435 nm,λR＝610 nm。结果 大黄酚、大黄素和大黄酸分别在0.014 65～0.073 25、0.013 35～0.066 75、0.012～0.072 μg范围内呈良好线性关系。结论 本法简单、准确、重复性好,可用于黄枳胶囊中大黄酚、大黄素和大黄酸的含量测定。
【关键词】 薄层色谱扫描法；黄枳胶囊；大黄酚；大黄素；大黄酸；含量测定
Abstract：Objective To establish a method for determination of chrysophanol, emodin and rhein in Huangzhi capsules. Method Chrysophanol, emodin and rhein in Huangzhi capsules was determined by TLC-scanning with a mixture of n-hexane-ethylacetate-formic acid (30∶10∶0.5) as the developing system. The detection wavelength was 435 nm and 610 nm. Results The calibraction curve of chrysophanol, emodin and rhein was linear in the range of 0.014 65～0.073 25, 0.013 35～0.066 75, 0.012～0.072 μg respectively. Conclusion The method was simple, accurate with good repeatability, and suitable for the content determination of chrysophanol, emodin and rhein in Huangzhi capsules.
Key words：TLC-scanning；Huangzhi capsules；chrysophanol；emodin；rhein；content determination
黄枳胶囊是由大黄、白芍、火麻仁、瓜蒌等组成,具有润肠通便的功效,对于肠燥便秘有很好的疗效,其中大黄为该制剂的君药。本试验以大黄酚、大黄素、大黄酸为指标,参考有关文献资料及试验研究,采用薄层色谱扫描法(TLCS)测定了3批黄枳胶囊中大黄酚、大黄素、大黄酸的含量,建立和完善了本制剂的质控方法。
1 仪器与试药
CAMAGⅢ型薄层色谱扫描仪；CAMAG点样仪；定量毛细管(瑞士CAMAG公司)；硅胶H薄层板(青岛海洋化工集团)。黄枳胶囊(安徽中医学院第一附属医院制剂中心提供,批号20070714、 20070809、20070906)；大黄酚(批号0796-200208)、大黄素 (批号0756-200510)、大黄酸(批号0757-200405)对照品均购自中国药品生物制品检定所。所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
分别精密称取大黄酚、大黄素、大黄酸,加甲醇分别制成每1 mL含有0.088 mg、每1 mL含有0.080 mg、每1 mL含有0.072 mg的大黄酚、大黄素、大黄酸对照品溶液。取同体积对照品混合,制成对照品混合液(内含大黄酚0.029 3 mg/mL、大黄素0.026 7 mg/mL、大黄酸0.024 mg/mL)。
2.2 供试品溶液的制备
取本品2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中。精密加入甲醇25 mL,称定重量,加热回流1 h,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。取续滤液5 mL,水浴蒸干,残渣加8%盐酸溶液10 mL,超声处理2 min,再加三氯甲烷10 mL,加热回流1 h,放冷。置分液漏斗中,用少量三氯甲烷洗涤容器,并入分液漏斗中,分取三氯甲烷层,酸液再用三氯甲烷提取3次,每次10 mL。合并三氯甲烷液,减压回收溶剂至干,残渣加甲醇10 mL使溶解,作为供试品溶液[1]。
2.3 色谱条件
吸附剂：硅胶H板。展开剂：正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5),预饱和30 min[2]。
2.4 检测波长
供试品溶液、对照品溶液经点样展开后,在400～700 nm内对大黄酚、大黄素、大黄酸进行波长扫描,3种成分的最大吸收峰相近,故选用λS＝435 nm,λR＝610 nm。
2.5 线性关系的考察
精密吸取对照品混合液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 μL,分别点于同一硅胶H板上,展开,取出,晾干,扫描得峰面积。以点样量为横坐标、峰面积为纵坐标作图,得标准曲线。见表1。表1 线性关系试验结果(略)