高效液相色谱法测定小蓟中芦丁含量

　　2.1.2  供试品溶液的制备 

　　各取3个产地药材粉末(过2号筛) 1.0 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,分别加入50 mL 40%甲醇,称重,浸置1 h,超声处理(功率500 w,频率50 kHz)40 min,补足称重,过滤,微孔滤膜(0.45 μm)滤过,即得。

　　2.2  线性关系考察
   
　　分别精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5 mL稀释10 mL,依次精密吸取稀释的对照品溶液10 μL注入液相色谱仪,测定其峰面积值,以芦丁的浓度(g/L)为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,进行线性回归。得回归方程为：Y＝25 845 255X－28 716, r＝0.999 6。结果表明,芦丁在0.003 92～0.019 6 g/L范围内具有良好的线性关系。

　　2.3  精密度试验
   
　　吸取3号对照品溶液10 μL,重复进样5次,测定其峰面积积分值,RSD＝1.503%。表明本法精密度较好。

　　2.4  稳定性试验
   
　　分别于0、1、2、4、6、12、24 h精密吸取同一份供试品溶液20 μL进样,测定其峰面积积分值,计算6 h内RSD＝1.972%。结果表明,供试品溶液在6 h内常温保存基本稳定。

　　2.5  重复性试验
   
　　取同一批号小蓟样品共5份,每份1.0 g,精密称定,按供试品溶液的制备方法平行制备5份,分别进样10 μL,每份测定2次,平均含量为0.703 5 mg/g,RSD＝1.129%。

　　2.6  回收率试验
   
　　精密称取小蓟样品6份,各1.0 g,分别精密加入芦丁对照品适量,按供试品溶液的制备方法制备,每次进样10 μL,每份测定2次,取平均值,计算加样回收率,平均加样回收率为98.70%,RSD＝2.88%。见表1。表1  芦丁加样回收率测定结果(略)
  
　　2.7  样品测定

    取3个产地的小蓟样品,按供试品溶液的制备方法制备,分别精密吸取对照品溶液和样品溶液,注入液相色谱仪,测量峰面积,按外标法计算,结果总平均值为0.580 8 mg/g。见表2。表2  小蓟中芦丁含量测定结果(略)

　　3  小结
   
　　对于小蓟中芦丁的含量测定,有人曾采用聚酰胺薄层扫描法[1],此法受薄膜表面光洁度、均匀度、厚薄等因素影响而不太稳定,张氏等[2]采用HPLC法测定苦荞麦中芦丁含量。查阅文献,还未曾有人用过HPLC法测定小蓟中芦丁含量。本实验采用HPLC法测定芦丁含量,具有简便快速、结果准确可靠的特点,可以作为小蓟药材及饮片质量控制方法。

【参考文献】
  　　[1] 周文序,田 珍.中药大、小蓟中柳穿鱼甙和芦丁的薄层扫描法定量分析[J].药物分析杂志,1994,14(6)：39－40.

　　[2] 张 琪,刘慧灵.苦荞麦中总黄酮和芦丁的含量测定方法研究[J].食品科学,2003,24(7)：113－116.