高效液相色谱法测定降脂减肥颗粒中葛根素含量

【摘要】  目的 应用高效液相色谱法测定降脂减肥颗粒中葛根素的含量。方法 采用Shim-pack-C18柱(5 μm,
150 mm×4.6 mm),甲醇-0.1%磷酸(25.3∶74.7)为流动相,流速0.9 mL/min,检测波长为250 nm。结果 线性范围为0.114～0.570 μg,r＝0.999 6,回收率为98.74%,RDS＝0.67%。结论 该方法简便、准确、灵敏,可用于该制剂的质量控制。

【关键词】  高效液相色谱法；葛根素；降脂减肥颗粒

    Abstract：Objective To determine the content of Puerarin in Jiangzhijianfei Granules by high performance liquid chromatography. Methods The determination was conducted by HPLC using a Shim-pack-C18 column (5 μm, 150 mm×4.6 mm) and a mobile phase of methanol-0.1% Phosphoric acid water (25.3∶74.7). The flow rate was 0.9 mL/min and the detection wavelength was 250 nm. Results Good linear relationship between area and amount was noted for 0.114～0.570 μg of Puerarin, with a correlation coefficient of 0.999 6. The average recovery of was 98.74%, RSD was 0.67%. Conclusion The established method is simple, accurate, sensitive and can be applied to the quality control of the preparation.

    Key words：HPLC；Puerarin；Jiangzhijianfei Granules
 
    降脂减肥颗粒是由何首乌、葛根、三七等10味中药组成,具有滋补肝肾、养益精血、扶正固本、通络定痛、健脾豁痰、明目生津、润肠通便的功效,用于各型高血脂症、心脑血管硬化、单纯性肥胖、习惯性便秘、痔疮出血。方中葛根为主要药物。本实验采用高效液相色谱法对制剂中葛根素进行含量测定,以便更好地控制其产品质量。
 
　　1  仪器与试药

    日本岛津LC-10 AT高效液相色谱仪,SPD-10A紫外检测器,KQ-250型超声波处理器。葛根素对照品购于中国药品生物制品检定所(批号0537-9910,HPLC面积归一化法,测定含量为99.26%)；降脂减肥颗粒(6 g/袋)由吉林森工健今药业有限公司提供。其它化学试剂均为国产,AR级。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件[1]

    色谱柱：Diamonsil-C18柱(5 μm,4.6 mm×150 mm)；流动相为甲醇-0.1%磷酸(25.3∶74.7)；流速：0.9 mL/min；紫外检测波长：250 nm；理论塔板数按葛根素计算,不低于3 000；柱温为室温。

　　2.2  对照品溶液的制备
   
　　精密称取葛根素对照品适量,加甲醇制成每1 mL含0.05 mg的溶液,摇匀,作为对照品溶液。

　　2.3  供试品溶液的制备
　　
　　取本品20 g,研细,取1 g,精密称定,加入30%乙醇30 mL,置具塞锥形瓶中,称定重量,超声处理20 min,放冷,再称定重量,以30%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

　　2.4  阴性对照溶液的制备
   
　　按处方量制备不含葛根药材的阴性样品,按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10 μL,注入液相色谱仪中,按上述条件测定。结果表明,阴性对照溶液色谱图中与对照品位置处无干扰,此法可行(见图1)。

　　2.5  线性关系考察

    精密吸取葛根素对照品溶液4、8、12、16、20 μL,分别注入高效液相色谱仪中进行分析。以对照品进样量(μg)为横坐标,以对照品的峰面积为纵坐标作图,得一条通过原点的直线,回归方程为：Y＝2 490 376.534X＋19 847.951,r＝0.999 6。结果表明,葛根素在0.114～0.570 μg间呈良好的线性关系。