疣清颗粒质量标准研究

　　2.2.3  供试品溶液的制备与测定 

　　取疣清颗粒2.5 g,混匀,精密称定,置于锥形瓶中,加水50 mL,浸泡30 min,超声波处理30 min,放冷,用水饱和正丁醇萃取3次(40、40、30 mL),分取正丁醇层置于上述分液漏斗中,加入40%氨试液洗涤2次,每次40 mL,弃去氨试液,分取正丁醇提取液,水浴蒸干,残渣加蒸馏水3～5 mL溶解,放冷,通过D101大孔树脂柱(内径1.5 cm,长12 cm),以水50 mL洗脱,弃去水液,再用40%乙醇30 mL洗脱,弃去40%乙醇洗脱液,继续用70%乙醇50 mL洗脱,收集洗脱液,蒸干,用甲醇转移并定容至5 mL容量瓶中。从该溶液中取一部分用0.45 μm微孔过滤器过滤后即得疣清颗粒供试品溶液。取上述供试品溶液10 μL注入液相色谱仪,测定峰面积。

　　2.2.4  精密度考察 

　　按选定的黄芪甲苷HPLC测定条件,精密吸取同一对照品溶液,进样10 μL,重复进样6次,测定黄芪甲苷峰面积,结果RSD＝1.19%(n＝6)。

　　2.2.5  重复性试验 

　　精确称取疣清颗粒2.5 g,共6份,按上述供试品溶液的制备方法制备,各进样10 μL,每份样品进2针,测定黄芪甲苷峰面积,RSD＝0.92%(n＝6)。

　　2.2.6  稳定性考察 

　　将同一样品溶液,在0、2、8、12、16、20 h分别进样10 μL,记录峰面积,结果表明,峰面积的RSD＝0.71%(n＝6)。说明供试品溶液在20 h内是稳定的。

　　2.2.7  加样回收率试验 

　　取已测知含量的样品适量,共6份,分别加入等同于样品中黄芪甲苷含量80%、100%、120%的黄芪甲苷对照品,按“2.2.3”项下同法测定,用外标两点法计算含量。结果见表1。表1  黄芪甲苷加样回收率测定结果（略）

　　2.2.8  含量测定 

　　取疣清颗粒3批样品(自制,批号为060611、060613、060615),按供试品溶液制备方法制备样品液,按上述色谱条件进行测定,进样10 μL,每份重复进样2次,测定疣清颗粒中黄芪甲苷含量。结果见表2。表2  疣清颗粒样品含量测定结果(略)
  
　　3  讨论

    疣清颗粒中白芍、香附薄层鉴别与阴性对照品相比无干扰,且重现性较好。香附薄层色谱鉴别参照有关文献报道,喷以2,4-二硝基苯肼乙醇试液,放置片刻后斑点显现不明显,根据试验结果,需放置1 h后斑点渐显,且在较长时间内斑点明显,不褪色。黄芪甲苷含量测定方法已报道有比色法、薄层扫描法、HPLC法等,其中HPLC法大多用紫外检测器于203 nm处检测。在预试验中,曾使用紫外检测器检测,结果干扰较大,基线漂移严重,测定结果不稳定,而改用RP-HPLC-ELSD进行检测,空白无干扰,结果准确可靠,重现性好,适合于疣清颗粒的质量控制。

【参考文献】
  　　[1] 郭 炜,袁志芳,张兰桐.归芍软胶囊质量标准研究[J].中成药,2006, 28(3)：351.

　　[2] 覃金玲,廖建维,冯灵平,等.逍遥妇乐颗粒质量标准研究[J].中药新药与临床药理,2006,17(2)：127.

　　[3] 黎俊华.复方止血颗粒的质量标准研究[J].中国药房,2006,17(8)：615.