维药罗勒提取物对脂多糖诱导RAW264.7细胞环氧化酶-2酶活性的影响

　　2  结果

　　2.1  维药罗勒5个提取部位的给药浓度的筛选由图1可看出，极性较大的OBL-正丁醇及OBL-乙醇总提取物对RAW264.7细胞的IC50值最大，对细胞的毒性较小；而OBL-氯仿的IC50值最小，对细胞有较大的毒性。后面的实验所采用的浓度均确保各部位药对细胞无毒性作用。

　　2.2  短时间干预对COX-2酶活性的影响MTT结果显示，与LPS处理组比较，各组细胞数均无统计学差异（P>0.05），表明各药对细胞均无毒性作用。
   
　　由表1得出，短时间药物干预后，维药罗勒各部位对PGE2均有抑制作用（P<0.05），其中醋酸乙酯及正丁醇部位对PGE2有较大的抑制作用。表明维药罗勒可直接抑制COX-2酶活性，醋酸乙酯及正丁醇部位是其有效部位群。表1  维药罗勒不同提取部位短时间干预对COX-2酶活性的影响（略）

　　2.3  长时间干预对COX-2酶活性的影响 MTT结果显示，与LPS处理组比较，各组细胞数均无统计学差异（P>0.05），表明各药对细胞均无毒性作用。
   
　　由表2可知，长时间药物干预后，维药罗勒各部位对PGE2均有抑制作用（P<0.05），其中醋酸乙酯及正丁醇部位对PGE2有较大的抑制作用。进一步证明乙酸乙酯及正丁醇部位是维药罗勒的有效部位群，维药罗勒可抑制COX-2酶活性。表2  维药罗勒不同提取部位长时间干预对COX-2酶活性的影响（略）

　　3  讨论
   
　　药物对由COX-2催化底物外源AA生成PGE2的抑制作用主要通过以下两种途径：①直接抑制COX-2酶活性，导致COX-2催化能力下降，使PGE2的合成减少。②抑制COX-2 mRNA，减少COX-2蛋白的生成，导致产物PGE2的合成减少。通过此次研究发现，先用LPS诱导RAW264.7细胞8 h后，再加入维药罗勒干预细胞30 min，所测得的细胞培养上清液中PGE2含量与不加药物的LPS诱导组比较，差别有显著性意义(P<0.05)，提示维药罗勒是以快调节的方式抑制COX-2催化PGE2的产生，即维药罗勒可直接影响COX-2酶活性。
   
　　维药罗勒各部分干预24 h与短时间干预对COX-2酶活性的抑制率大致一致，可初步推断，维药罗勒仅通过直接抑制COX-2酶活性达到抗炎的目的，确切的判断还需进一步对COX-2 mRNA或COX-2蛋白加以研究。
   
　　通过比较，发现维药罗勒醋酸乙酯及正丁醇部位对COX-2酶活性有较大的抑制作用，是维药罗勒产生抗炎作用的有效部位群，研究为以后有效成分的筛选提供了依据。

【参考文献】
  　　［1］新疆维吾尔自治区卫生厅．维吾尔药材标准 ［S］.乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社，1993：183.

　　［2］江国华，依巴代提，阿不力孜，等．维吾尔药罗勒对环氧化酶的影响 ［J］.亚太传统医药，2009，5 (1)：37.

　　［3］司徒镇强，吴军正.细胞培养 ［M］.西安：世界图书出版公司， 2004：250.

　　［4］Hu YF, Cheng GF. Establishment of screening models for selective cyclooxygenase-2 inhibitors ［J]. ActaPharm Sin , 2000 , 35(5): 343.