云南不同产地滇龙胆中龙胆苦苷的含量测定

　　2.6 重复性实验取同一样品，按“2.3”项下的方法平行制备6份供试品溶液，进行测定，计算龙胆苦苷质量分数，RSD为1.36%，表明该条件重复性良好。

　　2.7 稳定性实验将同一样品已制备好的供试品溶液在室温下放置0，2，4，6，8，10 h后分别进样10 μl进行测定，计算龙胆苦苷质量分数，RSD为1.43%，表明在本实验条件下供试品溶液在室温下放置10 h内基本稳定。

　　2.8 回收率实验取云南(通海)滇龙胆样品粉末9份各约0.25 g，精密称定，分别按其质量分数的80%，100%，120%精密加入龙胆苦苷对照品适量，按“2.3”项下的方法制备供试品溶液，进行测定，计算加样回收率，结果平均加样回收率为98.8%，RSD为1.86%，表明本法回收率较好。

　　2.9 样品测定取云南10个不同地域的滇龙胆样品的根，按“2.3”项下的方法制备供试品溶液，进行测定，以外标法计算龙胆苦苷的质量分数。结果见表1。表1 云南不同地域滇龙胆中龙胆苦苷的测定结果

　　3 讨论

　　3.1 提取条件的考察以龙胆苦苷为指标，采用正交实验考察了药材粒度、提取溶剂、溶剂用量、提取方法等因素对实验结果的影响，结果表明提取溶剂、加热回流对试验结果有显著影响，其余因素影响甚微，优选出的最佳提取条件为药材粉碎成中粉，加50倍量的甲醇超声处理15 min。

　　3.2 检测波长的选择参考《中国药典》2005年版Ⅰ部龙胆药材含量测定项下的检测波长为270 nm，故本实验检测波长仍选用270 nm。

　　3.3 流动相的考察根据文献报道[2～4]，目前测定龙胆苦苷是HPLC方法，所采用流动相系统有甲醇-水，乙腈-水，甲醇-0.4%磷酸溶液等，再根据具体的仪器及色谱柱调节流动相比例，本实验参照《中国药典》2005年版Ⅰ部龙胆药材含量测定项下流动相系统，即：甲醇-水，并在此基础上进行适当调节，最终选择甲醇-水(20∶80)。

【参考文献】
  　[1] 吴征镒，周太炎，肖培根，等.新华本草纲要，第2册[M].上海：上海科学技术出版社，1991：392.

　　[2] 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部[S].北京：化学工业出版社，2005：64.

　　[3] 吴志平，张发成，毛志英.HPLC法测定骨刺消痛胶囊中龙胆苦苷的含量[J].药学与临床研究,2008，16(5)：408.

　　[4] 俞桂新， 王峥涛，董婷霞，等. 龙胆药材中龙胆苦苷的含量测定[J].上海中医药杂志，2005，39(11)：53.