药根碱的研究进展

              作者：王启龙，孙达，黄金文，金晟，张朝晖

【摘要】  药根碱(Jatrorrhizine)是从防己科(Menispermaceae)植物青牛胆Tinospora sagittata (Oliv.)Gagnep，毛茛科(Ranunculaceae)植物黄连Coptis chimensis Franch等植物中分离到的一种四氢异喹啉生物碱。文章综述了近年来药根碱的研究进展，包括其分布、检测方法、药理活性、及制剂应用等方面的内容，为进一步研究提供参考依据。

【关键词】  防己科; 毛茛科; 药根碱

　　药根碱(Jatrorrhizine)是从防己科(Menispermaceae)植物青牛胆Tinospora sagittata (Oliv.) Gagnep，毛茛科(Ranunculaceae)植物黄连Coptis chimensis Franch等植物中分离到的一种四氢异喹啉生物碱，其结构与小檗碱类似，具有解毒杀菌及降血糖等作用。近年来，不少药学工作者对药根碱进行了深入的研究，对其分离、含量测定、药理和代谢等多方面研究进行了报道。笔者系统总结了目前为止药根碱在资源、分析、药理等领域的研究进展，以期为广大同行提供借鉴。

　　1 药根碱的分布情况

　　药根碱分布于植物界的几十种植物中，主要在高等植物中，其中以双子叶植物为多，在地衣和苔藓类植物中，尚未发现药根碱。含药根碱较多的科有：毛茛科(Ranunculaceae)、小檗科(Berberidaceae)、防己科(Menispermaceae)、芸香科(Rutaceae)、罂粟科(Papaveraceae)、豆科(Leguminosae)等。同一科属或者亲缘相近的植物往往都会含有一定的药根碱，如毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch，三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao，云连Coptis teeta Wall，线萼黄连C.linearisepala T.Z.Wang et C.K.Hsieh，裂叶星果草Asteropyrum cavaleriei等，小檗科植物狭叶十大功劳Mahonia fortunei (Lindl.) Fedde，阔叶十大功劳Mahonia bealei (Fort.) Carr、安徽小檗Berberis anhweiensis Ahrendt，黑果小檗Berberis heteropoda Schtenk等，防己科植物青牛胆Tinospora sagittata (Oliv.)Gagnep，黄藤Daemonorops margaritae (Hance.) Becc等，芸香科植物川黄檗Phellodendron chinense Schneid，黄檗Phellodendron amurense Rupr等，以及罂粟科的苏元胡Corydalis humosa Migo等都含有药根碱。在地理上，这些植物一般分布在热带，亚热带地区[1～6]。

　　2 检测方法

　　2.1 高效液相色谱法在药根碱的定量研究过程中，高效液相色谱法是主要的定量分析方法。经过广大分析工作者的不断努力，探索出了多种合理的色谱条件，在这些条件下，不同单味药、复方药及配方颗粒中的药根碱能与其他成分得到很好的分离，为药材及制剂的质量评价提供了科学的依据。笔者总结了相关色谱条件。见表1。

　　2.2 薄层扫描法徐焱琛[12]等用薄层扫描法测定金果榄药材中盐酸药根碱含量，展开剂∶苯∶醋酸乙酯∶甲醇∶异丙醇∶浓氨试液(12∶6∶3∶3∶1);扫描条件：取已展开的药根碱标准对照品的薄层板，测定波长为365 nm，光束狭缝1. 25 mm ×1. 25 mm,灵敏度：中;扫面方式：反射式锯齿形扫描。结果表明，用薄层扫描法测定药根碱的含量，无需显色，直接利用其黄色斑点扫描，操作简便，准确度及稳定性均较好表1 药根碱液相色谱条件测定对象色谱柱流动相检测波长

　　/nm参考文献 黄檗皮KYA HIQ sil C18乙腈∶水为1∶1345 nm[7](1 000ml溶液中含磷酸二氢钾3.4 g及十二烷基磺酸钠1.7 g)黄柏Kromasil-C18甲醇-乙腈-0.1mol·L-1230 nm[8]磷酸二氢钠-2g·L-1十二烷基硫酸钠-三乙胺(25∶25∶25∶25∶0.2)二仙汤Zorbax SB-C180.1%醋酸水溶液(A相)，345 nm[9]乙腈(B相);线性洗脱梯度：0～30 min、5%～30%B，30～35 min、30%B，35～50 min、30%～50%B，50～65 min、50%～55%B葛根芩连汤CAPCELL PAK 甲醇-水(25∶75) 250 nm[10]C18 UGl20双黄消炎片Diamonsil TM C18乙睛-0.1%磷酸345 nm[11](加三乙胺调pH至2.97)

　　2.3 毛细管电泳法王玉文[13]等用非水毛细管电泳法测定不同产地金果榄药材中药根碱含量。在石英毛细管(50.0 cm×75 μm)中，以75 mmol·L-1醋酸铵-0.1%冰醋酸甲醇溶液为电泳介质，运行电压15 kV，柱温25℃，检测波长265 nm。结果表明本实验方法快速简便，准确可靠，适用于金果榄等药材中药根碱的含量测定。

　　吴江明[14]等建立胶束毛细管电泳法同时测定黄连-吴茱萸药对中种生物碱的含量，熔融石英毛细管75 μm×74 cm;有效长度65 cm;以20 mmol-1的磷酸钠缓冲液为运行缓冲液;分离电压25 kV;进样压力2 kPa;进样时间3s;温度25℃ 测定波长为225 nm。结果表明该方法简便、准确可靠, 可用于黄连-吴茱英药对提取工艺及质量控制研究。

　　2.4 液相色谱串联电喷雾离子阱质谱法 韩凤梅[15]等建立液相色谱-串联电喷雾离子阱质谱法鉴定大鼠尿液中药根碱代谢物。色谱条件为Aichrom ReliAsil C18。不锈钢色谱柱(150 mm×2 mm ID，5 μm)，甲醇-甲酸水溶液(pH 3.5，70∶30)为流动相，流速0.2 ml·min-1，柱温25℃，进样量20 μl。质谱条件：ESI离子源，扫描范围m/z 100～1 000，离子源喷射电压4.5 kV，毛细管温度250℃，鞘气(N2)流速40个单位。采用自动进样器进样，正离子模式检测，一级质谱、二级质谱及三级质谱全扫描进行测定。结果表明，方法用于大鼠尿样中药根碱的代谢物研究不仅操作简单、快速，而且灵敏度高、专属性强。

　　3 药理活性

　　3.1 抑菌作用 杨勇等[16]对黄连中4种生物碱成分进行了抑菌作用研究，以从石柱黄连中提取的药根碱等4种生物碱为实验药物，采用抑菌圈实验法，在2 000 μg/ml药液浓度下对常见的19种微生物进行了药物敏感性试验，并通过比浊法对敏感菌的最小抑菌浓度(MIC)进行了检测。结果表明，药根碱等4种生物碱具有抗菌活性，抑菌谱相同，但抑菌活性有较大差异;4种黄连生物碱对耐药金葡菌的耐药性具有消除作用。

　　3.2 抗肿瘤作用顾关云等[17]研究了药根碱对P388白血病细胞系具细胞毒活性，研究结果表明药根碱的细胞毒性作用明显，ED50为2 μg/ml。

　　陈超[18]等研究药根碱、巴马汀、尖刺碱等对小鼠腹水癌细胞的抑制作用，研究发现药根碱、巴马汀、尖刺碱等对小鼠腹水癌细胞对氧的摄取作用有强烈的抑制作用，还发现药根碱、巴马汀、尖刺碱等对大鼠W256肿瘤系统有明显的抑制作用。

　　3.3 降血糖作用 付燕等[19]研究了黄连中药根碱的降血糖作用，并研究了药根碱、小檗碱、黄连煎剂及模拟方对小鼠血糖水平的影响，小鼠ip四氧嘧啶制备糖尿病模型，模型小鼠和正常小鼠均ig给予不同剂量药根碱、小檗碱、黄连煎剂及模拟方，葡萄糖氧化酶法测定血糖。结果表明药根碱具有降血糖作用，且同剂量下作用强于小檗碱，另外以天然成分比例配伍药根碱和小檗碱，未见明显协同或拮抗作用。

　　俞森等[20]研究灌胃黄连水提物后，其中所含的小檗碱、黄连碱、表小檗碱、药根碱及巴马汀等5种小檗碱型生物碱在糖尿病模型大鼠和正常大鼠体内的药动学行为。采用腹腔注射链脲佐菌素诱发大鼠实验性糖尿病模型，与正常大鼠共同饲养6周后，灌胃给予黄连水提物，于给药后眼底静脉丛取血，分离血浆后以LC-MS方法同时测定血浆中小檗碱、黄连碱、小檗碱、药根碱和巴马汀的浓度，以DAS软件拟合求算相关药动学参数，结果表明糖尿病可能对5种生物碱在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程中一个或多个环节产生影响,提高了其体内生物利用度,有利于其治疗作用的发挥。

　　3.4 多药耐药逆转作用肿瘤多药耐药性(multidrug resistance,MDR)是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生耐药性的同时,对其他结构和作用机制完全不同的抗肿瘤药物产生交叉耐药的现象。李明等[21]对中药功劳木提取物对肿瘤MDR的逆转作用进行了研究，采用MTT法检测4种提取物的细胞毒性及其对阿霉素的增敏效果;罗丹明(Rh123)蓄积实验检测4种提取物对细胞内药物浓度及P-糖蛋白(P-gp)功能的影响;流式细胞仪检测4种提取物对耐药肿瘤细胞凋亡的影响。结果表明，中药功劳木的4种不同工艺提取物能够不同程度的逆转肿瘤细胞的MDR，抑制肿瘤细胞膜上P-gp的“药泵”功能,增加耐药细胞内药物浓度。

　　3.5 其他药理活性药根碱还具有其他方面的药理活性，例如：正性肌力作用，与其他药物相互作用，清除氧自由基作用，抗突变等多种生物活性。

　　4 制剂研究

　　过去对该药的制剂研究的比较集中在洗剂、汤剂这两中剂型，例如：

　　复方苦参洗剂是清华大学第一附属医院的外用纯中药医院制剂，君药是黄柏与苦参，该制剂具有清热解毒、燥湿止痒等功效，用于癣疮、湿疹、外阴疹痒等，已有多年的临床使用经验，疗效确切[22];复方二仙汤由温肾益精药仙茅、仙灵脾、巴戟天、当归和滋阴泻火药知母、黄柏6味药组成，具有温肾益精、滋阴降火的双重调节功能，临床上用于防治更年期综合征和骨质疏松症[23]，研究发现，二仙汤中知母黄酮及皂苷类化合物对成骨细胞具有显著的促进作用，显著降低去卵巢骨质疏松症大鼠的骨质丢失[24];黄连解毒汤由黄连、黄柏、黄芩、栀子组成，被视为清热解毒的代表方，具有泻火解毒之功效,主治一切实热火毒、三焦热盛之证[25]。

　　目前用于临床的含药根碱成分的药物剂型研究组要集中在片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊、注射剂等剂型方面，例如：

　　主要有双黄消炎片、交泰丸、黄连配方颗粒、益气止血颗粒、二妙丸、复方三黄注射剂等。