蛇床子总香豆素组分的含量测定

【摘要】  目的 建立蛇床子中总香豆素含量的测定方法。方法 以蛇床子素为对照品,采用紫外分光光度法测定蛇床子中总香豆素含量。结果 检测波长为320 nm,蛇床子素质量浓度在2.0～12.0 ?g/mL范围内与吸光度呈良好线性关系(r=0.999 5),平均回收率为99.39%(RSD=2.67%,n=6)。结论 本方法简便易行,结果稳定可靠,可用于蛇床子及其制剂的质量控制。

【关键词】  蛇床子;香豆素类;含量测定;紫外分光光度法

　　Abstract：Objective To establish the method for content determination of total coumarins in Fructus Cnidii. Methods The content of the total coumarins was determined by UV spectrophotometry. Results The optimal detective wavelength was 320 nm for the total coumarins. Satisfactroy linear relationship with the absorbability was achieved when the mass concentration of osthole was within the range of 2～12 ?g/mL (r=0.999 5). The average recovery rate was 99.39% (RSD=2.67%, n=6). Conclusion The method is simple, accurate and sensitive, and it can be used for the quality control of Fructus cnidii and its preparation.

　　Key words：Fructus cnidii;coumarins;content determination;spectrophotometry

　　蛇床子为伞形科蛇床属植物蛇床[Cnidium monnieri(L.) Cuss]的干燥成熟果实。其性温,味辛苦,有小毒,具有温肾壮阳、燥湿祛风、杀虫止痒等功效。现代研究表明,蛇床子含有数十种香豆素类化合物,其中以蛇床子素(Osthole)含量最高[1],具有抗诱变、抗肿瘤、抗心律失常、抗高血压、抗骨质疏松、抗炎镇痛等功效[2]。蛇床子素含量测定方法甚多,如薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法等,但色谱类方法对仪器设备要求高,难以在基层单位普及且操作不便,并仅能反映单一成分含量[3]。本试验以蛇床子素为对照品,用紫外分光光度法测定蛇床子中总香豆素含量,具有简单、方便之特点。

　　1 仪器与试药

　　蛇床子购自安徽亳州药材市场,经本院生药学教研室苏延友教授鉴定为伞形科植物蛇床的干燥成熟果实(Fructus Cnidii)。蛇床子素对照品(供含量测定用),中国药品生物制品检定所,批号110822-200305。甲醇为色谱纯,天津市永大化学试剂开发中心,批号20071011。UV-2450型紫外可见分光光度计,日本岛津;BS21S型精密电子天平,德国赛多利斯天平有限公司;中药粉碎机、离心机、干燥箱等均为国产仪器设备。

　　2 方法与结果

　　2.1 对照品溶液的制备

　　精密称取40 ℃减压干燥至恒重的蛇床子素对照品5 mg,置于25 mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,配制成200 ?g/mL的蛇床子素标准液备用。

　　2.2 供试品溶液的制备

　　精密称取蛇床子药材粉末0.5 g,置10 mL具塞试管中,加甲醇5 mL,室温放置过夜。在60 ℃水浴加热提取2 h,3 000 r/min离心15 min,取上清液;药渣加甲醇5 mL,再重复提取2次。合并3次上清液,转移至25 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,作为供试品溶液。

　　2.3 测定波长的选择

　　分别精确量取对照品溶液及供试品溶液各0.6 mL,置于10 mL量瓶中,加入甲醇至刻度,摇匀,在波长为200～400 nm范围内扫描,结果见图1。可知对照品溶液和供试品溶液均在315～325 nm范围内有明显吸收,吸收峰在320 nm附近,故选择320 nm作为测定波长。

　　2.4 标准曲线制作

　　分别精确吸取对照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL置于10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,蛇床子素浓度(C)分别为2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 ?g/mL,以甲醇为参比,在320 nm处分别测定其吸光度(A)。以浓度为纵坐标,吸光度为横坐标进行线性回归。线性方程为：C=0.289 1+14.483 7A (n=6,r=0.999 5)。结果表明,蛇床子素质量浓度在2.0～12.0 ?g/mL范围内呈良好线性关系。