HPLC法测定辣椒精中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量

来源:岁月联盟 作者:师伯省,祖丽红 时间:2015-05-19

【摘要】  目的 建立同时测定辣椒精中2个主要成分辣椒碱及二氢辣椒碱含量的测定方法。方法 采用高效液相色谱方法,C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),甲醇-水(70∶30)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm。结果 辣椒碱及二氢辣椒碱分别在1.955~7.820 μg(r=0.999 9)、2.709~7.224 μg(r=0.995 5)范围内呈良好线性关系,平均加样回收率分别为101.57%、108.87%。结论 该法简便,结果准确、可靠,可用于测定辣椒精中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量。

【关键词】  辣椒精;辣椒碱;二氢辣椒碱;高效液相色谱法;含量测定

  Abstract:Objective To establish an HPLC method to determine the two principal constituent - capsaicin and dihydrocapsaicin in general alkaloids of Capsaicin. Method The analysis was performed on C18 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm), with methanol-water (70∶30) as the mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection wavelength was set at 280 nm. Result The linear relationships of capsaicin and dihydrocapsaicin were within the range of 1.955~7.820 μg (r=0.999 9) and 2.709~7.224 μg (r=0.995 5), respectively. The average recoveries were 101.57% and 108.87%, respectively. Conclusion The method is convenient, the result is accurate and reliable, and can be used to determine the content of two principal constituent in general alkaloids of Capsaicin.

  Key words:general alkaloids of Capsaicin;capsaicin;dihydrocapsaicin;HPLC;content determination

  

  辣椒精为植物辣椒中经物理方法提练、精制而成,常用作镇痛、消炎、活血、冻伤、止痒、杀菌、戒毒、祛风湿、止痛、减肥。辣椒中的主要化学成分为辣椒碱和二氢辣椒碱,不同辣椒品种果实整体及不同部位中辣椒总碱的含量不同。为了建立辣椒有效成分质量控制标准,达到有效控制辣椒精质量的目的,本试验建立了高效液相色谱(HLPC)法测定辣椒精中主要成分辣椒碱及二氢辣椒碱的定量分析方法。该方法简便快速,分离度好,准确度高,可为辣椒精质量控制提供参考。

  1  仪器与试药

  LC-10AT vp plus高效液相色谱仪(日本岛津),SPD-10A vp plus检测器;AB265-s电子分析天平(METTLER瑞士);超声仪。

  辣椒碱、二氢辣椒碱对照品由美国Sigma公司提供;辣椒精油溶液样品(河南倍特生物科技有限公司,批号20090416)。甲醇为色谱纯,水为双蒸水(自制)。

  2  方法与结果

  2.1  色谱条件

  色谱柱为C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为甲醇-水(70∶30);流速为1.0 mL/min;柱温为25 ℃;检测波长为280 nm;进样量20 μL。在此条件下辣椒碱的保留时间为12.20 min,二氢辣椒碱的保留时间为16.52 min,能与其他成分很好分开。色谱图见图1。

  注:1.辣椒碱;2.二氢辣椒碱;A.辣椒碱对照品;B.二氢辣椒碱对照品;C.供试品 图1辣椒精HPLC图谱

  2.2  对照品溶液的制备

  分别精密称取辣椒碱和二氢辣椒碱粉末适量,分别置于10 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,配制成约含0.200 0 g/L的辣椒碱和二氢辣椒碱的对照品溶液,低温避光保存备用。

  2.3  供试品溶液的制备

  精密称取辣椒精油样品0.03 g,置100 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,以0.45 μm微孔滤膜滤过,即得。

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