HPLC法测定复方抗病毒口服液中绿原酸的含量

来源:岁月联盟 作者:唐德智 时间:2015-05-19

  2.6 线性关系考察

  精密吸取“2.2”项下对照品储备溶液0.5、1、3、5、7、9 mL,分别置10 mL棕色量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀。分取上述不同浓度对照品溶液10 μL注入液相色谱仪,记录峰面积。以进样量为横坐标,色谱峰面积为纵坐标,进行线性回归,回归方程为:Y=5.12×106X+7.63×103,r=0.999 9(n=6)。结果表明,绿原酸进样量在0.051~0.922 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

  2.7 精密度试验

  精密吸取对照品溶液10 μL,重复进样6次,测定绿原酸峰面积,结果RSD=0.32%,表明仪器精密度良好。

  2.8 稳定性试验

  取供试品溶液(批号051025),按上述色谱条件,分别于0、2、4、6、8、10 h进样1次,记录色谱峰面积,RSD=1.46%。表明供试品溶液在10 h内稳定。

  2.9 重复性试验

  取同一批号样品(批号051025),按供试品溶液的制备方法制备6份供试品溶液,分别测定,计算绿原酸含量,其平均含量为0.736 mg/mL,RSD=0.89%(n=6)。表明方法重复性良好。

  2.10 加样回收率试验

  精密量取已知含量的供试品(批号051025,绿原酸含量为0.736 mg/mL)溶液1.5 mL(共6份),分别精密加入一定量的绿原酸对照品,照“2.3”项下方法操作,测定并计算回收率。结果绿原酸平均回收率为99.04%,RSD=1.31%,结果见表1。表1 加样回收率试验结果

  2.11 样品测定

  取3批样品,分别按“2.3”项下的方法处理,取10 μL注入液相色谱仪,记录色谱图,另取对照品溶液同法测定,按外标法以峰面积计算样品中绿原酸的含量。结果见表2。表2 绿原酸含量测定结果

  3 讨论

  金银花味甘性寒,具有清热解毒的功效,为复方抗病毒口服液中君药。绿原酸为金银花中的主要有效成分之一,具有抗菌、抗病毒的生物活性。选择金银花中的绿原酸作为含量测定指标,可反映和控制本制剂的内在质量。

  试验中对复方抗病毒口服液提取溶剂进行了研究,分别以70%乙醇、50%甲醇、甲醇作为提取溶剂,制备供试品溶液。结果表明,以50%甲醇作为提取溶剂时样品中绿原酸含量最高,因此选用5O%甲醇为提取溶剂。绿原酸对照品溶液在自然光下稳定性较差,易产生分解,因此操作中应注意闭光,采用棕色量瓶。

  取绿原酸对照品溶液在200~400 nm波长范围内扫描,结果显示在327 nm波长处有最大吸收,故选择327 nm作为检测波长。本试验建立的方法简便,专属性及重复性好,结果准确可靠,可用于该制剂的质量控制及分析。

【参考文献】
   [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2005.152-153.

  [2] 张宪平,哈永红.HPLC测定羚贝止咳糖浆中绿原酸的含量[J].中国药师, 2008,11(3):326-327.

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