羟甲香豆素制剂溶出度测定方法的研究
【摘要】 目的 建立羟甲香豆素制剂的溶出度测定方法。 方法 依照《中国药典》(2005年版)附录溶出度项下第二法, 以硼酸缓冲液1 000 mL为溶出介质,转速为75 r·min-1；紫外分光光度法测定，测定波长360 nm。结果 30 min内产品的溶出率达到80%以上，辅料对主药测定无干扰，羟甲香豆素线性范围为2.000 2～10.001 0 μg·mL-1(r=0.999 9)，回收率为100.3% (RSD=0.8%,n=9)。结论 本法操作简便、准确可靠，填补了羟甲香豆素制剂质量标准的空白。
【关键词】 羟甲香豆素制剂 溶出量 紫外分光光度法
Abstract:Objective To develop a method for determination of dissolution of hymecromone preparation. Methods According to the dissolution test (Pharmacopoeia of the Peoples Republic of China (2005 Edition, volume 2, supplemental method 3 ), 1 000 mL boric acid buffer solution was selected as release medium, rotate speed was 75 r·min-1, and determined by UV with the detection wavelength at 360 nm. Results The dissolution rate of hymecromone preparation was over 80% in 30 min. The excipients did not interfere with the determination. The calibration curve was linear in the range of 2.000 2-10.001 0 μg·mL-1(r=0.999 9). The average recovery (n=9) was 100.3% (RSD=0.8%).Conclusions The method was simple, accurate and precise, and might be used in dissolution determienation of hymecromone preparation.
Key words:hymecromone preparation; dissolution; UV
羟甲香豆素(hymecromone)是香豆素衍生物，能松弛奥狄括约肌，具有较强的解痉、镇痛作用，同时也能温和、持续地促进胆汁分泌，加强胆囊收缩和抑菌作用，具有明显的利胆作用。中国药典2005年版收载了胶囊剂和片剂，但没有收载溶出度的测定方法［1］。目前国内未见有该药物的溶出度试验方法研究的文献报道。该药物水溶性差［2］，有必要制定其溶出度测定方法。本文按中国药典2010版的“溶出度及释放度应用指导原则”（草案）对羟甲香豆素制剂的溶出度试验进行了研究，建立了该制剂的溶出度测定方法，填补了该制剂质量标准的空白。
1 试药与仪器
1.1 试药 羟甲香豆素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100241200501），羟甲香豆素胶囊、羟甲香豆素片（均为国内厂家生产），水为纯化水，其他试剂均为分析纯。
1.2 仪器 ZRS8型智能溶出仪(天津大学无线电厂)；通用U1901紫外分光光度计。
2 溶出度测定方法的建立与结果
2.1 溶出介质选择 分别以质量分数0.1%吐温，pH7.4磷酸盐缓冲液（中国药典），硼酸缓冲液（12.37 g硼酸加14.91 g KCl，加水至1 000 mL，取此液50 mL，加0.2 mol/L NaOH 11.8 mL，加水至200 mL，用1 mol/L NaOH调节pH为8.6），0.5%十二烷基硫酸钠，3%十二烷基硫酸钠等溶剂作为溶出介质进行饱和度试验。以上介质加入羟甲香豆素原料，在37 ℃振摇20 h以上，取出放冷，滤过，取续滤液，参照英国药典2008版羟甲香豆素［3］下有关物质检查方法，用高效液相色谱法测定各介质中羟甲香豆素的含量。结果在3%十二烷基硫酸钠中羟甲香豆素的质量浓度最高（975.2 mg/L），在0.5%十二烷基硫酸钠中的质量浓度仅为335.0 mg/L。中国药典2010版的“溶出度及释放度应用指导原则”（草案）规定“十二烷基硫酸钠的浓度不超过0.5%”，因此弃用3%十二烷基硫酸钠，而选择非表面活性剂溶剂中饱和度较高的硼酸缓冲液（质量浓度500.4 mg/L）1 000 mL作为溶出介质。
2.2 溶出度测定
2.2.1 检测波长的确定 用硼酸缓冲液配制质量浓度为6 mg/L的羟甲香豆素对照溶液，按照中国药典2005年二部附录ⅣA在200～400 nm波长范围内进行扫描，结果羟甲香豆素在360 nm波长处有最大吸收。因此选定360 nm作为检测波长，测定质量浓度为6 mg/L，采用同时测定对照品溶液，计算得样品溶出量的方法。
2.2.2 线性关系试验 精密称取羟甲香豆素对照品适量，用介质溶解并稀释成每1 mL中含羟甲香豆素2.000 2～10.001 0 μg的5个溶液，依法测定，以吸光度为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=0.096 3x+0.001 8，r=0.999 9 (n=5)。
2.2.3 回收率试验 按羟甲香豆素标示量约50%、80%和100%配制样品，用介质制备回收溶液（各3份），依法测定，结果平均回收率为100.3%，RSD=0.8%（n=9)。
2.2.4 稳定性试验 取线性试验溶液3于0、2、4、18 h测定，结果平均吸光度为0.580 6，RSD=0.1%，表明溶液在18 h内测定稳定。
2.2.5 溶出方法及转速的选择 用浆法（75 r·min-1）和篮法（100 r·min-1），以硼酸缓冲液1 000 mL作为溶出介质，分别进行片剂和胶囊剂的溶出度试验，于45 min取样，经0.45 μm微孔滤膜过滤，用所选介质稀释，按“2.2.1”项下方法测定。结果见表1。
从表1结果可见，浆法溶出效果较篮法好。因此选用浆法（75 r·min-1）为溶出度试验方法。
表1 溶出方法及转速选择试验结果（略）
Table 1 Results of different dissolution methods and rotating speeds of dissolution test
2.2.6溶出取样时间及限度确定 按选定的溶出度试验方法，取本品片剂及胶囊剂各1批，分别在15、30、45、60 min（胶囊至90 min）取样,每次吸取溶液5 mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，用所选介质稀释，测定溶出量，同时立即在溶出杯中补充溶剂5 mL，结果见表2。