首乌愈瘫片质量标准研究
2.2.5标准曲线的制备精密称取80 ℃干燥至恒重的二苯乙烯苷对照品，加流动相制成二苯乙烯苷质量浓度为0.26 mg·mL-1的溶液，分别精密进样0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 μL。以二苯乙烯苷进样量(X)为横坐标，以相应的峰面积积分值(Y)为纵坐标进行线性回归,得回归方程Y=4.196×106X+2688×104，r=0.999 9。结果表明二苯乙烯苷进样量在0.052～0.260 μg范围内线性关系良好。
2.2.6精密度试验精密吸取质量浓度为0262 mg·mL-1的二苯乙烯苷对照品溶液0.5 μL，按“2.2.4”项下方法，连续测定5次，记录峰面积并计算其RSD值。结果峰面积积分值平均值为568 9862，RSD=0.68%(n=5)，表明仪器精密度良好。
2.2.7稳定性试验按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液(批号20030115)，分别于0、4、8、16、24 h进样0.5 μL，测定峰面积并计算其RSD值。结果峰面积积分值平均值为491 551，RSD=0.88%(n=5)，表明样品在24 h内基本稳定。
2.2.8重复性试验取同一批号的首乌愈瘫片样品(批号20030115)5份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，依法测定。结果首乌愈瘫片中二苯乙烯苷的平均含量为15.768 mg·片-1，RSD=1.71%(n=5)，表明该方法重复性良好。
2.2.9加样回收率试验取已知二苯乙烯苷含量的样品(批号20030115，二苯乙烯苷为15.768 mg·片-1)5份，每份约0.1 g，精密称定。分别精密加入二苯乙烯苷对照品甲醇溶液(二苯乙烯苷质量浓度为0.410 mg·mL-1)各10 mL，再精密加入甲醇20 mL，超声提取20 min，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足失去的重量，摇匀，滤过，取续滤液用微孔滤膜(045 μm)滤过，分别精密进样0.5 μL，测得回收率。结果见表1。表1加样回收率试验
2.2.10样品测定取首乌愈瘫片样品3批，按“22.2”项下方法处理后依法测定，计算样品中二苯乙烯苷的含量，结果见表2。表2样品含量测定
3讨论
3.1研究表明[1-6]，制何首乌与决明子所含的主要有效成分均为蒽醌类化合物，决明子中所含蒽醌类成分主要有大黄酚、大黄素甲醚、大黄素、决明苷等;而制何首乌中主要含大黄素甲醚、大黄素等，不含大黄酚，故选择对决明子中的大黄酚进行鉴别。
3.2样品采用甲醇提取、乙醚萃取后直接进样，结果样品色谱中成分较多，干扰严重。先后尝试用质量分数1%NaOH、1%Na2CO3、5%Na2CO3溶液进行洗涤，结果发现质量分数1%NaOH溶液可把大黄酚斑点一并洗去，质量分数1%Na2CO3溶液未去除干扰斑点，而质量分数5%Na2CO3溶液可去除干扰，且样品色谱中大黄酚斑点分离度好，故最终确定用质量分数5%Na2CO3溶液进行洗涤。
3.3本试验对首乌愈瘫片进行的TLC鉴别斑点清晰无干扰、重现性好;采用HPLC法测定首乌愈瘫片中二苯乙烯苷的含量,色谱峰分离效果良好、阴性对照无干扰,方法简便、可靠,可作为首乌愈瘫片的质量控制方法。
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