滤白红细胞与洗涤红细胞相关指标比较

【关键词】   白细胞   红细胞
        输血治疗是临床治疗主要手段之一，有时是不可替代的手段，便输血不良反应影响响应床救治效果的主要因素之一。目前已知非溶血性发热反热(FNHTR)、包括血小板输注无效在内的同种免疫、输血相关急性肺损伤(TA-ALI)、输血相关移植物抗宿主病(TA-GVHD)的发生与输人白细胞的方法有离心法去白膜法、洗涤法和白细胞滤器过滤法等，本文旨在观察滤自细胞红细胞和洗涤红细胞相关指标，为两种血液成分的临床应用提供参考。
材料与方法
        1  材料与设备
        一次性四联白细胞滤除采血袋为山东威高集团医用高分子制品股分有限公司产品，批号200607234：一次性五联MAP洗涤采血袋为长春泰尔茂医疗器具有限公司产品，批号20051019z；白细胞过滤温控设备为山东威高集团医用高分子制品股分有限公司产品；GZR-ⅡA型自动高频热合机为苏州市医用仪器厂产品；CP80MX型大容量低温离心机为日立集团产品；LDZ5-2型离心机为北京医用离心机厂产品；Thermo全波长酶标仪为上海热电科技仪器有限公司产品；sysmex血细胞计数仪为日本东亚公司产品等。
        2  试剂
        0.2％邻甲笨胺试剂为上海新亭化工试剂厂产品，批号20030401；1％过气化氢溶液为上海埃彼化学试剂有限公司产品，批号F20050228；2％冰乙酸溶液为上海埃彼化学试剂有限公司产品，批号 F20060210，血红蛋白标准液厦门市绿浪医疗器械有限公司产品，批号YZB0705-2005。
        3  滤白红细胞的制备
        a.先将低温操作柜控制在2～6℃，关闭过滤器下端与旁侧的管道夹，将血袋倒挂在白细胞过滤温控设备的挂钩上，打开采血袋下端的折通管和过滤器下端的管道夹，使血液靠自身重力，缓慢通过自细胞过滤器，流入血液转移袋，大约10～20分钟。b．关闭白细胞过滤器下端的管道夹，开启滤器旁侧的管道排气夹，轻轻挤压血液转移袋，将气体排人采血袋，关排气夹，开管道夹，用气体冲净滤器中残留血液。 c.3200转／分离心去除血小板和血浆，向剩余物中加入红细胞添加剂CPDA-1，即为滤白红细胞。抽取制备好的滤白红细胞60份，分别留取滤白前后的血液5ml左右，用血细胞计数仪对其计数，并把滤白后血液以2000转／分离心10分钟，分离上清1ml～30℃冰冻备用。
        4  洗涤红细胞的制备
        a.取联袋采集经离心后全血母袋置于分浆夹内，折断母袋上的易折件，将血浆分至②空转移袋中，并一同去除白膜(变可分次去除)，分浆毕将③空转移袋中洗涤液全部加入母袋中并充分混匀，分别用塑料夹片将①②袋上导管夹好。b．将混匀后的细胞洗涤袋进行离心。c．离心毕，取出红细胞母袋及血浆的②袋置于分浆夹内，打开②袋上夹子，将血浆分至③袋(视血浆清亮程度可于本次或后两次中热合去除血浆，操作时只是在③④⑤袋中转移)中，分毕用夹子夹好，再打开红细胞母袋上夹子，将上清液分至②袋中，分毕用夹子夹好，将④袋中洗涤液220g～230g加入母袋中并充分混匀，用夹片夹好导管。d．将混匀后的红细胞洗涤联袋进行离心。e．离心毕，取出红细胞母袋置于分浆夹内，打开红细胞母袋上夹子，将上清液分至②袋或④袋(预先将④袋中洗涤液倒入袋⑤中)中，分毕用夹子夹好，将④或⑤袋中洗涤液220g～230g加入母袋中并充分混匀，用夹片夹好导管。f.重复d、e。g．最后向洗涤三遍红细胞母袋中加入⑤袋中的红细胞保存添加剂100克，热合封口装有红细胞的袋中，即为制备的2单位MAP洗涤红细胞。抽取制备好的MAP洗涤红细胞60份，分别留取洗涤前后的血液5ml左右，用血细胞计数仪对其计数，并把洗涤后的血液以2000转／分离心10分钟，分离上清1ml～30℃冰冻备用。
        5  游离血红蛋白的测定
        取冰冻备用的滤白红细胞和洗涤红细胞上清在37℃水浴箱融化，吸取20μl。于上述务管中加入1.0m10.2％邻甲笨胺溶液，再加入1.0ml1％过氧化氢溶液，混匀放置10分钟，各管加入10ml2％冰乙酸溶液，于酶标仪设定波长为430mm，进行比色并计算其浓度。