富硒蛹虫草对小鼠降血脂和抗氧化作用的影响

               作者：钟鸣，高丹，胡昆，陈丽静，张丽，李浩戈，张月

【摘要】  目的探讨富硒蛹虫草的降血脂和抗氧化作用。方法昆明种雄性小鼠60只，随机分4组(n=15只/组)：正常对照组、高脂模型组、普通蛹虫草组、富硒蛹虫草组。用不同的饲料持续喂养5周，每周的固定时间称量小鼠体质量1次，第5周断头取血后解剖小鼠，检测血清总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肝组织谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量。结果富硒蛹虫草组与高脂模型组相比，T-CHO和TG的含量降低，HDL-C的含量升高，均达到了显著水平(P<0.05); LDL-C含量降低(P>0.05)；GSH-Px和SOD活性升高，MDA含量降低，均达到了显著水平(P<0.05)。并且富硒蛹虫草的降血脂与抗氧化作用均高于普通蛹虫草。结论富硒蛹虫草具有良好的降血脂和抗氧化作用。

【关键词】  蛹虫草； 硒； 降血脂； 抗氧化

The Effect of Selenium-enrich Cordyceps militaris on Hypolipidemic and Qnti-oxidant on Mice

　　Abstract：ObjectiveTo discuss the hypolipidemic and anti-oxidant effect of Se-enrich C.militaris. MethodsSixty kunming male mice were randomly assigned to four groups (n=15 in each group): base control group, high lipid model group, ordinary C.militaris group, Se-enrich C.militaris group. With different feed continuous feeding for five weeks, the body weights of mice were weighed at fixed-time weekly. In the fifth week, the mice were decapitated after taking out the blood from mice. The total cholesterol(T-CHO), triglyeride(TG), high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C), low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C) of serum and the glutathione peroxidase(GSH-Px), superoxide dismutase(SOD), malondialdehyde(MDA) of liver tissue were measured. ResultsCompared Se-enrich C.militaris group to high lipid model group, T-CHO and TG content decreased, HDL-C content increased to significant levels (P<0.05); LDL-C content decreased(P>0.05). GSH-Px and SOD activity increased, MDA content decreased to a significant level (P<0.05). And Se-enrich C.militaris of hypolipidemic and anti-oxidant were higher than ordinary C.militaris. ConclusionSe-enrich C.militaris has good hypolipidemic and anti-oxidant effect.

　　Key words：Cordyceps militaris (Fr.) Link;   Selenium;   Hypolipidemic;   Anti-oxidant

    硒是目前已知的14种人体必需的微量元素之一，被科学家誉为“生命的火种”“抗癌之王”［1］。研究表明，人类心血管疾病、艾滋病、肿瘤、高血压病、糖尿病、肺部疾病等均与硒缺乏有关［2～6］。蛹虫草作为食药两用真菌，以其降压、降脂、抗疲劳、抗衰老等作用而备受人们的青睐［7］。蛹虫草对于某些微量元素特别是硒具有高度的富集作用，并把无机硒转化为有机硒，生物源有机硒以其吸收利用率高、毒副作用小等特点优于无机硒，有利于人体摄入［8，9］。因而可以采用现代发酵工程手段，将无机硒在其菌丝中转化为有机硒，融蛹虫草和有机硒之长，将具有更高的药用价值和经济价值。本实验采用高脂膳食诱导小鼠高血脂症模型，富硒蛹虫草是蛹虫草在加硒深层培养中得到的，通过与普通蛹虫草对比，探索富硒蛹虫草对小鼠降血脂和抗氧化作用的影响，为富硒蛹虫草的进一步开发应用提供理论依据。

　　1　材料

　　1.1  菌种

　　普通蛹虫草和富硒蛹虫草（硒添加量为6.4 mg/kg）由沈阳农业大学蛹虫草栽培基地提供。

　　1.2 动物及处理

　　选择体质量（20±2）g的昆明种雄性小鼠60只，随机分4组，每组15只。正常对照组：喂饲基础饲料；高脂模型组：喂饲高脂饲料：胆固醇1%，猪油5%，胆盐0.25%，基础饲料92.75%；普通蛹虫草组：应用胆固醇1%，猪油5%，胆盐0.25%，普通蛹虫草1%，基础饲料92.75%；富硒蛹虫草组：应用胆固醇1%，猪油5%，胆盐0.25%，富硒蛹虫草1%，基础饲料92.75%。小鼠及饲料均购自沈阳药科大学实验动物中心。各组小鼠自由饮食，动物房室温控制在21～24℃。

　　2方法

　　2.1 有效成分测定

　　蛋白质含量测定采用Folin-酚试剂法（Lowry法），多糖含量测定采用苯酚-硫酸法［10］，硒含量测定采用DAN荧光法（GB/T12399），虫草酸含量测定采用分光光度法［11］，腺苷含量测定采用薄层紫外分光光度法［12］。

　　2.2 小鼠体质量的测定  

　　在每周的固定时间用电子天平测量并记录各组小鼠的体质量。

　　2.3 样品的采集

　　2.3.1 小鼠血清的制备

　　用不同的饲料喂养5周后，断头取血，采血后立即放入装血样的试管中，放入37℃恒温箱中静置3 h，之后在4℃下1 500 r/min离心15 min，离心后血清分装贮存于4℃冰箱中待分析。

　　2.3.2 小鼠肝组织匀浆的制备

　　小鼠处死后，解剖取出肝组织在冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，用灭菌后的生理盐水做匀浆缓冲液以1∶9(W/V)经玻璃匀浆器在冰浴上进行研磨匀浆，制得肝匀浆液。4℃下3 000 r/min离心10 min，取上清液。贮存于4℃冰箱中待分析。

　　2.4 血脂指标的测定

　　总胆固醇(T-CHO)的测定：CHOD-PAP法［13］。甘油三酯(TG)的测定：GPO-PAP法［14］。低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的测定：PVS沉淀法［15］。高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的测定：PTA-Mg2+法［16］。

　　2.5 抗氧化指标的测定

　　谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的测定：二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）显色法［17］。超氧化物歧化酶(SOD)的测定：黄嘌呤氧化酶法［18］。丙二醛(MDA)的测定：硫代巴比妥酸(TCA)法［19］。

　　2.6 统计学处理应用SPSS12.0软件ONE-WAY进行方差分析。