国产α
作者：张学平，杜刚，张萍，阿依古力
【关键词】 α
［摘 要］ 目的：评价并引进贝克曼原装α羟丁酸脱氢酶(αHBDH)的国产替代测定方法。方法：采用全自动生化分析仪对αHBDH的国产测定方法进行临床化学检验的方法学评价。结果：该法有良好的线性关系：两种含αHBDH高、低标本，批内、批间CV分别为6.2％、6.9％和4.9%、5.4%；与原装测定方法有良好的相关关系：该法不受溶血、脂血、高胆红素的影响，P>0.05。结论：该法稳定、可靠、与原装试剂相关性良好，可以替代原装进口试剂。
［关键词］ α羟丁酸脱氢酶；国产试剂；评价
A Method Estimation on the Domestically Produced αHBDH Reagent
Abstract：Objective To appraise and introduce the domestically produced αHydroxybutyrate Dehydrogenase (αHBDH)kit to substitute the beckman original reagent.Methods Use the automatic biochemistry analyzer to carry on the clinical chemistry appraisal on the domestically produced αHBDH reagent.Results This method has the good linear relations;the introassay CVs and interassay CVs of two kinds of specimen contain αHBDH be high and low were 6.2%，6.9% and 4.9%，5.4% respectively，there is a good correlation between the beckman original reagent and domestically produced regent.There are no significantly different results of αHBDH concentration in the serum with high TG，Hb，bilirubin level in this method.P>0.05.Conclusion This method is stable reliable corelational with the original reagent，may substitute the original import reagent.
Key words:αHydroxybutyrate Dehydrogenase;Domestically produces reagent;Appraise
美国贝克曼全自动生化分析仪上配套使用的(α羟丁酸脱氢酶（αHBDH)原装试剂己停产，寻找替代的国产试剂就提上了工作日程，我们对四川迈克公司生产的αHBDH试剂(以下简称国产试剂)和以原装进口配套试剂(以下简称进口试剂)为参照进行了评价试验，现报道如下。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 试剂 国产αHBDH试剂盒购自四川迈克科技有限公司(LOT 0605031)，进口试剂为美国贝克曼进口配套试剂盒(LOT NO 310281)，质控品RANDOX(LOT350 un／2)购自北京朗道医疗用品有限公司［1］。
1.1.2 仪器 美国贝克曼全自动生化分析仪CX9型。
1.2 方法
1.2.1 国产试剂 测定原理是α酮丁酸和NADH在αHBDH的作用下生成α羟丁酸和NAD+，在340 nm测定吸光度变化从而测得αHBDH的活性［1］。贝克曼CX9型αHBDH国产试剂的主要参数如下：Reaction type：Rate 1，Reaction Direction：Decresing，Primary wavelength 340 nm，Calculation Factor：7315，Secondary wavelength 410 nm，Sample volume 12 μl，Primary lnject Regent：A 240 μl，B 60 μl，Reagent Blank start read 228，End read292，Reaction start read 100，End read 220。
1.2.2 进口试剂 按照试剂说明书进行配制［2］，按仪器操作指南进行测定［2］。
2 结果
2.1 线性关系 取一用原装试剂测定结果为1 480 U／L的标本，用去离子水进行稀释，使之含原血清分别为1/5、2／5、3／5、4／5及原血清，用国产法测定，在1 483 U／l范围内线性关系良好，γ=0.993 1。
2.2 精密度
2.2.1 批内变异 取质控品和标本各一份，用国产法各测定αHBDH 10次，均值分别为166 U/L和658 U/L，其CV分别为4.9%和6.2％。
2.2.2 批间变异 取质控品和混合血清标本各一份，分装冷冻，每天取出一份用直接法测定，连续10 d，浓度均值分别为167 U/L和660 U/L；批间CV分别为5.4%和6.9％。
2.3 方法比较 取质控品用进口试剂和国产试剂同时各测定20次，取用原装试剂己检测完毕含不同浓度的αHBDH临床送检标本共50份(最高1 031 U/L，最低89 U／L)，用两种方法再同时测定，结果如表1。
表1 两种方法测定αHBDH的比较（略）
注：本文均用EXCEL进行资料的统计学处理。
2.4 干扰试验
2.4.1 乳糜血清的影响 用20%的脂肪乳注射液加入5管分装的血清标本，用国产试剂测定，结果如表2。
表2 血清TG与αHBDH的关系（略）
2.4.2 溶血标本的测定 在一正常标本中加入100 g／L的血红蛋白标准液。使血清含血红蛋白为0.5 g/L和1.0 g/L，用国产试剂测定3次后取均值，结果分别为292 μ／L、295 μ/L。
2.4.3 总胆红素的影响［3］ 取一总胆红素浓度为160 μmol／L的标准液加入血清，用国产试剂测定，总胆红素在74.1 μmol／L以内时总胆红素与αHBDH含量的相关系数γ=0.303 1，P>0.05。
3 讨论
αHBDH能还原α酮丁酸为α羟丁酸，它的性质还是一个有争论的问题，Welkinson和Rosalki用电泳法和沉淀技术证实在缺乏乳酸脱氢酶(LDH)时是不能检出αHBDH活力的。但无论性质如何，αHBDH升高说明乳酸脱氢酶的同工酶LDH1和LDH2比例增加；肝脏和心脏的疾病均能引起LDH的升高，而αHBDH活性在肝脏疾病时则无明显变化，心脏病患者则出现明显升高，特别是αHBDH在急性心肌梗死时显著升高，α羟丁酸脱氢酶与乳酸脱氢酶的比例有助于诊断心脏病和肝病，所以α羟丁酸脱氢酶的测定有一定的临床意义［3］。
本文产试剂在αHBDH小于1 483μ／L时有良好的线性关系(γ=0.993 1)；用质控品和标本做精密度试验，本法批内、批间CV分别为6.2％、6.9%和4.9％、5.4%；和原装试剂进行对比实验，在干扰试验方面：本法在TG<12.56 mmol/L，Hb<1.0 g/L、总胆红素<74.1 μmol/L时不受TG、Hb、总胆红素的影响。
经本文证实，国产αHBDH试剂完全可替代贝克曼进口配套试剂应用于BECKMAN全自动生化分析仪CX9型上。
：
［1］ 四川迈克科技有限责任公司.α羟丁酸脱氢酶DGKC法检测说明书.
［2］ 美国，贝克曼.α羟丁酸脱氢酶试剂说明书.
［3］ 王继贵.临床生化检验［M］.第2版.湖南：湖南技术出版社，1996：419420.
