氰戊菊脂与辛硫磷混合杀虫剂对小鼠骨髓细胞染色体畸变率的影响

【摘要】  目的：探讨氰戊菊脂与辛硫磷混合杀虫剂（农满忆）对小鼠骨髓细胞染色体畸变率的影响情况。方法：小鼠染毒该杀虫剂后，取其骨髓细胞进行染色体畸变的检测。结果：杀虫剂高、中剂量组染色体畸变率分别为4.2%和2.6%，与阴性对照组（0.5%）比较差异有显著性（P<0.05），剂量组之间染色体畸变率差异也有显著性。结论：该杀虫剂在一定剂量下能使小鼠骨髓细胞染色体畸变率增加，主要引起染色体结构畸变，提示它是一种可能致突变物。

【关键词】  氰戊菊脂；辛硫磷；淋巴细胞；染色体畸变

    近年来，杀虫剂的使用对环境的危害已引起世界范围的广大关注。杀虫剂若使用不当，会产生人畜中毒、环境污染、生态失衡等弊端。大多数杀虫剂是作用于神经系统的毒物，某些杀虫剂对人和动物的遗传和生殖造成影响，产生畸形和引起癌症等方面的毒作用［1～4］。杀虫剂农满忆是我国南方农田中使用很普遍的杀虫剂，该杀虫剂由氰戊菊脂与辛硫磷混合而成。笔者为研究该杀虫剂的遗传毒性，对小鼠进行亚急性染毒农满忆后，检测小鼠骨髓淋巴细胞染色体畸变率是否改变，为其中毒预防及安全性评价提供。

　　1  材料和方法

　　1.1  材料

　　1.1.1  受试物 

　　农满忆(纯度为50%，市售)。辛硫磷：大鼠急性口服LD50雄2 170.0 mg/kg，雌1 976.0 mg/kg。氰戊菊脂(fenvalerate)：急性经口服LD50大鼠为451.0 mg/kg。

　　1.1.2  实验动物 

　　取健康昆明种小鼠50只, 平均体重为25.73 g，雌、雄各半。动物由湖南农业大学实验动物中心提供，合格证号：015 。

　　1.1.3  动物处理 

　　将小鼠随机分为5组，每组10只，雌雄各半。根据LD50及其纯度，并结合预实验结果，将农满忆高、中、低三个染毒组的剂量分别设计为120.0 mg/kg、60.0 mg/kg、30.0 mg/kg；另设蒸馏水作阴性对照；剂量组及阴性对照组，采用灌胃法染毒，灌胃容量为0.2 ml/10 g，连续5 d；阳性对照组采用40.0 mg/kg环磷酰胺，分别于第1天、第3天、第5天，腹腔注射染毒，注射容量为0.1 ml/10 g。

　　1.2  方法

　　1.2.1  实验方法 

　　各组随机取雌雄小鼠各5只，在取样前4 h腹腔注射秋水仙素（5.0 mg/kg）。脱颈椎处死动物后，取出双侧股骨，用PBS冲骨髓于离心管中。再按照以下操作步骤进行：离心→0.075 mol/L KCl低渗→2∶1（甲醇：冰醋酸）固定液固定2次→制片→10%吉姆萨染色。最后用双盲法在油镜下每个试验组观察至少300个中期分裂相好的细胞染色体，记录所出现的染色体畸变细胞数，并畸变率（%）。

　　1.2.2  统计方法 

　　研究结果采用SPSS 10.5软件包处理。染色体畸变率采用χ2检验，α=0.05。

　　2  结果

    结果见表1，从表中可看出：总体染色体畸变率经χ2检验，总体差异有显著性（P＜0.01）。农满忆高剂量组的染色体畸变率为最高，而阴性对照组最低。其中低剂量组畸变率与阴性组比较，差异无显著性（P＞0.05）。中剂量组及高剂量组畸变率与阴性组比较，差异均有显著性（P＜0.05）。染色体畸变率随剂量的增加而增加，存在着剂量-效应关系（r=0.930 0）。从图片结果可见染色体畸变类型有染色体裂隙、断裂、缺失、环状染色体等，该试验结果显示杀虫剂农满忆在本次研究剂量内能导致小鼠体细胞染色体畸变率增加。表1  小鼠骨髓细胞染色体畸变率情况（略）注：与阴性对照组比较：*P＜0.05；**P＜0.01。①与低剂量组比较：△P＜0.05；△△P＜0.01。②与中剂量组比较：aP＜0.05；bP＜0.01。

　　3  讨论

    为提高杀虫效果，混合杀虫剂在我国农田中使用非常广泛，由此也给人类健康带来一些负面影响。混合杀虫剂的毒性研究也成为当今科研的热门话题，因此研究混合杀虫剂的遗传毒性有一定的实际意义［5～8］。染色体畸变率的研究也是其遗传毒性的研究之一，为研究该混合杀虫剂的遗传毒性，本人已做过其他相关研究，发现其对小鼠及大鼠骨髓细胞微核率、对小鼠外周血细胞周期及其对雄性小鼠精子畸形率等均有一定的影响。本次是研究其对小鼠骨髓细胞染色体畸变率的影响。染色体畸变实验与微核有较好的相关性，常用于遗传毒实验。染色体畸变的原理与微核形成的原理相似，但观察的终点不同，染色体只能在细胞有丝分裂中期进行观察和分析。染色体的畸变是细胞遗传物质损伤的一种表现，主要包括数目畸变和结构畸变，结构畸变主要有缺失、重复、倒位、易位等方式。本次研究结果可以看出：杀虫剂农满忆能诱导骨髓细胞染色体畸变率增加，且产生多种结构畸变类型，是一种潜在的致突变剂，提示人们在使用中要多注意防护。

【】
  　　［1］中华人民共和国农业部农药检定所主编.农药登记公告汇编［M］.第1版.北京:农业大学,1999：318.

　　［2］张琉琪，陈叙龙.环境生物毒理学［M］.第1版.天津：天津大学出版社，1993：102?114.

　　［3］郑志仁,王炳森,蒋学之,等.环境病理学［M］.山东:山东技术出版社,1990：79?87.

　　［4］Makellar Qa,Benchaoui HA.Avermectins and Milbering cins［J］.Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics,1996，19:331?351.

　　［5］梁丽燕,陈润涛.溴氰菊酯毒性与致突变性的研究［J］.中国职业医学，2000,27(2):31?33.

　　［6］吴又桐,石年.溴氰菊酯对原代培养大鼠星形胶质细胞存活率和胞内游离钙浓度的影响［J］.中华劳动卫生职业病杂志,2003,21(3):194?196.

　　［7］李海峰,李五福.高效氯氰菊酯对雄兔睾丸及精液的生殖毒性研究［J］.环境与职业医学，2006,23(3):246?248.

　　［8］龚伟,张习春.氰戊菊酯对小鼠精子体外获能的影响及机制探讨［J］.环境与职业医学，2004，21(2)：84?89.