肝细胞癌直方图血流定量分析参数与肿瘤血管生成的相关性研究
【摘要】 目的：研究肝细胞癌三维彩色直方图血流定量分析参数与肿瘤微血管密度(microvessel density, MVD)、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的相关性。方法：应用GE voluson 730三维彩色超声仪对29例肝细胞癌进行检查，采用三维彩色直方图技术定量测量血管指数（Vascularization index,VI），术后测定标本的免疫组化参数MVD、VEGF的表达。结果：肝细胞癌VI与免疫组化参数MVD、VEGF成线性正相关。结论：三维彩色直方图血流定量分析参数对于评价肿瘤血管生成状况有意义。
【关键词】 肝细胞癌 直方图 肿瘤血管
The Correlation Between the Parameters of Three?dimensional Color Histogram
and Vasularation of Tumor in Hepatocellular Carcinoma
Absterct :Objective To investigate the correlation between the parameters of three?dimensional color histogram and microvessel density(MVD) 、vascular endothelial growth factor(VEGF）in hepatocellular carcinoma.Methtods 29 patients with HCC was examind by GE voluson 730 three?dimensional color ultrasound system, VI was measured by using three?dimensional color histogram technique，MVD and VEGF was measured postoperation.Results There was significant positive linear correlation between VI and MVD、VEGF.Conclusion The parameters of three?dimensional color histogram is significative to evaluate the angiogenesis in hepatocellular carcinoma.
Key words:Hepatocellular carcinoma; Three?dimensional; Vasularation of tumor
肿瘤血管生成在肿瘤发生、过程中起重要作用，本研究采用三维彩色直方图技术定量测量肿瘤血管指数，探讨应用影像学方法评价肿瘤血管生成的价值。
1 资料与方法
1.1 研究对象
选取我院住院拟手术的肝细胞癌患者29例，其中男26例，女3例，年龄36岁～78岁，所有病例均经手术及病理证实。
1.2 仪器与方法
采用GE Voluson730三维超声成像系统，选用3 MHz～5 MHz腹部容积探头，首先对病灶进行二维彩色血管能量成像，启动3D程序，调整取样框，进行三维彩色血管能量成像，选择虚拟组织机辅助分析程序，以6°步进描记肿物轮廓，选择三维彩色直方图程序，系统自动计算血管指数Ⅵ。
术后标本行CD34、VEGF免疫组织化学染色，采用常规SP法。MVD测定采用Weidner报告方法：被抗CD34 抗体染成棕黄色的内皮细胞或内皮细胞簇,只要与其他结缔组织成分有明显区别,无论其有无管腔，均作为一个微血管计数，在40倍光镜下扫查整个切片，寻找血管高密度区，再在400倍视野下记数三个视野被染成棕黄色的血管数，取其平均值作为微血管密度。VEGF 染色阳性判断标准:凡细胞质、细胞膜出现棕黄色颗粒者为VEGF 染色阳性。连续观察和计算3个高倍视野下的阳性细胞数,取其平均值作为VEGF 表达值。
应用SPSS11.0进行统计学分析，VI与MVD、VEGF进行一元线形回归分析。
2 结果
三维彩色血管能量成像能够直观显示肿瘤血管分支及空间分布状况，三维彩色直方图测定肿瘤血管指数VI为2.01～8.10，平均值为4.83±6.70。经CD34抗体免疫组织化学染色标记微血管后,MVD 为(25.71～116.28)/400倍视野,平均为(62.75 ±18.71) / 400倍视野。VEGF 表达为(18.72～61.86)/高倍镜视野,平均为(38.21 ±11.32) / 高倍镜视野。
Ⅵ与MVD、VEGF呈线性正相关，相关系数分别为：0.61、0.56（P<0.05）
3 讨论
肝细胞癌是富血供的肿瘤,实体肿瘤的生长和转移有赖于新生血管的形成, 运用特异性抗体标记肿瘤组织血管内皮细胞计数MVD ，被认为是能反映肿瘤血管生成的一个重要的指标，其中CD34 被认为是较特异和敏感的肿瘤生长中血管内皮表面标志，其表达与肿瘤血管内皮细胞的增殖、移行有关［1］。血管内皮生长因子VEGF是目前研究最多，作用最强的血管生成诱导因子，直接刺激内皮细胞分裂增殖,最直接参与诱导肿瘤血管生成［2］，与肿瘤血管生成及肿瘤的生长、侵袭、远处转移均有密切的关系［3］。
MVD 与VEGF是在取得术后离体标本或活检组织的基础上进行,无法对肿瘤血管的总体情况进行评价,因此,寻找在体评价肿瘤血管的生成情况,对术前评估抗肿瘤血管生成状况具有重要的临床意义。三维彩色血管能量成像为肿瘤血管生成的在体评价提供了可能。三维彩色血管能量成像可直观、完整显示肿瘤血管形态和空间分布，结合三维彩色直方图技术能够定量分析组织内的血管［4］。
本研究结果显示三维直方图测定肿瘤血管的VI和免疫组化测定的MVD、VEGF间呈线性正相关,VI高的肿瘤组织中MVD 及VEGF表达高,说明VI能够检测肿瘤病灶内的血管化程度,准确地反映MVD、VEGF 的表达,故可作为反映肿瘤血管生成动态变化的一个指标,并将有助估测以VEGF为靶点的抗血管生成效果。
【】
［1］Kimura H, N akajina T, Kagawa K, et al. Angiogenesis in hepatocellular carcinoma as evaluated by CD34 immunohistochemistry［J］. Liver, 1998, 18: 14?19.
［2］曹斌,陈孝平,朱鹏,等. 肝细胞肝癌中COX?2 、VEGF 表达与肿瘤血管生成及其临床病理意义［J］. 肝胆外科杂志,2005 ,14 (2) :150.
［3］Gerber HP , Ferrara N. The role of VEGF in normal and neoplasmtic hematopoiesis［J］.J Mol Med，2003，81(1) :20?31.
［4］Edwin F, Walter E, Dennis E. Quantified power Doppler US of tumor blood flow correlates with microscopic quantification of tumor blood vessels［J］.Radiology,2001，219(1):166?170.
