MMP?26和ER在子宫内膜样腺癌中的表达及相关分析

【摘要】  目的：研究基质金属蛋白酶?26（MMP?26）和雌激素受体（ER）在子宫内膜样腺癌组织中的表达，探讨其与子宫内膜样腺癌浸润转移的关系。方法：应用免疫组化S?P法检测40例正常子宫内膜组织和50例子宫内膜样腺癌组织中MMP?26和ER的表达情况。结果：MMP?26和ER在正常子宫内膜和子宫内膜样腺癌组织中均有阳性表达。在子宫内膜样腺癌组织中MMP?26和ER阳性表达率明显低于正常子宫内膜组织，差异具有显著性(P<0.05)。二者的表达强度均与组织学病理分级、手术?病理分期、肌层浸润程度和淋巴结转移有关。在子宫内膜样腺癌组织中， MMP?26的表达与ER的表达则存在正相关（r = 0.844；P = 0.017）。结论： MMP?26和ER在子宫内膜癌组织中呈低表达，其表达随病理分级的升高、肌层浸润程度的加深及有淋巴结的转移而下降，且二者的表达呈正相关。联合检测二者在子宫内膜癌组织中的表达可为子宫内膜癌的早期诊断、指导临床及预后判断提供一些新的思路。

【关键词】  子宫内膜样腺癌； 基质金属蛋白酶?26； 雌激素受体； 免疫组织化学

    子宫内膜癌(carcinoma of the endometrium) 为女性生殖器三大恶性肿瘤之一，近年的发病率呈上升趋势。以来源于子宫内膜腺体的腺癌多见，故亦称子宫内膜腺癌（endometrial adenocarcinoma）。子宫内膜癌的发生、及浸润和转移是个多步骤、多因素的复杂过程。细胞外基质(extracellulor matrix,ECM)的降解是肿瘤侵袭正常组织和开始转移的重要信号和途径。在这一过程中，基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）起着极其重要的作用。本文将以正常子宫内膜组织为对照，对子宫内膜样腺癌组织中的MMP?26及雌激素受体(ER)的表达进行研究，以探讨其与内膜样腺癌浸润转移的关系，为进一步了解子宫内膜样腺癌的侵袭转移机制、指导临床治疗、判断预后提供一些依据。

　　1  资料和方法

　　1.1  一般资料 

　　收集我院病理科1996年7月到2006年7月手术切除经病理确诊的子宫内膜样腺癌存档蜡块组织50例，患者年龄31岁~72岁，平均年龄51岁。对照组标本40例，取同期因子宫脱垂手术切除子宫的正常内膜组织，其中增殖期16例、分泌期24例。患者平均年龄48岁。两组年龄比较差异无显著性（P>0.05）。

    所有组织标本均经病理证实，术前均未接受过放疗、化疗或激素治疗。子宫内膜样腺癌组织依照1988年FIGO手术?病理分期标准［1］进行病理分级和手术分期。组织学病理分级G1级18例、G2级21例、G3级11例；手术病理分期Ⅰ期23例、Ⅱ期17例、Ⅲ期10例；无肌层浸润16例、浅肌层浸润23例、深肌层浸润11例；无淋巴结转移41例，有淋巴结转移9例。

　　1.2  试剂与方法 

　　S?P免疫组化试剂盒及DAB酶底物显色剂等均购自上海晶美生物技术公司。小鼠抗人ER单克隆抗体购自上海长岛生物试剂有限公司；兔抗人MMP?26多克隆抗体为美国R&D Biotech产品；方法采用免疫组化（S?P）法。

　　1.3  结果判定 

　　每批试验均设立阳性及空白对照。用已知MMP?26表达阳性的肺癌组织切片及已知ER表达阳性的乳腺癌组织切片作阳性对照；用PBS代替一抗作空白对照。以细胞内出现黄色为阳性标记，采用显色强度结合阳性细胞百分率法判读结果［2］。据细胞内黄色的深浅分不显色、淡黄色、桔黄色和棕黄色，分别评0分、1分、2分、3分。随机选取5个高倍视野（400倍）计数细胞总数和阳性细胞个数，取平均百分率作为阳性细胞百分率。将阳性细胞的百分率分为四级，阳性细胞百分率<10%、10%~24%、25%~50%、>50%，分别评为0分、1分、2分、3分，二者评分相加作为该切片最终评分，将0分~1分、2分~3分、>3分，分别定为表达阴性、阳性、强阳性。

　　1.4  统计学处理 

　　计数资料进行χ2检验，检验效能α=0.05； 相关分析采用Spearman秩相关法。

　　2  结果

    MMP?26及ER在不同子宫内膜组织中均有阳性表达。MMP?26阳性信号为上皮和基质细胞的细胞浆内出现棕黄色颗粒，ER阳性信号为上皮或(和)基质细胞的胞核内出现棕黄色颗粒。阳性细胞呈局灶性或弥漫性分布。

　　2.1  MMP?26及ER在正常子宫内膜及内膜样腺癌组织中的表达 

　　在正常子宫内膜中，MMP?26和ER阳性表达率分别为65%、77.5%，与子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达率42%、52%相比差异均具有统计学意义(χ2=4.721、6.222；P=0.036、0.013)（见表1）。表1  MMP?26及ER在正常子宫内膜与内膜样腺癌组织中的表达n(略)

　　2.2  MMP?26和ER在不同子宫内膜样腺癌组织中的表达 

　　本实验结果显示， MMP?26及ER的表达与子宫内膜样腺癌的组织学病理分级、手术?病理分期、 肌层浸润程度和淋巴结转移有关。MMP?26与ER在子宫内膜样腺癌组织病理分级为G1中的阳性率（61.1％、72.2％）要高于G3（9.1％、18.2％；P=0.008、0.008）；手术?病理分期为Ⅰ期的阳性率（56.5％、69.6％）要高于Ⅲ期（0、10％；P＝0.002、0.002）；无肌层浸润的阳性率（62.5％、75％）要高于深肌层浸润（0、18.2％；P＝0.001、0.006）；无淋巴转移的阳性率（51.2％、61%）要高于有淋巴转移（0、11.1％；P＝0.006、0.009），各组比较差异均具有统计学意义（P<0.05）(见表2)。表2  MMP?26及ER在子宫内膜样腺癌组织中的表达  例(略)

　　2.3  子宫内膜样腺癌组织中MMP?26及ER间表达的相关性 

　　本实验研究发现，MMP?26与ER在子宫内膜样腺癌组织中的表达成正相关（r=0.844；P =0.017）。

　　3  讨论

　　3.1  MMP?26在子宫内膜样腺癌组织中的表达及临床意义 

　　MMP?26为基质溶解素?2，主要表达在上皮起源的肿瘤，如乳腺癌、肺癌、前列腺癌及子宫内膜癌［3］。近期的研究显示：MMP?26广泛表达于恶性肿瘤组织和肿瘤细胞株上，但不包括子宫内膜癌细胞株［4］。Pilka R等［5］研究认为：MMP?26在子宫内膜癌组织中的表达与癌组织的病理分级密切相关。本研究显示，MMP?26在正常子宫内膜及子宫内膜样腺癌组织中均有阳性表达。与正常子宫内膜的阳性率（65%）比较，MMP?26在内膜样腺癌组织中的阳性表达率明显降低（42%）,差异具有显著性（P=0.036）。且MMP?26在内膜样腺癌组织中的阳性表达率随组织病理分级的升高，肌层浸润程度的加深及有淋巴结的转移而呈下降趋势。我们推测：MMP?26在子宫内膜癌的发生、、侵袭和转移机制中可能通过雌激素的控制而发挥作用。但其具体的作用机制目前尚不完全明了，对此尚需进行进一步的研究。MMP?26也许可以作为子宫内膜样腺癌的一种新的肿瘤标志物。

　　3.2  ER在子宫内膜样腺癌组织中的表达及临床意义 

　　ER存在于激素的靶细胞表面，能与相应激素发生特异性结合而产生特异性生理或病理效应。目前已知，长期或大量的雌激素刺激致子宫内膜增殖过度是子宫内膜癌发生的主要原因。内膜癌组织中ER的表达与患者的效果和预后有关。大量研究表明：ER表达阳性患者的生存时间明显较ER阴性者长。Pozharisskii KM等［6］研究发现，内膜癌中ER的表达与组织分化、手术?病理分期、肌层浸润及淋巴转移有关。本研究结果显示，从正常子宫内膜到癌变的子宫内膜均有ER的阳性表达。与正常子宫内膜组织的阳性率（77.5%）比较，癌变子宫内膜的ER阳性表达率（52%）呈显著降低，差异具有显著性（P=0.013）。且ER的表达与组织学病理分级、手术?病理分期、肌层浸润及淋巴转移有关。由此提示：从正常子宫内膜到癌变的子宫内膜，ER含量逐渐递减，支持内膜癌可能为性激素依赖的观点。ER的表达受雌激素的影响和调控。其表达的下降与肿瘤恶性预后的增加有关。因此，ER表达的测定可成为子宫内膜癌临床指导激素治疗、观察疗效及判断预后的指标之一。

　　3.3  联合检测子宫内膜样腺癌组织中MMP?26及ER的意义 

　　本实验发现：MMP?26与ER在子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达呈正相关（r =0.844；P =0.017）。二者的表达均与临床病理指标密切相关，且表达方式相近。Pilka R等［5］曾研究发现MMP?26的启动子区域有潜在的雌激素应答元件。由此提示我们：在子宫内膜样腺癌组织中， MMP?26与ER存在有协同表达，二者的表达均受雌激素的影响和调控。其表达越低，肿瘤的恶性程度可能越高，患者预后可能越差。

    目前已有大量研究表明：MMPs与肿瘤的生物学行为密切相关，MMPs高表达的肿瘤，其侵袭和转移性较强。而肿瘤的侵袭和转移是衡量肿瘤生物学行为的最重要的指标，也是肿瘤致命性危害的根源。据临床统计，约有80%以上的肿瘤患者死于肿瘤的侵袭与转移。由于子宫内膜癌的发病机制目前尚无定论，所以联合检测MMP?26及ER在子宫内膜样腺癌中的表达将有助于对子宫内膜癌患者的生物学行为进行正确的评价，可为子宫内膜样腺癌的早期诊断、临床疗效判断及进一步治疗提供一些新的思路。

【】
  　　［1］乐杰.妇产［M］.第6版.北京:人民卫生出版社,2004：300?301.

　　［2］马正中. 诊断细胞病［M］.第1版. 郑州:河南科学技术出版社,2000：824.

　　［3］Marchenko GN.Characterization of matrix metalloproteinase?26, A novel metalloproteinase widely expressed in cancer cells of epithelial origin［J］.Biochem J. 2001,356(4):705?718.

　　［4］Isaka K, Nishi H.Matrix metalloproteinase?26 is expressed in human endometrium but not in endometrial carcinoma［J］.Cancar，2003,97(1):79?89.

　　［5］Pilka R, Norata GD.Matrix metalloproteinase?26 expressionis high in endometrial hyperplasia and decreases with loss of histological differentiation in endometrial cancer［J］.Gynecol Oncol，2004，94(3):661?670.

　　［6］Pozharisskii KM, Samsonova EA.Immunohistochemical profile of endometrioid adenocarcinoma of the uterus:ER,PR,HER?2,Ki?67 and their prognostic value［J］.Arkh Patol，2005，67(2):13?17.