墨旱莲水煎剂对致衰老小鼠肝脏中SOD、MDA、GSH?Px的影响

来源:岁月联盟 作者: 时间:2010-07-14

              作者:石变华 庄晓燕 白秀珍

【摘要】  目的 :研究墨旱莲对D?半乳糖致衰老小鼠肝脏中SOD、MDA、GSH?Px的影响。方法:通过测定小鼠肝脏SOD、GSH?Px的活性及MDA 的含量的变化,研究墨旱莲水煎剂的延缓衰老功效。结果:墨旱莲水煎剂会显著增强SOD、GSH?Px的活性,降低MDA的含量。结论:墨旱莲水煎剂有显著的延缓衰老作用。

【关键词】  墨旱莲; D?半乳糖; 衰老; 肝脏


  中药墨旱莲为菊科植物鳢肠(Eclipta prostrata L)的全草。其性味甘、酸、凉,入肝、肾、胃、小肠、大肠五经,对临床很多疾病有很好的效果。墨旱莲具有免疫调节、扩血管、抗诱变、抗炎等药理作用。本实验以D?半乳糖致衰老小鼠为研究对象,探讨墨旱莲的延缓衰老作用。

  1  材料和方法

  1?1  材料

  1?1?1  药品与试剂  墨旱莲购自锦州大德堂药房;MDA、SOD、GSH?Px测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所;其余试剂均为国产分析纯试剂。

  1?1?2  实验动物  昆明系小鼠,3月龄,25~30g,雌雄各半。由辽宁医学院实验动物中心提供。

  1?1?3  墨旱莲水煎剂的制备  ①制备前准备:墨旱莲干品蒸馏水漂洗3次,烘箱干燥后用粉碎机粉碎,过100目筛;②水煎剂的制备:将过筛的墨旱莲以蒸馏水浸泡半小时,加热至沸腾,文火煮1小时,如此反复3次,将3次所得的煎出液混合后减压浓缩,干燥后待用;③用药前准备:将提取物以蒸馏水溶解,配制成每毫升相当于生药1.0g的溶液。

  1?2  方法

  1?2?1  实验动物分组及用药  取昆明系小鼠50只,随机分成5组,每组10只。Ⅰ组空白对照组,Ⅱ组半乳糖致衰组,Ⅲ组低剂量用药组,Ⅳ组中剂量用药组,Ⅴ组高剂量用药组。Ⅰ组每日灌胃生理盐水,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组每日皮下注射D?半乳糖1mg/10g鼠重,同时灌胃墨旱莲水煎剂分别为6mg/g、12mg/g、24mg/g鼠重。连续42天,第43天取材检测。

  1?2?2  肝组织SOD、MDA和GSH?Px的测定  按照试剂盒说明书测定。

  1?2?3  数据处理  实验数据采用SPSS11.5统计软件处理,均值及标准差均采用t检验。

  2  结果

  Ⅱ组与Ⅰ组比较血清和肝脏SOD、GSH?Px的活性降低且MDA的含量升高;Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组中肝脏SOD、GSH?Px的活性与Ⅱ组比较均有不同程度的升高且MDA的含量有不同程度的降低,即墨旱莲由于剂量不同表现出不同程度的延缓衰老作用。其中尤以Ⅴ组的作用最显著。见表1。

  表1  墨旱莲水煎剂对肝的延缓衰老作用(略)

  注:与正常组相比,* P<0.01; 与D?半乳糖组相比,# P<0.05,## P<0.01。

  3  讨论

  正常机体的自由基氧化作用与抗氧化防御作用处于动态平衡状态。当清除自由基的酶和非酶系统的防御功能减退时,这种动态平衡失调,导致生物体老化[1]。D?半乳糖亚急性中毒动物是国内外近年常用的衰老模型[2],已证明D?半乳糖可产生拟衰老反应,对氧自由基代谢的损伤与人体衰老的改变基本一致[3]。本实验D?半乳糖致小鼠衰老,实验结果显示Ⅱ组小鼠SOD、GSH?Px的活性及MDA的含量与Ⅰ组比较有显著差异(P<0.01),证明本实验D?半乳糖致衰老模型成功。国内已有实验证实墨旱莲黄酮类提取物有延缓衰老的作用[4]。本实验利用D?半乳糖制造小鼠衰老模型,给小鼠口服不同剂量的墨旱莲水煎剂。从表1中可看出,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组中SOD、GSH?Px的活性高于Ⅱ组及MDA的含量低于Ⅱ组,且呈剂量依赖性,说明墨旱莲水煎剂对D?半乳糖致衰老小鼠有显著延缓衰老作用。细胞线粒体是氧自由基损伤的主要靶位,也是细胞内源性氧自由基的主要来源[4]。线粒体的老化是细胞衰老的重要原因之一[5]。脂质过氧化(LPO)产物MDA的水平往往可反映活性氧损伤程度。抗氧化酶SOD和GSH?Px活性是反映机体抗氧化能力的重要指标。所以认为墨旱莲的延缓衰老的作用机理可能是保护线粒体免受自由基损害。墨旱莲延缓衰老作用的有效成分可能是黄酮类成分[6],具体还有待于进一步研究。

【】
    1 Nohl H.Involvement off reeradi calsinageing:a consequence or cause of senescence. Bri Med Bull,1993,49(3):653?

  2 龚国清, 徐黻本.小鼠衰老模型的研究.药科大学学报, 1991, 22:101~103.

  3 张熙,李文彬. D?半乳糖亚急性中毒大鼠拟衰老生化改变. 中国药与毒理学杂志,1990,4(4):309?

  4 许春富. 自由基清除剂对脑缺血的保护作用. 国外医学脑血管病分册,1994,2:213?

  5 刘永海,吴丽娟,陈清棠. 线粒体形态结构随增龄的变化. 中华老年医学杂志,1996,15(2):122?

  6 林朝朋,芮汉明,许晓春. 墨旱莲黄酮类提取物抗自由基作用及体内抗氧化功能的研究.军事医学院院刊,2005,4:344~345,362?