姜黄素对高脂血症大鼠TXB2、6-Keto-PGF1α的影响

         作者：孙玉凤 陈志强 丁奇峰 尹智炜 李红霞 方敬 

【摘要】  目的 观察姜黄素对高脂血症大鼠血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)的影响，探讨其延缓动脉粥样硬化形成的可能机制。方法 60只大鼠随机分为正常组、模型组、辛伐他汀组、姜黄素组。正常组喂饲普通饲料，其他3组喂饲高脂饲料，共4周。第5周开始，姜黄素组、辛伐他汀组分别灌服姜黄素0.571 g/(kg·d)、辛伐他汀5.71 mg/(kg·d)；正常组和模型组灌以相应剂量的0.9%氯化钠注射液，共6周。至10周末，取静脉血检测TXB2、6-Keto-PGF1α的水平。结果 模型组大鼠血浆TXB2含量明显升高(P<0.01)，6-Keto-PGF1α含量显著降低(P<0.01)。辛伐他汀组、姜黄素组与模型组比较，血浆TXB2水平明显下降(P<0.01)，血浆6-Keto-PGF1α水平明显上升(P<0.01，P<0.05)；辛伐他汀组与姜黄素组比较，血浆TXB2水平无统计学意义(P>0.05)，血浆6-Keto-PGF1α水平姜黄素组高于辛伐他汀组(P<0.01)。结论 姜黄素可增加前列环素含量，减少缩血管物质TXA2的分泌，防止血栓形成，延缓动脉粥样硬化的形成。

【关键词】  姜黄素；高脂血症；血栓烷B2；6-酮-前列腺素F1α；降血脂药(中药)；胶囊剂

　　The effect of Jianghuangsu on TXB2、6-Keto-PGF1α on the experimental hyperlipidemic rats    
　　【Abstract】  Objective  To observe the effect of Jianghuangsu on Thromboxane B2(TXB2)、6-Keto-PGF1α to investigate its probable mechanism of action. Methods  60 rats used in this investigation were randomly divided into four groups: 15 in normal group, 15 in the model group 15 in the simvastatin group and 15 in Jianghuangsu group. The normal control group was fed with normal diet, and other three experimental groups with high-fat diet from the first day of the experiment for four weeks.The drugs were administrated by gavage from the beginning of the fifth week. The Jianghuangsu group were administrated with Jianghuangsu (0.571 g·kg-1·d-1), simvastatin group were administrated with simvastatin (5.71 mg·kg-1·d-1). Normal saline was given to rats of normal control group and model group (0.571 g·kg-1·d-1). Each group was given gavage for six weeks. At the ending of the tenth week,to detect the level of TXB2、6-Keto-PGF1α.Results  Compared with normal group, the TXB2 content in model group was significantly increased (P<0.01), and the 6-Keto-PGF1α content was significantly decreased (P<0.01). Compared with model group, the TXB2 contents in two treatment groups were significantly decreased (P<0.01), and the 6-Keto-PGF1α contents were significantly decreased (P<0.05). In two treatment groups, the TXB2 contents had no difference (P>0.05), and 6-Keto-PGF1α content of Jianghuangsu group was higher than that of simvastatin group (P<0.01). Conclusion  Jianghuangsu could have the effects of anticoagulation, preventing thrombus and antiplatelet aggregation, enhancing the activity of PGI2 and decreasing the secretion of vaso-excitor material TXB2.
   
　　【Key words】  Jianghuangsu; Hyperlipoidemia; Thromboxane A2; PGI2

　　高脂血症(hyperlipemia,HLP),是指机体正常的脂类代谢失去平衡，致使血中一种或者几种脂质成分出现明显异常,是许多疾病的重要致病因素，尤其是引起或加重动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的重要危险因素。高脂血症可引起血管内皮损伤，引发AS的形成，在其形成过程中，伴血栓素A2（TXA2）与前列腺素I2（PGI2）的平衡失调，进而促进血小板聚集，加速AS的形成。由于 TXA2、PGI2在体内极不稳定，在短时间内水解成无活性的血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)，所以检测血浆TXB2、6-Keto-PGF1α的含量即可反映TXA2、PGI2的水平。本实验应用高脂饲料复制高脂血症大鼠模型，以西药辛伐他汀片为对照，观察姜黄素对高脂血症大鼠TXB2和6-Keto-PGF1α的影响，并探讨其延缓AS形成的可能机制。

　　1  材料与方法

　　1.1  实验材料

　　1.1.1  实验动物  清洁级健康雄性Sprague-Dauley(SD)系大鼠60只，体质量200～250　g，由河北医科大学动物实验中心提供(动物合格证号：冀医动管字04259号)。

　　1.1.2  实验药品  姜黄素由石家庄神威药业有限公司提供(商品名：降脂通络软胶囊，每粒0.5 g，含姜黄素类化合物50 mg，批准文号：国药准字Z20040032，批号：0404205)；辛伐他汀片由杭州默沙东有限公司生产(批号：96031)。

　　1.1.3  主要试剂  TXB2、6-Keto-PGF1α放免试剂盒，解放军总科技开发中心放免所。

　　1.2  实验方法

　　1.2.1  造模与动物分组  普通喂养SD大鼠1周，使其适应环境。1周后禁食不禁水12 h，眶内采血检测血脂，均为正常者用于实验。随机分为4组：即空白对照组(以下简称正常组)15只、模型对照组(以下简称模型组)15只、辛伐他汀组(以下简称辛伐他汀组)15只、姜黄素治疗组(以下简称姜黄素组)15只。

　　1.2.2  模型复制  应用高脂饲料喂养SD大鼠复制高脂血症模型。正常组喂饲普通饲料，其他3组自实验第1日起喂饲高脂饲料。饲料中含2%胆固醇、0.3%去氧胆酸钠、7.5%猪油、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%蛋黄粉、85%基础饲料，进食量控制在15～100 g/d，分早、中、晚三餐定时定量分别给予［1，2］。持续4周，第4周末禁食不禁水12 h，眶内采血检测血脂，模型大鼠血脂升高且稳定后，确认为高脂血症造模成功。

　　1.2.3  治疗方法  治疗各组采用直接灌胃法，于第5周起开始灌胃给药，每日1次，共6周。姜黄素组灌服姜黄素0.571 g/(kg·d)，为成人剂量的20倍［3］；辛伐他汀组灌服辛伐他汀5.71 mg/(kg·d)，为成人剂量的20倍；正常组和模型组灌以等容量的0.9%氯化钠注射液。

　　1.2.4  血液标本的制备及检测  取一次性5 mL注射器吸取消炎痛-EDTA·Na2液约0.2 mL，快速静脉穿刺取血3 mL，即刻在注射器内颠倒混匀，注入试管内，4℃，3 500 r/min离心15 min分离血浆， -20℃保存。TXB2、6-Keto-PGF1α检测均严格按照放免试剂盒说明书，应用GC-1200γ放免计数器(科大创新股份有限公司中佳公司生产)上进行检测。

　　1.2.5  统计学方法  数据处理采用SPSS 11.5统计软件，用均数±标准差(±s)表示，采用单因素方差分析，以P<0.05或P＜0.01为差异有统计学意义。

　　2  结果
   
　　各组大鼠TXB2、6-Keto-PGF1α含量比较见表1。

　　表1  各组大鼠TXB2、6-Keto-PGF1α含量比较（略）

　　与模型组比较，?P<0.05；与姜黄素组比较，△P<0.01

　　由表1可见，与正常组相比，模型组大鼠血浆TXB2含量明显升高(P<0.01)，6-Keto-PGF1α含量显著降低(P<0.01)。辛伐他汀组、姜黄素组与模型组比较，血浆TXB2水平明显下降(P<0.01)，血浆6-Keto-PGF1α水平明显上升(P<0.01，P<0.05)；辛伐他汀组与姜黄素组比较，血浆TXB2水平差异无统计学意义(P>0.05)，血浆6-Keto-PGF1α水平姜黄素组高于辛伐他汀组(P<0.01)。

　　3  讨论
   
　　高脂血症属中医学痰浊、瘀血范畴。姜黄，味苦辛，性温，归肝、脾二经，能宣通血中之气，使气行而血不壅滞，有理气活血化瘀、祛痰降浊等功效。姜黄素是从中药姜黄中提取的主要有效成分，临床用于高脂血症，尤宜气滞血瘀型［4，5］。
   
　　高脂血症可引起血管内皮损伤，引发AS形成，在其形成过程中，伴有血小板和内皮细胞结构和功能的改变。TXA2是强烈的血管收缩剂和血小板聚集促进剂；PGI2是血管内皮细胞分泌的重要舒血管活性物质，具有阻止血小板黏附聚集、抑制血栓形成、保护血管内皮的生物活性作用。正常情况下，TXA2与PGI2二者处于平衡状态，从而保持正常的血管张力及血小板内环境的稳定。脂质增加、血脂比例改变和(或)脂质质量异常都可能引起血管内皮细胞（EC）的损伤，使之产生PGI2的功能下降，在受损内皮黏附血小板及脂质过氧化的参与下，进一步刺激血小板合成并释放大量的TXA2入血，黏附更多的血小板形成血栓；TXA2/PGI2比值升高又可诱发白细胞附壁、炎性浸润、纤溶活性降低，并能促进内皮细胞释放生长因子，刺激成纤维细胞、平滑肌细胞的增生和迁移，形成AS。因此，调整TXA2/PGI2比值使其处于平衡状态，对于防止因高脂血症引发的AS及血栓的形成具有重要的临床意义。
   
　　本实验结果表明高脂血症大鼠存在明显的TXA2、PGI2平衡失调，而姜黄素可降低TXA2，升高PGI2的水平，纠正二者比值的失衡，其作用与辛伐他汀基本相似，提示姜黄素有抗凝、保护血管内皮、防止血栓形成的作用，延缓AS的发生。

【】
  　　［1］ 蔡波,郑惠珍.高脂饮食对大鼠动脉血管张力的影响［J］.广东医学院学报,2000,18(3):239-240.

　　［2］ 苗明三.实验动物和动物实验技术［M］.北京：中医药出版社,1997：143-144.

　　［3］ 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学［M］.3版.北京：人民卫生出版社,2003：1202-1203.

　　［4］ 孙秀才,冯建章,裴晓阳,等.姜黄素对食高脂饲料家兔血管内皮功能的保护作用［J］.岭南心血管病杂志,2004,10(1):60-63.

　　［5］ 沃兴德,崔小强,唐利华.姜黄素对食饵性高脂血症大鼠血浆脂蛋白代谢相关酶活性的影响［J］.中国动脉硬化杂志,2003,11(3):223-226.