麻黄连轺赤小豆汤拆方抗过敏反应作用研究
作者：陈建 刘敏 王梅 赵国臣
【摘要】 目的：探讨麻黄连轺赤小豆汤方的配伍及其抗过敏反应的机制。方法：将麻黄连轺赤小豆汤方拆为解表散邪组、清热利湿组及调和营卫组。进行拆方实验，观察其对右旋糖酐致小鼠全身瘙痒实验、小鼠耳异种被动皮肤过敏反应实验及致敏大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒的影响。结果与结论:清热利湿组在3个实验中都不同程度地优于解表散邪组、调和营卫组。说明清热利湿药物在方中起着主要的作用，提示Ⅰ型变态反应性疾病的发生与可能与湿热毒邪蕴结密切相关。
【关键词】 麻黄连轺赤小豆汤／药效学；麻黄连轺赤小豆汤／应用；Ⅰ型变态反应
麻黄连轺赤小豆汤是《伤寒论》中的经典方剂，原本治疗阳黄兼表之证，具有清热利湿、解表散邪之功。后世医家根据其功效，广泛用于荨麻疹、湿疹、过敏性哮喘等过敏性疾病的治疗，取得了一定的疗效。已有实验证实该方确有抗过敏反应的作用［1］,为进一步明确该方的配伍规律，探索Ⅰ型变态反应性疾病的病机特点，为临床治疗Ⅰ型变态反应性疾病在选择治法上提供了一定的客观依据。
1 材料与试药
1.1 药物与试剂 对麻黄连轺赤小豆汤拆方得：解表散邪组(麻黄6g，杏仁10g，甘草6g)、清热利湿组(赤小豆30g，桑白皮18g，连翘6g)、调和营卫组(生姜6g，大枣10g)。药物剂量严格按《伤寒论》原方剂量与比例而来。原方中之连轺、生梓白皮现多不用，常以连翘、桑白皮代，本实验亦是如此。生药购于南京中医药大学国医堂药房，以10倍量水煎煮2次，合并滤液，浓缩成所需浓度，4℃保存。马来酸氯苯那敏片(湖北华中药业有限公司，批号：20041203)、右旋糖酐(上海华源长富药业有限公司，批号：040901103)、盐酸噻庚啶(上海复旦复华药业有限公司，产品批号：041007)、卵白蛋白(美国Sigma公司，A?5253，华美生物工程公司分装)、吸附百白破联合疫苗(生物技术集团公司上海生物制品研究所，批号：2004110104)等。
1.2 动物 昆明种小白鼠168只，普通级，雄性，体重18-22g；SD大鼠83只，普通级，全雄，体重180-220g，小鼠、大鼠均由南京中医药大学动物实验中心提供。以上动物均随机分组。
1.3 仪器 电动离心机(LDZ5?2，北京医用离心机厂)，752可见光/紫外光分光光度计(上海第二分析仪器厂)；OLYMPUS光学显微镜(日本，编号：290765)等。
2 方法与结果
2.1 麻黄连轺赤小豆汤及拆方组对右旋糖酐致小鼠全身瘙痒的影响［2］ 将84只小鼠随机分为7组，每组12只，分别为全方组、解表散邪组、清热利湿组、调和营卫组、西药对照组、模型组、空白组。于实验前7d起，中药全方组及各拆方组分别灌服配制好的相对应的中药20ml/kg，扑尔敏对照组灌药量为4mg/kg，模型组、空白组均灌服生理盐水20ml/kg，每天1次，连续7d。于第7d各组分别灌胃给药或生理盐水30min后，向小鼠尾静脉注射右旋糖酐(1.25mg/kg)。以小鼠前爪搔抓头部，后爪搔躯干，嘴咬全身各部位作为瘙痒指征，记录30min内小鼠搔痒次数，以此评价各组药物抗组胺止痒的作用。结果见表1。表1 麻黄连轺赤小豆汤及拆方组对右旋糖酐致小鼠瘙痒的影响结果，麻黄连轺赤小豆汤全方组与各拆方组相比较均有不同程度的差异，与扑尔敏组相比较无明显差异，P＞0.05。清热利湿组抗组胺作用优于解表散邪组，P＜0.05；明显优于调和营卫组，P＜0.01。解表散邪组抗组胺作用明显优于调和营卫组，P＜0.01。
2.2 麻黄连轺赤小豆汤及拆方组对IgE抗体产生的影响［2-3］ 抗血清制备：取上述大鼠21只，随机分为7组，分组如实验1。空白组大鼠分别于大腿两侧肌肉注射0.5ml的生理盐水，同时腹腔注射1ml的生理盐水，其余各组，均以1%的卵白蛋白生理盐水0.5ml分别肌注于大鼠的后腿两侧，同时腹腔注射免疫佐剂百白破疫苗1ml(每毫升含百日咳灭活杆菌90亿个)。于注射的第3d开始，除了空白组及模型组大鼠给以生理盐水1ml/100g以外，其余各中药组均灌以相对应的中药1ml/100g，西药对照组灌服盐酸噻庚啶0.625mg/kg。注射卵白蛋白后第12d，杀鼠，摘眼球取血，以3000转/min分离血清，15min，将各组血清混合，-40℃保存备用。
取上述小鼠84只，随机分为7组，分组如上。各组小鼠于两耳廓皮下分别注射相对应的原倍大鼠抗血清20μl/只，48h后尾静脉注射0.25ml含0.5%伊文思蓝及2mg/ml卵白蛋白溶液，0.5h后处死，剪下两耳蓝染部分皮肤，置丙酮-生理盐水(7：3)溶液5ml中静置48h，以3000转/min离心10min，取上清于610nm处测光密度值，结果见表2。表2 麻黄连轺赤小豆汤及拆方组对IgE产生的影响结果，全方组抑制IgE产生的作用明显优于各拆方组P＜0.01，但与盐酸噻庚啶组相比较差异不明显，P＞0.05。清热利湿组与解表散邪组相比差异明显，P＜0.01；与调和营卫组相比亦有明显差异，P＜0.01；解表散邪组与调和营卫组相比有明显差异，P＜0.01。
2.3 大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒实验［3］ 取6只雄性大鼠，体重180-220g，于两后腿分别肌肉注射卵白蛋白25mg/kg(1%的卵白蛋白生理盐水溶液0.5ml)，同时腹腔注射免疫佐剂百白破疫苗1ml(每毫升含百日咳灭活杆菌90亿个)。注射13d后，杀鼠，摘眼球取血，分离血清，将混合血清置于-40℃贮存，备用。
取健康大鼠56只，全雄，体重180-220g，随机分为7组，每组6只，分组如上。各中药组灌服上述相对应的中药1ml/100g，西药对照组灌服酮替芬0.2mg/kg，模型组与空白组,灌服生理盐水1ml/100mg，共7d。在给药后第5d，空白组大鼠头部皮下注射生理盐水0.25ml，其余各组大鼠均头部皮下注射抗卵白蛋白血清1：5稀释液0.25ml，大鼠最后一次给药50min后，每只大鼠均静脉注射0.5%卵白蛋白?伊文氏蓝生理盐水溶液1ml(伊文氏蓝浓度为0.25%)，30min后，颈椎脱臼处死，剪去颅顶部皮肤，将颅骨盖剪下，立即置于无水乙醇中脱水，1h后取出，放入无水甲醇溶液中固定过夜，用0.18%中性红酒精溶液染色1h，用水冲洗，细心剥离颅骨骨膜，展开于载玻片上，干燥后加盖玻片封固，光镜下计数100个肥大细胞中脱颗粒细胞数，算出脱颗粒率和抑制率。结果见表3。表3 麻黄连轺赤小豆汤及拆方组对大鼠颅骨肥大细胞脱颗粒的影响结果，全方组与各拆方组之间有显著性差异，P＜0.01；与西药对照组相比，亦有显著差异，P＜0.01。清热利湿组优于解表散邪组，P＜0.05；明显优于调和营卫组，P＜0.01；解表散邪组明显优于调和营卫组，P＜0.01。
3 讨论
Ⅰ型变态反应是临床过敏反应性疾病中较为常见的一种发病机制，从3个实验的结果来看，麻黄连轺赤小豆汤能抵抗组胺引起的瘙痒、抑制IgE抗体的产生、抑制肥大细胞脱颗粒，从而达到抗Ⅰ型变态反应的效果，可见麻黄连轺赤小豆汤是通过多途径、多靶点而发挥抗Ⅰ型变态反应作用。全方组在这3个方面均不同程度地优于各拆方组，体现了经方组方的严谨性和优化性。
在拆方实验中，清热利湿组在抗组胺、抑制IgE抗体的产生、抑制肥大细胞脱颗粒方面均优于解表散邪组及调和营卫组，体现了清热利湿法在Ⅰ型变态反应疾病中的重要地位，提示湿热毒邪蕴结似与Ⅰ型变态反应疾病的发生与有着密切的联系。
【】
［1］邱明义，李小慧，石 拓，等.麻黄连翘赤小豆汤血清对肥大细胞脱颗粒、组胺生成的影响［J］.中药药理与临床，2003，19(5):3-4.
［2］陈明岭，万慧颖，姚 干.养血止痒胶囊对小鼠血虚及瘙痒模型的影响［J］.成都中医药大学学报，2001，24(3):27-29.
［3］杨 旭，杨伟鹏，冷艳枫.紫癜灵对大鼠颅骨肥大细胞脱颗粒影响的实验研究［J］.中医药信息，2004，21(2):55-56.
