祛风宣痹方对哮喘豚鼠细胞粘附分子（ICAM?1）的影响
作者：史锁芳 吴寒 范一平 朱萱萱 赖仁胜
【摘要】 ［目的］探讨祛风宣痹方（平哮合剂）对支气管哮喘的作用机理。［方法］用卵蛋白致敏豚鼠复制支气管哮喘动物模型，用祛风宣痹方（平哮合剂），观察动物血浆中细胞粘附分子（ICAM?1）水平的变化。［结果］实验性哮喘豚鼠发作时血浆中细胞粘附分子（ICAM?1）水平显著高于正常对照组，祛风宣痹方（平哮合剂）对实验性哮喘豚鼠中细胞粘附分子（ICAM?1）水平有明显降低作用(95%可信区间为20.387～53.834u/ml)（P<0.01）。［结论］祛风宣痹方（平哮合剂）有效治疗哮喘的作用与抑制细胞粘附分子（ICAM?1）产生密切有关。
【关键词】 祛风宣痹方;哮喘;细胞粘附分子;病理形态学;实验研究
Abstract: ［Objective］ To discuss the functional mechanism of Qufeng Xuanbi(remove wind and apoplexy)Formula(Pingxiao Heji) on bronchia asthma. ［Method］ Make bronchia asthma animal model with guinea pig sensitized by egg albumen, treat it with Qufeng Xuanbi Formula, observe the changes of cell adhesion molecular(ICAM?1) in animal plasma. ［Result］ When experimental guinea pig was attacked by asthma, the ICAM?1 was obviously more than that in normal control group, the formula could markedly lower ICAM?1(95% of the believable zone 20.387～53.834u/ml)（P<0.01）.［Conclusion］ Qufeng Xuanbi Formula can effectively treat asthma, which is closely related with ICAM?1.
Key words： Qufeng Xuanbi Formula; asthma; ICAM?1; pathological morphology; experimental research
哮喘是一种以慢性气道炎症为基础,具有气道高反应性特点的疾病。笔者通过观察祛风宣痹方（平哮合剂）对实验动物细胞粘附分子（ICAM?1）、病理形态学的影响,藉此来探讨其作用机理。
1 材料与方法
1.1 药品与动物
祛风宣痹方（平哮合剂）由江苏省中药剂科提供,每瓶250ml(相当于生药201g)。醋酸地塞米松由浙江仙居制药股份有限公司提供。健康豚鼠45只,体重250～350g,雌雄各半,由南京医科大学动物实验中心提供。
1.2 主要试剂及器材
卵蛋白片由医药(集团)上海化学试剂站提供；豚鼠ICAM?1试剂盒(美国BPB BIOMEDICALS,INC公司提供)；超声雾化器：S?888E型,中外合资南京道芬有限公司生产。
1.3 分组及造模
将豚鼠随机分为5组,即正常组、模型组、祛风宣痹方高剂量组、祛风宣痹方低剂量组、地塞米松组，每组9只。按国际常用方法：以卵蛋白致敏和攻击加以复制［4］,无菌条件下,每只动物腹腔注射配制好的10%卵白蛋白溶液1ml,正常组以生理盐水代替卵白蛋白处理。使致敏豚鼠出现呛咳,呼吸加深加快,点头运动,抽搐,跌倒等症状为止,表示诱喘成功。同样,正常组以生理盐水处理动物，在诱喘前1h灌胃给药［祛风宣痹方高剂量组按25ml/kg,小剂量组按12.5ml/kg,地塞米松组按1ml/kg,正常组与哮喘组予12.5ml/kg生理盐水灌胃］,持续7d,于第7天诱喘15min后采集标本。以2%戊巴比妥1.5ml腹腔注射麻醉动物,无菌操作分别从每只豚鼠颈部分离出颈动脉,放血5ml入试管,3000r/min离心10min,分离上清液,放于-20℃保存,待测ICAM?1。按照试剂盒所附的操作说明采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定。取右肺中叶固定部位切取肺组织块，10%福尔马林固定，常规石蜡包埋切片，HE染色，光镜观察肺组织炎性细胞浸润情况。
1.4 统计学处理
采用SPSS软件作单因素方差分析。
2 结果
2.1 各组细胞粘附分子结果，见表1。表1 各组细胞粘附分子结果比较(略)
由表1可以看出，祛风宣痹方（平哮合剂）两组与模型组相比明显降低(P<0.01)，与正常对照组和地塞米松组相比(P>0.05)，平哮合剂两组无显著差异(P>0.05)。组间无量效关系。
2.2 豚鼠肺组织病理变化
模型组豚鼠肺组织镜下可见：肺泡腔内有大量嗜酸性细胞、淋巴细胞、中性粒细胞等浸润，支气管、血管周围结缔组织结构不清，肺泡壁普遍增厚，其内血管扩张，支气管上皮变性、坏死程度较重，血管高度充血，粘膜水肿。正常组无此特点，经后，地塞米松、祛风宣痹方高剂量组、低剂量组豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞及其他炎性细胞浸润明显减少，组织充血水肿现象明显减轻。
3 讨论
气道粘膜中中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及淋巴细胞的浸润与毛细血管内皮细胞特异性粘附分子的表达、增多相平行［1］。在炎症期间,抗原物质刺激肥达细胞、巨噬细胞和Ｔ细胞局限性地释放炎症介质如组胺、白三烯、前列腺素及其它细胞因子等可刺激血管内皮细胞表达粘附分子,使循环血中的白细胞与血管内皮细胞粘附,粘附的白细胞被活化,并表达其它粘附分子,引起白细胞跨内皮细胞的移动,从而导致支气管组织中以嗜酸性粒细胞为主的炎性细胞浸润［2］。因此目前认为粘附分子在炎性细胞向气道炎区跨内皮转移和浸润中发挥关键作用,是支气管哮喘发病机制中的重要活性物质［3］。由于细胞粘附分子（ICAM?1）在哮喘气道炎症早期阶段具有重要作用,因此，以抑制其表达和合成为目标的研究为哮喘的防治提供了新的治疗途径。
本实验发现哮喘发作时细胞粘附分子（ICAM?1）增高，经祛风宣痹方（平哮合剂）治疗后ICAM?1含量明显降低（与模型组相比，P<0.01），病理形态学也证实该方对豚鼠哮喘病理具有明显改善和保护作用，本研究显示祛风宣痹方（平哮合剂）是通过抑制细胞黏附而发挥其抗炎平喘效应的。
【】
［1］刘镜愉.职业与环境过敏性疾病的研究现况［J］.中华劳动卫生职业病杂志,2000,18(2):B114?116.
［2］HorvathovaM, JahnovaE, GazdikF,et al.缺篇名［J］.BiolTraceElemRes,1999,69(1):55226.
［3］商艳.细胞粘附分子与支气管哮喘.国外医学呼吸系统分册［M］.补出版地、出版社2001，21（3）：140?142.
