小儿葫芦散对大鼠毒性的实验研究

来源:岁月联盟 作者:白瑶,朴晋华 时间:2010-07-13

【摘要】  目的:观察小儿葫芦散对大鼠的毒性反应,对小儿葫芦散作临床安全性再评价。方法:选用Wister大鼠为受试动物,观察小儿葫芦散以生药3 g/kg、6 g/kg的剂量1次/d给药,连续4 w以观察其毒性反应。结果:给药期间动物的一般情况、体重与生理盐水组比较无显著性差异。实验4 w及恢复期血常规和血液生化指标给药组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。动物尸检各主要脏器未见明显病理改变,对照组动物脏器系数和各给药组相比无明显差异,且均在正常范围,各器官组织未见病改变。结论:小儿葫芦散连续4 w给大鼠灌胃给药未出现任何毒性反应。

【关键词】  小儿葫芦散;大鼠;毒性;实验研究

    Experimental Study of Toxicity of Xiaoer Hulu Powder on Wister Rats

    Bai Yao, Piao Jinhua

    (Shanxi College of  TCM, Taiyuan Shanxi 030024)

    Abstract   Objective:To observe the toxicity of Xiaoer Hulu powder on Wister rats. Method: 72 Wister rats were randomly divided into normal group, Xiaoer Hulu powder group 1(3 g/kg), group 2(6 g/kg). Xiaoer Hulu powder group 1 and group 2 were given Xiaoer Hulu powder by stomach perfusing respectively once a day for four weeks. Then body weighs, hematological indexes, biochemical indexes of the blood and pathological changes of rats were observed. Result: The diffrerence of body weighs, hematological indexes, biochemical indexes of the blood, pathological changes and organ coefficients were not obvious between Xiaoer Hulu powder groups and normal group. Conclusion: Xiaoer Hulu powder had no toxicity on Wister rats.

    Key words   Xiaoer Hulu powder; rats; toxicity; experimental study小儿葫芦散是由橘红、茯苓、朱砂、鸡内金(炒)、天麻等中药组成的复方制剂。为了确保小儿葫芦散的临床用药安全性,在此我们对其毒性进行再评价。由于本品难以测出半数致死量(LD50),故选用大鼠为受试动物,观察本品连续4 w给大鼠灌胃所产生的毒性反应、首发症状和严重程度、毒性反应的靶器官及其恢复和情况,并确定无毒反应剂量,为拟定临床患者的安全使用剂量提供。

    1   材料与方法

    1.1   实验材料

    1.1.1   实验动物   Wister大鼠80只,雌雄各半,体重为120 g~160 g,由山西医科大学实验动物中心提供。动物合格证号:晋动(证)字第070101;实验动物使用合格证号:SYXK(晋)2003-2005。

    1.1.2   药品与试剂   小儿葫芦散,批号:020503。实验前用蒸馏水配成所需浓度。生化试剂及质控血清由中生北控生物科技股份有限公司提供。

    1.1.3   实验仪器   天平和Olympus显微镜(日本产);BTS-370全自动生化仪(西班牙产);KX-21N血球分类计数仪(日本产)。

    1.2   实验方法

    实验方法参照[1]、[2]进行。将大鼠按体重性别随机分为对照组、小儿葫芦散低、高剂量组(分别简称低剂量组、高剂量组)3组,每组各24只,雌雄各半。3组大鼠分别灌胃生理盐水、小儿葫芦散低剂量(3 g/kg,相当于临床剂量50倍)、高剂量(6 g/kg,相当于临床剂量100倍),每日1次,连续4 w。给药前后逐日观察动物的行为、活动、毛发、分泌物、饮食、粪便及死亡情况等。每周称体重1次,根据体重变化调整给药量,给药期间,每天自由摄取饲料,自由饮水。对死亡动物立即行尸检及病理检查,末次给药后24 h及恢复期(停药2 w后)对动物腹腔采血,做血液学检查:测定红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、白细胞总数(WBC)和分类、血小板(PLAT)、凝血时间(CT)。并做生化学检查:测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基转换酶(AST)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(T-Bil)、肌酐(Scr)、血糖(Glu)八项指标。同时进行尸检,取主要脏器称湿重,按(脏器重量/体重)×100%求脏器系数,并作病理学检查,结果进行统计学处理。

    2   结   果

    2.1   一般观察

    给药期间,各组大鼠一般状态如行为、活动、毛色及光泽、精神状况、饮水及尿、粪便均无异常变化。

    2.2   体重变化

    各组动物体重随年龄增长而增加,各给药组与对照组体重增长趋势相比较,无显著性差异(P>0.05)。

    2.3   血液学检查

    结果见表1、表2。

    结果表明,各剂量组和对照组比较各项指标均无明显差异(P>0.05)。

    2.4   血液生化学检查

    见表3、表4。

    结果表明,各给药组与对照组比较无显著性差异(P>0.05);且检测数据在正常数据范围内。

    2.5   病检查

    2.5.1   剖检   各组给药4 w及恢复期时,检查内脏心、肝、脾、胃、肾、胸腺、睾丸、肾上腺和子宫等,均未见异常表现。

    2.5.2   脏器系数   结果见表5、表6。

    结果表明,给药4 w时,各给药组脏器系数与对照组比较无显著性差异(P>0.05);停药2 w后,各组之间脏器系数无显著性差异(P>0.05)。

    2.5.3   组织学检查   取各组大鼠的心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、睾丸和子宫等脏器,用10%福尔马林固定,石蜡切片,HE染色,光镜观察。结果各给药组和对照组比较,未发生组织病理变化。

    3   讨   论

    小儿葫芦散以生药3 g/kg和6 g/kg的剂量连续给Wister大鼠灌胃给药4 w,结果4 w内未见动物死亡,体重增长在正常生理范围内。另外,动物的毛发光洁,活动自如,粪便正常。血常规和血液生化学检查结果表明,各参数均在正常值范围内,各给药组与对照组比较,无明显统计学差异(P>0.05)。病理和组织病理学检查结果显示,动物各脏器无肉眼可见的病理改变,光镜检查各脏器未见病理性损伤,脏器系数均在正常值范围内。从本文实验结果可见,小儿葫芦散以生药6 g/kg的剂量灌胃给药4 w,大鼠未出现毒性反应,而6 g/kg的剂量相当于临床剂量的100倍,这为小儿葫芦散的临床用药提供了重要的参考意义。

【参考】
  [1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典(一部)[M]. 北京:化学出版社,2000.

[2]袁伯俊. 新药临床前安全性评价与实践[M]. 北京:军事医学出版社,1997:43-61.